Хроматографическая оценка степени интоксикации у больных механической желтухой

Автор: Бекбауов Са, Липницкий Е.М., Истратов В.Г.

Журнал: Вестник Национального медико-хирургического центра им. Н.И. Пирогова @vestnik-pirogov-center

Статья в выпуске: 3 т.8, 2013 года.

Бесплатный доступ

В статье авторами изучены и проанализированы способы диагностики эндогенной интоксикации с помощью газожидкостной хроматографией и масс-спектрометрией у 120 больных механической желтухой. С помощью факторного анализа определены величины удельных весов токсических кишечных метаболитов и оценены степени интоксикации.

Механическая желтуха, интоксикация, токсические кишечные метаболиты, хроматографический показатель интоксикации-(хпи)

Короткий адрес: https://sciup.org/140188226

IDR: 140188226

Текст научной статьи Хроматографическая оценка степени интоксикации у больных механической желтухой

В течение многих десятилетии хирурги предпринимают огромные усилия, чтобы оказать более эффективную помощь тяжелой категории больных с механической желтухой разного генеза.

При длительно сохраняющейся механической желтухе происходит срыв адаптационных механизмов к холестазу, что ведет к углублению дистрофических изменений в гепатоцитах и развитию очаговых изменений в печени. Общепринятые методы лабораторного анализа не всегда позволяет определить степень и выраженность интоксикации у данной категории больных.

Целью данного исследования является использование методов хроматографического и хромато-масс-спектрометрического анализа для оценки степени и интоксикации у больных механической желтухой разного генеза.

У 150 больных разного пола и возраста (табл. 1) механической желтухой различного генеза (билирубинемия 283 ± 7,0 мкмоль/л) методами газовой хроматографии и масс-спектрометрии выполняли изучение токсических кишечных метаболитов сыворотки крови (табл. 2)

Исследования проводили на хромато-масс-спектрометрической системе Agilent с масс-селективным детектором MSD – 5973 на базе клинико-биохимической лаборатории КДО ФГУ «Институт Хирургии им. А.В. Вишневского» Минздравсоцразвития РФ. Содержание жирных кислот и токсических метаболитов в периферической крови больных с механической желтухой представлены в табл. 2

В норме ЛЖК колеблется от 0,002 ммоль\л до 0,02 ммоль\л, и являются биохимическими маркерами печеночной недостаточности.

У всех обследованных больных содержание ТКМ в сыворотке крови оказались повышены: показа- тели уксусной кислоты составляло от 0,24 ± 0,03 до 0,29 ± 0,04 ммоль\л, что превышало норму более 17 раз, а показатели пропионовой кислоты от 0,38 ± 0,05 до 0,64 ± 0,07ммоль\л, валериановой кислоты от 0,26 ± 0,03 до 0,49 ± 0,05 ммоль\л, оксифенилкарбоновой кислоты от 0,46 ± 0,05 до 0,77 ± 0,08 ммоль\л, т.е. оказались повышенными в 24–38 раз. Незначительные повышения уровня токсических метаболитов, несмотря на декомпрессию желчных протоков в контрольной группе, мы обьясняем ранее развившейся гипоксией паренхимы печени. Появление токсических метаболитов анаэробных микрооганизмов в сыворотке крови свидетельствуют о выраженной эндогенной интоксикации организма, которая, усугубляя печеночную недостаточность, способствует к развитию полиорганной недостаточности. Принятые в клинической практике рутинные исследования по определению эндогенной интоксикации организма: лейкоцитарный индекс интоксикации(ЛИИ), определение молекулы средней массы(МСМ) не всегда точно отражает истинный уровень интоксикации, да к тому же уже несколько устарели. В связи с этим, мы предлагаем новые подходы определения эндогенной интоксикации с помощью ГХМС-анализом по содержанию токсических кишечных метаболитов анаэробных микроорганизмов.

