Физиологическое состояние про - и антиоксидантной системы уток в различные периоды онтогенеза
Автор: Вишневский Ю.А., Пудовкин Н.А., Алексеев А.А.
Статья в выпуске: 3 т.243, 2020 года.
Бесплатный доступ
В статье изложены результаты исследований по особенностям протекания процессов перекисного окисления липидов и активности каталазы в организме уток в различные возрастные периоды. Установлено, что в различные периоды постнатального онтогенеза в организме уток наблюдается усиление процессов прооксидации. Установлено, что уровень супероксиданионрадикала к 30 суткам повысился на 22 %, к 60 суткам - на 39,5 % относительно первых суток возраста, так же отмечены значительные изменения в содержании МДА в сыворотке крови, мышцах и печени уток. Достоверное повышение активности каталазы зафиксировано в сыворотке крови, в тканях печени и сердца.
Утка, возраст, перекисное окисление липидов, антиоксидантная система, малоновый диальдегид, каталаза, глутатион, глутатионпероксидаза
Короткий адрес: https://sciup.org/142226032
IDR: 142226032 | DOI: 10.31588/2413-4201-1883-243-3-54-58
Текст научной статьи Физиологическое состояние про - и антиоксидантной системы уток в различные периоды онтогенеза
В защите организма от свободнорадикального окисления задействована анти-радикальная цепь, действие которой направлено на гашение свободных радикалов. В липидной фазе в качестве ловушки радикалов выступает α-токоферол, в водной – аскорбиновая кислота, биофлавоноиды и группа антиоксидантных ферментов – каталаза, глутатионредуктаза, глутатионпероксидаза, супероксиддисмутаза. Биогенные антиокислители можно разделить на две группы: водорастворимые и жирорастворимые. К первой группе биоантиокислителей относятся аскорбиновая, лимонная, бензойная кислоты, катехины, серосодержащие аминокислоты, ко второй – токоферолы, билевердин, флавоноиды, рутин, кверцитин, коэнзим Q, убихинон и некоторые стероидные гормоны [9].
Особенностями реакций процесса перекисного окисления липидов является их непостоянство. Интенсивность процессов про- и антиоксидации может зависеть от времени, сезона года и возраста организма.
Исходя из вышеизложенного, целью работы явилось изучение интенсивности процессов перекисного окисления липидов и активности антиоксидантной системы в онтогенезе у уток.
Материал и методы исследований. Исследования проводили в 2019 году на базе ФГБОУ ВО «Саратовский государственный университет имени Н.И. Вавилова».
Для проведения исследований были сформированы 4 группы по 6 уток в каждой. Декапитацию птиц проводили на 10, 30 и 60 сутки каждого сезона года после выведения из яиц, в соответствии с Европейской директивой по защите животных, используемых в научных целях [10].
Для изучения состояния процессов свободнорадикального окисления липидов изучали содержание малонового диальдегида (МДА) [7], диеновых коньюгатов [8], супероксиданион-радикала [5] в сыворотке крови и тканях внутренних органов.
Для оценки состояния антиоксидантной обеспеченности организма определяли активность ферментов каталазы в гомогенатах тканей, супероксиддисмутазы (СОД) [3] и содержание глутатиона в сыворотке крови [5]. Цифровой материал подвергался статистической обработке с вычислением критерия Стьюдента на персональном компьютере с использованием стандартной программы вариационной статистики Microsoft Excel.
Результаты исследований. Пер- вым этапом наших исследований было изучение некоторых показателей про- и антиоксидантной системы. Результаты исследований представлены в таблице 1.
