Информативные показатели качества и функциональной направленности БАД для комплексной нутриетивно-метаболической поддержки организма

Разработка эффективных мер коррекции питания и здоровья - стратегическое направление современной нутрициологии на ближайшее время [2, 5, 9–11, 16, 17]. Это связано с широким распространением алиментарных заболеваний, приводящих к неоправданным социальным и экономическим потерям. Особую актуальность и практическую значимость в решении рассматриваемой проблемы имеет создание новых формул биологически активных добавок (БАД), как одной из значимых групп продуктов специализированного назначения, о чем свидетельствуют достижения отечественной науки и имеющийся мировой опыт [1, 3, 4, 6, 8, 12–15].

Разработана новая капсулированная форма БАД системного действия, функциональные свойства которой обусловлены синергическим влиянием рецептурных компонентов на коррекцию обменных процессов при различных заболеваниях. Одна капсула содержит, мг: рыбий жир гренландского лосося – 50 (эйкозапентаеновая кислота – 90, докоза-гексаеновая кислота – 60); масло льняное – 455 (альфа-линоленовая кислота – 200); липосомы – 150 (дигидрокверцетин – 7,5, фосфолипиды – 48); липоевая кислота – 9; витамин Е – 3,06 (токоферола ацетат – 3,0); селексен – 0,043 (селен – 0,01).

Материалы и методы исследования

В качестве материалов использованы исходное сырье, лабораторные и промышлен- ные образцы разрабатываемого продукта. Рецептурный состав включал следующие ингредиенты:

лавитол (дигидрокверцетин) (ТУ 9325-00170692152-07, СГР 77.99.26.9.У.2490.4.07), селексен (ТУ 9325-014-79899185-2007, СГР 77.99.26.9.У469.1.09), льняное масло (ТУ 9141-006-95947205-2011, СГР RU.77.99.121.003.Е.031521.08.11), лецитин (СГР 77.99.11.9.У.9056.8.06), мальтодекстрин (СГР 50.99.01.009.У.000140.04.08), диоксид кремния (E 551) (СГР 78.01.10.009.У.000082.07.06), антиоксидант Grindox 539 (СГР 77.99.57.009.Е.007644.05.12), витамин Е (токоферола ацетат) (СГР 77.99.26.9.У.9964.8.05), рыбий жир (ДС РОСС NO.АЯ67.Д.03800), липоевая кислота (ФС 42-1918-94).

Применяли общедоступные и специальные методы исследования качества и безопасности согласно требованиям нормативного документа [7]. Ниже приводятся модифицированные методы определения ключевых рецептурных ингредиентов – информативных показателей качества и функциональной направленности БАД с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Необходимость модификации связана с подбором условий для проведения хроматографического анализа: соотношения растворов в подвижной фазе, длины и диаметра хроматографической колонки, размера предколонки и рабочего детектора, количества испытуемой пробы.

Определение дигидрокверцитина. Готовят испытуемый раствор. Точную навеску анализируемого БАД (количество эквивалентное 0,5 мг ДГК) переносят в круглодонную колбу на 100 см³ и добавляют 10 см³ гексана, перемешивают и доливают 20 см³ этанола, 80 об. %, тщательно перемешивают. Колбу с обратным холодильником помещают в водяную баню на 60 минут (температура 90 °С). После охлаждения раствор переносят в делительную воронку и сливают нижний слой жидкости в стакан, остальную часть сливают. Приготовленный раствор пропускает через фильтр с маркировкой «синяя лента».

Раствор стандартного образца дигидрокверцетина. Берут точную навеску – 50 мг стандартизированного образца ДГК, высушенного до постоянной массы при 105 °С, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в этаноле 96 % и доводят этанолом до метки. Раствор разбавляют в 50 раз подвижной фазой и фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Приготовление подвижной фазы . Раствор А – трифторуксусная кислота, 0,1 %, раствор В – ацетонитрил. В качестве подвижной фазы используют смесь растворов А и Б (1:1), осуществляют дегазирование и фильтрацию с фильтром 0,45 мкм.

Хроматографические условия . В качестве аппаратуры используется любая технологическая линия ВЭЖХ. Длина колонки составляет 150 мм, диаметр внутренний – 4,6 мм, рекомендуемая стационарная фаза Atlantis C 18 – 5 мкм, размер предколонки – 4,6 х 20 мм, фаза стационарная Symmetry C 18 – 5 мкм, количество испытуемой пробы – 10 мкл, рабочий детектор (УФ) – 288 нм. Запись хроматограммы в течение 16 мин.

Анализ и расчет . Система проверяется на пригодность к работе, после чего в колонку вводятся, попеременно, одинаковые объёмы испытуемого и стандартного растворов (по 10 мкл). Производится запись хроматограммы. Осуществляют идентификацию и измерение площадей пиков ДГК. Измерение сигнала ДГК при 288 нм. Расчет содержания ДГК в мг/кап. (X) осуществляют по формуле:

So - C cm ⋅ Vо ⋅ K ⋅ m Х =

S cm ⋅ Mo

,

где S o – испытуемый образец (площадь пика); S ст – стандарт (площадь пика); С ст – раствор стандарта (концентрация) мг/см³; V o – раствор образца (объем), см³; K – разбавление (коэффициент); m – содержимое капсулы (масса), г; Мо – навеска образца (масса), г.