Табл. 1. Распределение больных по полу и возрасту

возраст	мужчины		женщины		всего
возраст	кол-во	%	кол-во	%	кол-во	%
до 60 лет	17	11,5%	24	22%	41	34%
с 60 до 70 лет	18	12%	20	19,50%	38	32%
с 70 и выше	16	11%	25	24%	41	34%
Итого	51	34,50%	69	65,50%	120	100%

Табл. 2. Содержание ЛЖК и ТМ в периферической крови больных с механической желтухой различного генеза (M ± m, ммоль/л) n = 120

ЛЖК и ТМ в периферической крови (ммоль/л)	Доноры (n = 20)	Группы пациентов
ЛЖК и ТМ в периферической крови (ммоль/л)	Доноры (n = 20)	I (контроль)		II (рифаксимин)		(Ш) лактулоза
уксусная	0,06 ± 0,003	0,24 ± 0,03	0,29 ± 0,04	0,21 ± 0,03	0,15 ± 0,02	0,23 ± 0,03*	0,11 ± 0,02
пропионовая	0,08 ± 0,004	0,38 ± 0,05	0,64 ± 0,07	0,21 ± 0,03	0,14 ± 0,02	0,36 ± 0,04*	0,23 ± 0,03
масленая	0,10 ± 0,005	0,77 ± 0,08	1,04 ± 0,11	0,66 ± 0,07	0,41 ± 0,05	0,52 ± 0,06	0,32 ± 0,04
изовалериановая	0,09 ± 0,006	0,58 ± 0,06	0,69 ± 0,07	0,34 ± 0,04	0,14 ± 0,02	0,28 ± 0,03	0,19 ± 0,02
валериановая	0,04 ± 0,003	0,26 ± 0,03	0,49 ± 0,05	0,13 ± 0,02	0,03 ± 0,002	0,23 ± 0,03	0,16 ± 0,02
изокапроновая	0,12 ± 0,006	0,58 ± 0,06	0,67 ± 0,07	0,19 ± 0,02	0,09 ± 0,004	0,56 ± 0,06*	0,33 ± 0,04
капроновая	0,07 ± 0,003	0,31 ± 0,04	0,38 ± 0,05	0,33 ± 0,04	0,26 ± 0,03	0,30 ± 0,04*	0,22 ± 0,03
фенолы	0,13 ± 0,007	0,36 ± 0,04	0,59 ± 0,06	0,48 ± 0,05	0,33 ± 0,04	0,42 ± 0,05	0,29 ± 0,03
крезолы	0,15 ± 0,008	0,42 ± 0,05	0,67 ± 0,07	0,51 ± 0,06	0,36 ± 0,04	0,48 ± 0,05	0,28 ± 0,03
фенилкарбоновые	0,32 ± 0,04	0,79 ± 0,08	1,13 ± 0,12	0,88 ± 0,09	0,66 ± 0,07	0,81 ± 0,09	0,61 ± 0,07
оксифенилкарбоновые	0,26 ± 0,03	0,46 ± 0,05	0,77 ± 0,08	0,34 ± 0,04	0,18 ± 0,02	0,51 ± 0,06	0,22 ± 0,03
ди-и поли-амины	0,21 ± 0,03	0,54 ± 0,06	0,78 ± 0,09	0,64 ± 0,07	0,42 ± 0,05	0,61 ± 0,07	0,39 ± 0,04
ароматические амины	0,24 ± 0,04	0,66 ± 0,07	0,83 ± 0,09	0,73 ± 0,08	0,59 ± 0,06	0,77 ± 0,08	0,51 ± 0,06
С14–С20 изожирныекислоты	1,01 ± 0,13	1,25 ± 0,16	1,31 ± 0,18	1,19 ± 0,13	1,02 ± 0,09	1,17 ± 0,12	1,05 ± 0,08
АИ (соотношение анаэробов к аэробам)	69,3 ± 7,2	82,6 ± 7,3	83,1 ± 7,9	79,6 ± 8,1	78,8 ± 8,5	78,6 ± 8,1	76,9 ± 7,9

При оценке интоксикаций у больных мы посчитали необходимым учитывать те основные хроматографические показатели, величина удельного веса которых, входят в первую десятку (табл. 3).

Табл. 3. Приоритетный ряд основных хроматографических показателей у больных с механической желтухой (по данным факторного анализа)

N	Наименование показателя	Величина удельного веса
1	оксифенилкарбоновые кислоты	0,976
2	пропионовая кислота	0,958
3	ароматичесие амины	0,943
4	масляная кислота	0,941
5	изожирные высшие кислоты	0,937
6	изовалериановая кислота	0,923
7	фурановые эфиры	0,911
8	изокапроноая кислота	0,907
9	2-пропанамид	0,893
10	фенилкарбоновые кислоты	0,878

Это: оксифенилкарбоновые кислоты – 1 место, величина удельного веса – 0,976; пропионовая кислота – 2 место, величина удельного веса – 0,968; ароматические амины – 3 место, величина удельного веса – 0,943; масляная кислота – 4 место, величина удельного веса – 0,941; изожирные высшие кислоты – 5 место, величина удельного веса – 0,937; изовалериановая кислота – 6 место, величина удельного веса – 0,923; фурановые эфиры – 7 место, величина удельного веса – 0,911; изокапроновая кислота– 8 место, величина удельного веса – 0,907; 2-пропанамид – 9 место, величина удельного веса – 0,893; фенилкарбоновые кислоты – 10 место, величина удельного веса – 0,878.