Таблица 1 – Активность про- и антиоксидантной системы в организме уток в различные периоды онтогенеза
Показатель |
Возраст, в днях |
||
1 |
30 |
60 |
|
Окисленный глутатион, мг/% |
1,99±0,04 |
2,89±0,05* |
4,15±0,04* |
Восстановленный глутатион, мг/% |
35,99±1,09 |
37,92±2,33 |
38,92±1,66 |
Общий глутатион, мг/% |
37,98±2,43 |
40,81±2,66 |
43,07±2,01* |
Глутатионпероксидаза, НАДФН/мин |
390,32±6,94 |
276,74±7,00* |
170,02±1,99* |
Супероксиданион-радикал, ед/мин |
900,73±9,03 |
1099,93±93* |
1256,63±10,04* |
Диеновые коньюгаты, мкмоль/мл |
11,95±0,54 |
12,99±0,54 |
12,59±0,79* |
Примечание: * – р≤0,05
Установлено, что произошло достоверное повышение окисленного глутатиона на 45,2 % (30 сутки) и в 2 раза (60 сутки). Достоверное повышение общего глутатиона на 54,6 % установлено только на 60 сутки относительно первых. Особое внимание среди них привлекает глутатион (GSH), который содержится в клетках в милимолярных концентрациях и локализован практически во всех клеточных ком-партментах. Он принимает участие во многих ферментативных и неферментативных путях антиоксидантной защиты [1]. Поэтому относительно стабильный уровень содержания, восстановленного глутатиона крови уток в различные возрастные периоды может свидетельствовать о неразвитии оксидантного стресса в орга- низме птиц. В процессе постнатального онтогенеза у уток установлено достоверное снижение активности глутатионпероксидазы, к 30 суткам этот показатель снизился на 29,1 %, к 60 суткам – на 56,4 % относительно первых. Глутатионпероксидаза – важный компонент биохимической системы, синтезирующий и восстанавливающий низкомолекулярные тиолы [4]. Уровень супероксиданионрадикала к 30 суткам повысился на 22 %, к 60 суткам – на 39,5 % относительно первых суток возраста. Повышение содержания суперокси-данионрадикала можно объяснить усилением образования гипоксантина в ксантин и переходом ксантиндегидрогеназы в оксидазную форму, что характерно для возрастных изменений [6].
Таблица 2 – Содержание малонового диальдегида в тканях внутренних органов уток в различные возрастные периоды, (нмоль/г)
Исследуемая ткань |
Возраст, в днях |
||
1 |
30 |
60 |
|
Сыворотка крови |
8,95±0,73 |
10,21±0,96* |
17,00±0,04* |
Печень |
10,85±1,00 |
13,52±0,42* |
18,03±0,63* |
Сердце |
7,05±0,43 |
8,13±0,73* |
10,42±0,43* |
Легкие |
6,93±0,23 |
9,65±0,74* |
11,43±0,32* |
Мышечная ткань |
7,63±0,42 |
8,94±0,66* |
13,63±0,14* |
Мышечный желудок |
6,99±0,05 |
10,99±0,41* |
12,63±0,41* |
Железистый желудок |
8,83±0,13 |
11,00±0,08* |
11,26±0,52* |
Кишечник |
9,94±0,62 |
12,03±0,41* |
13,82±0,50* |
Примечание: * – р≤0,05
Достоверного повышения уровня диеновых коньюгатов не произошло. Результаты исследований по содержанию
МДА представлены в таблице 2.
Установлено, что произошло достоверное повышение концентрации МДА во
всех изучаемых тканях. Так к 30 и 60 суткам в сыворотке крови содержание МДА повысилось на 14,1 % и 89,9 %, в печени – на 24,6 % и 66,2 %, в сердце – на 15,32 и 47,8 %, в легких – на 39,3 % и 64,9 %, в мышцах – на 17,2 % и 78,6 %, в мышечном желудке – на 57,2 % и 80,1 %, в железистом желудке – на 24,6 % и 27,5 %, в кишечнике – на 21 % и 39 % соответственно.
Установлено, что возрастные изменения количественного изменения малоно- вого диальдегида в тканях уток зависят от исходного содержания и функции органа. Так, наиболее стабилен уровень МДА в тканях легких и желудка. Так же отмечены более существенные изменения в содержании МДА в сыворотке крови и мышцах. В печени уток к 60 суткам выявлен рост концентрации МДА.
Результаты исследований по активности каталазы в тканях внутренних органов представлены в таблице 3.
Таблица 3 – Активность каталазы в тканях внутренних органов уток в различные возрастные периоды, (ммоль\л)
Исследуемая ткань |
Возраст, в днях |
||
1 |
30 |
60 |
|
Сыворотка крови |
89,02±0,94 |
110,62±1,00* |
113,47±0,78* |
Печень |
100,94±0,63 |
118,00±1,63* |
120,52±1,00* |
Сердце |
70,52±0,62 |
80,93±0,52* |
89,02±0,63* |
Легкие |
73,04±0,89 |
76,12±0,88 |
76,03±0,62 |
Мышечная ткань |
65,04±0,77 |
68,05±0,33 |
68,99±0,84 |
Мышечный желудок |
66,94±0,33 |
68,94±0,64 |
69,21±0,74 |
Железистый желудок |
59,23±0,64 |
62,00±0,58 |
62,00±1,01 |
Кишечник |
67,76±0,54 |
69,32±0,84 |
71,23±0,69 |
Примечание: * – р≤0,05
Установлено, что произошло достоверное повышение активности каталазы в сыворотке крови к 30 суткам на 24,3 %, к 60 суткам – на 27,5 % относительно первых суток возраста. Повышение активности свободнорадикального окисления, прежде всего сказывается на эритроцитах, которые первыми исчерпывают свои компенсаторные возможности. В эритроцитах отсутствует белоксинтезирующий аппарат, в них не происходит обновления белковых молекул, в связи с чем, адаптивные свойства этих клеток и их роль в резистентности организма во многом зависят от соотношения прооксидантов и антиоксидантов [2].