Определение содержания липоевой кислоты. Готовят испытуемый раствор. Берут навеску БАД в количестве, эквивалентном 1 мг липоевой кислоты, помещают в мерную колбу объёмом 50 см3, добавляют диэтиловый эфир в количестве 10 см3 и проводят обработку ультразвуком в течение 10 мин. Добавляют в колбу этиловый спирт, помещают в ультразвуковую баню при комнатной температуре для обработки на 30 минут. Содержимое до- водят до метки спиртом, перемешивают и фильтруют с использованием фильтра «синяя лента».

Стандартный раствор. Навеску стандартного образца липоевой кислоты в количе- стве 50 мл помещают в колбу объёмом 100 см3 и доводят до метки для растворения этиловым спиртом. Разбавляют этиловым спиртом (в 10 раз), фильтруют с использованием фильтра (0,45 мкм). Используют стандартный раствор с концентрацией 0,05 мг/ см3.

Подвижная фаза и хроматографические условия, аналогичные методу определения дигидрокверцитина. Подача элюента осуществляется со скоростью 1,0 см³/мин, объем пробы составляет 20 мкл. Используется ультрафиолетовый детектор с длиной волны 210 нм. Запись хроматограммы в течение 7 мин.

Содержание липоевой кислоты рассчитывают по формуле, аналогичной формуле расчета дигидрокверцитина.

Определение фосфолипидов. Выполнение измерений . Определяют вес бумажного фильтра, стеклянной палочки и стакана. Взвешивают с точностью до 0,001 г, пробы в количестве от 1,0 до 2,0 помещают в стакан, добавляют 15 см³ ацетона, подогревают на водяной бане до расплавления образца, исключая испарение ацетона, перемешивают. Помешают стакан на ледяную баню на 5 минут. Добавляют в стакан 40 см³ ацетона, заранее охлажденного до 0 °С и тщательно перемешивают с помощью стеклянной палочки, оставляют на 15 минут в ледяной бане. Фильтруют раствор ацетона в колбу через бумажный фильтр. Перемешивание повторяют минимум 5 раз, используя каждый раз по 20 см³ охлажденного ацетона. Клееобразная масса в конечном итоге должна превратиться в тонкий порошок. Выпавший осадок переносится на фильтр и промывается охлажденным ацетоном. После этого фильтр, стеклянная палочка и стакан помещаются в сушильный шкаф при 105 ^оС на 30 минут и после охлаждения проводят повторное взвешивание.

Расчет (мг/10 г):

( А - В ) ⋅ 10 ⋅ 1000

Х = , (2) m где Х – ацетоннерастворимые вещества (фосфолипиды); А – вес стакана, стеклянной палочки после использования и фильтра с осадком, г; В – вес чистого стакана, стеклянной палочки, фильтра, г; m- навеска пробы, г.

Результаты и обсуждение

На основании имеющихся данных по биохимической характеристике используемых сырьевых ингредиентов научно обоснован рецептурный состав нового вида специализи- рованного продукта в виде капсулированной формы БАД, включающей, мг в одной капсуле массой 1620: рыбий жир (эйкозапентаено-вая и докозагексаеновая кислоты) – 500; льняное масло (альфа-линоленовая кислота) – 455; липосомы с дигидрокверцетином (дигидрокверцетин фосфолипиды) – 150; липоевая кислота – 9,0; токоферола ацетат (витамин Е) – 3,06; селексен (селен) – 0,043. Вспомогательные вещества: мальтодекстрин – 46,3; диоксид кремния – 36; антиоксидант GRINDOX 539 – 0,6; капсула желатиновая (желатин, глицерин) – 420.

В качестве рецептурных ингредиентов использованы: высококачественный рыбий жир гренландского лосося, полученный методом холодной обработки; льняное масло, стабилизированное от окисления витамином Е, основным действующим началом которого является альфа-линолевая кислота; дигидрокверцетин в липосомальной форме; селен в виде органического соединения – селексена, что обеспечивает их высокую усвояемость и максимальную биодоступность. Антиоксидантный потенциал усилен липоевой кислотой.

Методология создания рецептурной формулы позволила объединить несколько важнейших для здоровья функций биологически активных веществ, которые, в комплексе, обладают системным оздоровляющим и защитным эффектом, обеспечивая резервные силы организма для профилактирования и комплексного лечения распространенных заболеваний.

При разработке продукта использованы инновационные технологические решения, направленные на сохранность и адресную доставку активных веществ к клетке-мишени: применение мягкой желатиновой капсулы препятствует воздействию кислорода, влаги и, как следствие, окислительным и гидролитическим процессам; исключение высоких температур при капсулировании; включение в масляную субстанцию дигидрокверцитина – ли-посомированной суспензии биофлавоноида-антиоксиданта совместно с селеном, субстанция содержит Омега-3, другие ПНЖК.