Таким образом формула хроматографического показателя интоксикации выглядит следующим образом:

ХПИ = ∑К1S1 + К2S1 + К3S3 + К4S4 + К5S5, где: S1 – уровень содержания летучих жирны кислот – пропионовой, масляной, изовалериановой и изокапроновой в баллах; S2 – уровень содержания оксифенилкарбоновых кислот в баллах; S3 – уровень содержания ароматических аминов в баллах; S4 – уровень содержания изожирных высших кислот в баллах; S5 – уровень содержания фенилкарбоновых кислот в баллах; К1, К2, К3, К4, и К5 – соответствующие факторному анализу коэффициенты для каждого вида хроматографических показателей: для летучих жирных кислот – 3,7; для оксифенилкарбоновых кислот – 0,9; для ароматических аминов и изожирных высших кислот – 0,9; для фенилкарбоновых кислот – 0,8; вследствие чего хроматографический показатель интоксикации у больных с механической желтухой для контрольной и лечебных групп составило следующие данные и приведены в таблице № 4.

Табл. 4. Хроматографический показатель интоксикации у больных с механической желтухой (M ± m – ммоль/л)

ХПИ (доноры) n = 20	Контрольная группа n = 40	Рифаксимин n = 40	Лактулоза n = 40
18,3 ± 2,5	65,1 ± 7,8–72,3 ± 8,3	42,0 ± 5,9–22,0 ± 3,3	57,7 ± 6,3–34,8 ± 4,9

Примечание : в таблицах приведены доверительные интервалы с достоверностью p < 0,005 по сравнению с группой доноров и контрольной группой.

Как следует из таблицы 4: (ХПИ) хроматографический показатель интоксикации для контрольной группы составило 65,1 ± 7,8–72,3 ± 8,3 ммоль\ л, в группе с кишечным антибиотиком- рифаксимином – 42,0 ± 5,9–22,0 ± 3,3 ммоль\л, а в группе с пребиотическим препаратом лактулозой составило 57,7 ± 6,3–34,8 ± 4,9 ммоль\л, т.е. совершенно очевидно, что идет тенденция к снижению ХПИ.

Заключение

Таким образом, нами показано, что хромотографический показатель интоксикаций у больных с воздействием рифаксимина и лактулозы достоверно изменяли в сторону понижения и может служить для оценки эффективности воздействия препаратов у больных механической желтухой.

Список литературы Хроматографическая оценка степени интоксикации у больных механической желтухой

Истратов В.Г., Казеннов В.В., Шмычкова С.И., Зайцев С.В. Оценка степени интоксикации органных поражений в раннем послеоперационном периоде у больных после ПДР и гемигепатэетомии с помощью методов газовой хроматографии и масс-спектрометрии//Альманах анестезиологии и реаниматологии: материалы 3-ей сессии МНОАР. -2002. -№ 2. -27 с.
Киселев А.В., Яшин Я.И. Газоадсорбционная хроматография. -М.: Наука, 1967. -336 с.
Серажим О.А., Истратов В.Г. Газохроматографические и гистологические особенности течения раневого процесса при анаэробной клостридиальной инфекции мягких тканей. Актуальные вопросы общей хирургии: сборник научных трудов к 60-летию кафедры общей хирургии РГМУ, -М., 1998. -С. 68-73.
Столяров Б.В., Савиков И.М., Виттенберг А.М. Руководство к практическим занятиям по газовой хроматографии. -Л.: Изд. «Ленинградского Университета», 1973. -284 с.
Хазанов А.И. Функциональная диагностика болезней печени. М.: 1988, -302 с.
Benedict C.R., Rose J.A. Arterial norepinephrine changes in patients with septic shock//Circ. Shock. -1992. -Vol. 38. -P. 165-172.

Статья научная