Исходное содержание каталазы в ткани печени составило 100,94±0,63 ммоль/л, к 30 и 60 суткам этот показатель повысился соответственно на 16,9 и 19,4 % относительно первых. Печень принимает участие в процессах детоксикации, аккумуляции антигенов и выведения их из организма. Такие уровни активности каталазы свидетельствуют о том, что в гепатоцитах процессы ПОЛ протекают с высокой интенсивностью, а указанному ферменту принадлежит ключевая роль в АО защите данного органа
В сердце активность каталазы к 30 и 60 суткам повысилась на 14,8 % и 26,2 % соответственно. Повышение активности, по-видимому, связано с тем, что в условиях стимуляции образования активных форм кислорода активация каталазы препятствует накоплению пероксида водорода в кардиомиоцитах.
Заключение. В различные периоды постнатального онтогенеза в организме уток наблюдали усиление процессов прооксидации.
Установлено, что уровень суперок-сиданионрадикала к 30 суткам повысился на 22 %, к 60 суткам – на 39,5 % относительно первых суток возраста. Отмечены значительные изменения в содержании МДА в сыворотке крови, мышцах и печени уток. Достоверное повышение активности каталазы зафиксировано в сыворотке крови, в ткани печени и сердца.
Резюме
В статье изложены результаты исследований по особенностям протекания процессов перекисного окисления липидов и активности каталазы в организме уток в различные возрастные периоды. Установлено, что в различные периоды постнатального онтогенеза в организме уток наблюдается усиление процессов прооксидации. Установлено, что уровень супе-роксиданионрадикала к 30 суткам повысился на 22 %, к 60 суткам – на 39,5 % относительно первых суток возраста, так же отмечены значительные изменения в содержании МДА в сыворотке крови, мышцах и печени уток. Достоверное повышение активности каталазы зафиксировано в сыворотке крови, в тканях печени и сердца.
Список литературы Физиологическое состояние про - и антиоксидантной системы уток в различные периоды онтогенеза
- Вантеева, О.А. Глутатион у женщин с гемоконтактными вирусными гепатитами В и С / О.А. Вантеева, Б.А. Федоров // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. -2014. - № 5 (99). - С. 48-51.
- Коляда, М.Н. Влияние соединений ртути и олова на активность каталазы гемолизата эритроцитов крови человека in vitro / М.Н. Коляда, В.П. Осипова, Н.Т. Пипия [и др.] // Вестник Астраханского государственного технического университета. - 2005. - № 6 (29). - С. 60-65.
- Королюк, М.А. Медицинская биохимия / М.А. Королюк // Лабораторное дело. -1988. - № 1. - С. 40 - 41.
- Кулинский, В.И. Система глутатиона / В.И. Кулинский, Л.С. Колесниченко // Биомед. химия. - 2009. - Т. 55. - Вып. 3. - С. 255-277
- Лабораторные методы исследования в клинике / под ред. B. Меньшикова, М.: Изд. Медицина. - 1987. - 368 с.
- Меньщикова, Е.Б. Окислительный стресс: патологические состояния и заболевания / Е.Б. Меньщикова, Н.К. Зенков, В.З. Ланкин [и др.]. - Новосибирск: Изд. АРТА. - 2008. - 284 с.
- Стальная, И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная // Современные методы в биохимии. М.: Изд. Медицина. - 1977. - С. 66 -68.
- Стальная, И.Д. Методы определения диеновой коньюгации ненасыщенных высших жирных кислот / И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии. М.: Изд. Медицина. -1977. - С.63-64.
- Черданцев, Д.В. Диагностика и лечение окислительного стресса при остром панкреатите / Д.В. Черданцев, Ю.С. Винник, Э.В. Каспаров [и др.]. -Красноярск, 2002. - С. 148.
- Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (Text with EEA relevance): European Commission: Brussels. -2010. - P. 47.