Известно, что рецептурный состав специализированных продуктов, в частности фармакологические и биохимические характеристики ингредиентов, характеризуют направленность их функциональных свойств, а технологические особенности производства

(регулируемые параметры) формируют качественные характеристики.

Проведены исследования продукта в процессе хранения при 25 °С на протяжении 27 месяцев в сухом защищенном от света месте. Показатели безопасности по истечению указанного срока хранения представлены в табл. 1 и свидетельствуют о санитарно-гигиеническом благополучие разработанной БАД.

Определены сроки реализации 2 года при вышеуказанных условиях с запасом прочности 3 месяца.

Установлены регламентируемые показатели качества (табл. 2), в том числе пищевой ценности (табл. 3).

Можно заключить, что функциональная направленность БАД реализуется через следующие метаболические функции:

– ПНЖК семейства омега-3 и омега-6 льняного масла и рыбьего жира блокируют воспалительные процессы, активизируют иммунную системы, стимулируют тонус кровеносных сосудов, профилактируют атеросклероз путем регуляции уровня холестерина;

– совместное действие токоферола и ПНЖК обеспечивает нормализацию артериального давления, процессов тромбообразо-вания и свертывания крови. Витамин Е выполняет также индивидуальную функцию, предотвращая окисления ПНЖК;

– липосомированная форма дигидрокверцетина повышает противовоспалительный эффект ПНЖК, реалогические и эластические свойства сосудистой стенки за счет снижения ее проницаемости и ломкости, что положительно сказывается на кровоснабжении, пита-

Таблица 1

Санитарно-токсикологические показатели безопасности БАД

Показатели		Допустимый уровень, мг/кг, не более	Фактическое содержание
Токсичные элементы	Свинец	1,0	0,46–0,48 (0,47)
	Мышьяк	1,0	0,10–0,12 (0,11)
	Кадмий	0,2	0,05–0,07 (0,06)
	Ртуть	0,3	0,01–0,03 (0,02)
	Железо	5,0	2,0–2,2 (2,1)
	Медь	0,4	0,099–0,12 (0,1)
Пестициды	ГХЦГ (сумма изомеров)	0,1	Менее 0,003
	ДДТ и его метаболиты	0,2	Менее 0,007
Микотоксины	Афлатоксин В1	0,005	Менее 0,002
Радионуклиды	Цезий-137	40	1,22–1,24 (1,23)
	Стронций-90	80	Менее 25,0
Перекисное число, ммоль активного O2/кг		10	3,9–4,1 (4,0)
Кислотное число, мг КОН/г		4,0*	2,4 –2,6 (2,5)

* Контроль определяется по сырью – рыбьему жиру и льняному маслу.

Таблица 2

Органолептические и физико-химические показатели БАД

Показатели	Характеристика
Внешний вид	Капсулы желатиновые
Цвет содержимого капсулы	От светло-коричневого до желтого, с возможным выпадением осадка
Вкус и запах содержимого капсулы	Специфический, прогорклость отсутствует
Средняя масса капсул, г	1620 (1458–1782)

нии тканей и органов. Антиоксидантная активность указанной формы дигидрокверцетина блокирует свободные радикалы и перекисное окисление липидов, профилактирует аллергические реакции;

– группировки серы, содержащиеся в ли-поевой кислоте, связывают тяжелые металлы, осуществляя, тем самым, антитоксическое действие и активацию клеточного дыхания.

Таблица 3

Показатели пищевой ценности БАД

Показатели, мг в 1 капсуле	Содержание
ПНЖК Омега-3	349–351 (350)
Дигидрокверцетин	7,4–7,6 (7,5)
Фосфолипиды	47–49 (48)
Селен, мкг	9–11 (10)
Липоевая кислота	8,9–9,1 (9,0)
Витамин Е	2,9–3,1 (3,0)

Использование инновационной технологии липосомирования обеспечивает одновременную доставку в организм биологически активных компонентов рецептуры, которые имеют различные растворимости, свойства проникновения и всасывания при наличии общей точки приложения функционального эффекта. При этом обеспечивается возможность синхронного действия с реализацией тройной защиты сосудов и миокарда от атеросклероза.

Преимущество мягкой желатиновой капсулы перед твердой заключается в гарантированном дозировании ингредиентов, герметичности и увеличении срока хранения.

Нутриетивно-метаболическая поддержка организма с использованием разработанной формулы БАД подтверждена результатами клинических испытаний.

Разработана и утверждена техническая документация. Рецептура и регулируемые технологические параметры апробированы в условиях производства НПО «Арт Лайф», на предприятиях, сертифицированных по требованиям международных правил GMP и стандартов серии ИСО 9001, 22000, что гарантирует стабильность качественных характеристик и конкурентоспособность.