Гетерогенные катализаторы на основе гамма оксида алюминия с иммобилизованной ксиланазой для гидролитического разложения ксилана
Автор: Тамбасова Дарья Павловна, Любякина Полина Николаевна, Антонов Денис Олегович, Ковалева Елена Германовна
Рубрика: Биохимический и пищевой инжиниринг
Статья в выпуске: 1 т.9, 2021 года.
Бесплатный доступ
В данной работе были получены гетерогенные катализаторы на основе порошкового γ-оксида алюминия с иммобилизованным ферментом ксиланазой и проведено исследование их каталитической активности возможности их многократного использования. Целью работы являлось создание эффективной гетерогенной каталитической системы на основе γ-оксида алюминия с иммобилизованным ферментом для разложения природного полисахарида ксилана с максимальным выходом целевого продукта. В ходе работы проводилась иммобилизация ксиланазы на γ-Al2O3 двумя способами, а именно, физической адсорбцией и ковалентным связыванием с использованием глутарового альдегида как сшивающего агента. Реакции ферментативного гидролиза ксилана, исследование каталитической активности и операционной стабильности иммобилизованного фермента в 4-х циклах проводились на полученных системах. Образец оксида алюминия синтезирован золь-гель методом с температурой обжига 550 °С в течение 4 часов, что соответствует γфазе оксида алюминия. Заряд поверхности полученного образца был охарактеризован методом ЭПР pH-чувствительных нитроксильных радикалов. Установлено, что по сдвигам кривых ЭПР титрования поверхность γ-Al2O3 имеет положительный заряд, что подразумевает наличие центров Льюиса на поверхности. Было установлено, что каталитическая активность ксиланазы, иммобилизованной на поверхности γ-Al2O3 методом ковалентного присоединения через глутаровый альдегид выше, чем при иммобилизации посредством физической адсорбции в 1,83 раза и составляет 12,23U/мг. Найдено, что, ферментативная активность ковалентно иммобилизованной ксиланазы при первых двух циклах достаточно высока, на третьем цикле она снижается до 37,5 % и выходит на плато. При иммобилизации фермента физической адсорбцией активность продолжает снижаться до 23 % в 4-м цикле. Разложение ксилана гетерогенными каталитическими системами на основе γ-Al2O3 и иммобилизованного на нем различными способами фермента ксиланазы, и проведение сравнительного анализа полученных данных, позволяет сделать вывод о перспективности дальнейшего использования полученных систем, например, в птицеводстве в силу эффективности применения иммобилизованной ксиланазы в высвобождении редуцирующих сахаров.
Гетерогенный катализ, полисахариды, гидролиз, ксилан, иммобилизованные ферменты, ксиланаза, оксид алюминия, нитроксильные радикалы, электронный парамагнитный резонанс
Короткий адрес: https://sciup.org/147234335
IDR: 147234335 | DOI: 10.14529/food210107
Список литературы Гетерогенные катализаторы на основе гамма оксида алюминия с иммобилизованной ксиланазой для гидролитического разложения ксилана
- Bajpai P. Xylanolytic Enzymes / P. Bajpai. - Academic press, 2014. - 121 p.
- Laine C. [et al.] Extraction of xylan from wood pulp and brewer's spent grain // Industrial Crops and Products. - 2015. (70). - P. 231-237.
- Sousa S. [et al.] Surface properties of xylan and xylan derivatives measured by inverse gas chromatography // Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects. -2016. - (506). - P. 600-606.
- Ramawat K. G., Merillon J. M. Polysaccharides: Bioactivity and biotechnology / K. G. Ramawat, J. M. Merillon, 2015. 1-2241 p.
- Li H. [et al.] The hydrolytic efficiency and synergistic action of recombinant xylan-degrading enzymes on xylan isolated from sugarcane bagasse // Carbohydrate Polymers. - 2017. - (175). - P. 199-206.
- Soleimani M., Tabil L. G., Panigrahi S. A kinetic study of xylose recovery from a hemicellu-lose-rich biomass for xylitol fermentative production // Chemical Engineering Communications. -2019. - № 2 (206). - P. 193-206.
- Болотова К. С. Применение ферментных технологий для повышения экологической безопасности целлюлозно-бумажного производства / К.С. Болотова, Е. В. Новожилов // Химия растительного сырья. - 2015. - № 3. -С. 5-23.
- Саловарова В.П. Эколого-биотехноло-гические основы конверсии растительных субстратов: учеб. пособие /Ю.П. Козлов. - 2-е изд., перераб. и доп. -М. : Издательский дом «Энергия», 2006. - 544 с.
- Carvalho E.A. [et al.] Thermoresistant xylanases from Trichoderma stromaticum: Application in bread making and manufacturing xylo-oligosaccharides // Food Chemistry. - 2017. -(221). - P. 1499-1506.
- Thomas L. [et al.] Industrial Enzymes: Xylanases // Current Developments in Biotechnology and Bioengineering: Production, Isolation and Purification of Industrial Products. - 2016. - P. 127-148.
- Krajewska B. Application of chitin- and chitosan-based materials for enzyme immobilizations: A review // Enzyme and Microbial Technology. - 2004. - № 2-3 (35). - P. 126-139.
- Arya S.K., Srivastava S.K. Kinetics of immobilized cyclodextrin gluconotransferase produced by Bacillus macerans ATCC 8244 // Enzyme and Microbial Technology. - 2006. - № 3 (39). - P. 507-510.
- Nagar S. [et al.] Immobilization of xylanase on glutaraldehyde activated aluminum oxide pellets for increasing digestibility of poultry feed // Process Biochemistry. - 2012. - № 9 (47). - P. 1402-1410.
- Тихонов В. Н. Аналитическая химия алюминия. - М: Наука, 1971. - 266 с.
- Пантелеев И.Б. Получение и свойства алюмооксидного прекурсора / И.Б. Пантелеев, А.А. Циренников, Н.А. Андреева // Известия СПбГТИ(ТУ). - 2017. - № 40. - С. 8-12.
- ГОСТ 31488-2012 Препараты ферментные. Методы определения ферментативной активности ксиланазы. - М: Стан-дартинформ, 2012. - C. 2-10.
- Kovaleva E.G. [et al.] Interfacial Electrostatic Properties of Hydrated Mesoporous and Nanostructured Alumina Powders by Spin Labeling EPR // Cell Biochemistry and Biophysics. - 2017. - № 2 (75). - P. 159-170.
- Akratopulu K. C., Vordonis L., Lycourghiotis A. Effect of temperature on the point of zero charge and surface dissociation constants of aqueous suspensions of y-Al2O3 // Journal of the Chemical Society, Faraday Transactions 1: Physical Chemistry in Condensed Phases. - 1986. - № 12 (82). - P. 3697-3708.
- Fadouloglou V.E., Kokkinidis M., Glykos N.M. Determination of protein oligomerization state: Two approaches based on glutaraldehyde crosslinking // Analytical Biochemistry. - 2008. -№ 2 (373). - P. 404-406.
- Xiao H.Y. [et al.] Immobilization of laccase on amine-terminated magnetic nano-composite by glutaraldehyde crosslinking method // Transactions of Nonferrous Metals Society of China (English Edition). - 2006. - (16). -P. 414-418.
- Lopez-Gallego F. [et al.] Enzyme stabilization by glutaraldehyde crosslinking of adsorbed proteins on aminated supports // Journal of Biotechnology. - 2005. - № 1 (119). - P. 70-75.
- Lee H. R. [et al.] Preparation of glutaraldehyde-treated lipase-inorganic hybrid nanoflowers and their catalytic performance as immobilized enzymes // Enzyme and Microbial Technology. - 2017. - (105). - P. 24-29.
- Khramtsov V.V. and Volodarsky L.B. Biological Magnetic Resonance. - New York: Kluwer Academic Publishers, 2002. - P. 109180.
- Молочников Л.С. Метод спинового зонда в исследовании кислотности неорганических материалов / Л.С. Молочников, Е.Г. Ковалева, Е.Л. Головкина и др. // Коллоидный журнал. - 2007. - № 6. - С. 821-828.