Использование экспресс-теста Bovine TB для проведения скрининговых исследований на туберкулез крупного рогатого скота

Несмотря на успехи, достигнутые в борьбе с туберкулезом человека и животных, эта инфекция остается одной из ведущих, наиболее сложных и экономически значимых в инфекционной патологи. В начале ХХI века эпидемическая и эпизоотическая ситуация по туберкулезу в России, в целом остается напряженной.

Не умаляя значения общепризнанных положительных качеств аллергической диагностики туберкулеза, многие исследователи указывают на непостоянство и другие недостатки этого метода и отмечают необходимость его дальнейшего совершенствования [1, 2]. Одним из существенных недостатков аллергической диагностики туберкулеза является появление у здоровых животных неспецифических реакций на туберкулин, обусловленных причинами самого разнообразного характера.

Исходя из вышеизложенного, целью нашей работы было изучение специфичности и чувствительности теста Rapid Bovine TB Ab для экспресс-диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.

Для достижения цели, были поставлены следующие задачи:

• 1.    Провести сравнительную оценку результатов аллергической диагностической пробы и серологического экспресс-теста в хозяйствах РТ.

• 2.    Провести скрининговые исследования на туберкулез крупного рогатого скота используя экспресс-тест в мелких фермерских хозяйствах республики Ганна.

Материал и методы. Исследования проводились в ранее неблагополучных по туберкулезу хозяйствах: ООО «Красный Восток-Агро» отделения Каргополь, Алексеевского района РТ и в КФХ «Зубов В.С.» Новошешминского района РТ. В республике Гана исследования проводились в 7 мелких фермерских хозяйствах мясного направления, в которых поголовье не превышает 50 голов, а эпизоотическое состояние их по туберкулезу не известно.

В Республике Гана для серологических исследований использовали экспресс-тест системы Bovine TB Ab Test Kit для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота выпускаемой фирмой Anigen® Animal Genetics Inc Южной Кореи, а в Республике Татарстан экспресс-тест Rapid Bovine TB Ab фирмы VetExpert.

Иммунохромотография с использованием прямого «сэндвич» метода основана на выявлении антител (Ig M, Ig G) против M. bovis в сыворотке крови. Образовавшиеся иммунные комплексы выявляются в результате взаимодействия с конъюгатом коллоидного золота, приводящего к высвобождению красителя и появлению окрашенной полоски на мембране тест-кассеты. В качестве детектора использован высокоспецифичный видовой протеин M. bovis MPB 70. По данным производителя чувствительность данного теста составляет 90% по сравнению с бактериологическим методом и 85,1% по отношению к ППД тесту. Специфичность 98,6% в сравнении с ППД тестом.

Кровь отбирали из яремной вены в вакуумные пробирки. Каплю крови от каждого животного добавляли в кассету, в специальное отверстие для образца, используя прилагающуюся пипетку. Через 1 минуту добавляли в специальное отверстие 3 капли буферного раствора и еще через минуту 3 капли «разгоняющего» раствора. Оценка результатов проводилась через 20 минут при комнатной температуре. Результат признавался положительным при появлении на мембране 2-х окрашенных полосок фиолетового цвета под буквами «С» и «Т», при появлении лишь 1-ой полоски под буквой «С» – результат признается отрицательным.

Результаты исследования. В ранее неблагополучных по туберкулезу хозяйствах ООО «Красный Восток-Агро» и КФХ «Зубов В.С.» для исследования была использована кровь от крупного рогатого скота, реагировавшего на туберкулин с утолщением кожной складки на 6, 9, 12 мм и более. Результаты исследования отражены в таблице 1.

Таблица 1 - Результаты исследования крупного рогатого скота на туберкулез с использованием экспресс теста в хозяйствах РТ

В результате проведенных исследований, установлено, что все животные обоих хозяйств реагирующие на туберкулин, дали отрицательный результат при использовании экспресс-теста Rapid Bovine TB Ab. Животных с наиболее выраженной реакцией на туберкулин (9, 12 и 15 мм), подвергли контрольнодиагностическому убою, при котором были получены отрицательные результаты патологоанатомических исследований. Патологический материал, отобранный при убое этих животных, был отправлен в лабораторию для исследования на туберкулез. На основании бактериологических исследований, микобактерий туберкулеза в представленном материале не обнаружено.

Кроме того, скрининговые исследования с использованием экспресс-теста были проведены и в 7 мелких фермерских хозяйствах республики Ганна, в которых исследование скота на туберкулез никогда не проводилось. Результаты исследования крупного рогатого скота на туберкулез с использованием экспресс-теста в республике Ганна отражены в таблице 2.

Таблица 2 - Результаты исследования животных на туберкулез с использованием экспресс-теста в Республики Гана

В результате проведенных исследований, отраженных в таблице 2 видно, что из 229 голов крупного рогатого скота, исследованного экспресс-тестом на туберкулез, положительно реагировали 35 голов, что составило 15, 3% от общего количества исследованного скота. Причем, процент пораженности туберкулезом поголовья в различных районах республики был практически одинаков и варьировал в пределах от 15,6 до 24 %. Лишь в одном из 7 исследованных хозяйств, реагирующих на экспресс-тест животных не обнаружено (Абокоби).

Все реагирующие на экспресс-тест животные были подвергнуты убою на мясо. Вследствие того, что большинство фермерских хозяйств расположены в удаленных районах и у фермеров нет возможности доставлять животных на специальный скотоубойный пункт, патоморфологическое подтверждение полученных результатов экспресс-теста проводилось только у животных из хозяйства Адехизма Центрального региона.

Из 5 голов реагирующих на экспресс-тест животных патологоанатомические подтверждения туберкулеза крупного рогатого скота были получены в 4-х случаях.

При осмотре туш вынужденно убитых животных отмечали специфичные для туберкулёза изменения чаще всего в легких и регионарных лимфатических узлах. У части коров туберкулезные очаги были инкапсулированы. Однако часть коров была с типичными признаками открытой формы туберкулеза. У этих животных выявляли очаги творожистой массы, не подвергшиеся инкапсуляции.

Выводы. 1. Проведенные исследования позволяют утверждать, что экспресс-тест Rapid Bovine TB Ab обладает более выраженной чувствительностью и специфичностью к M. bovis, чем ППД туберкулин для млекопитающих и при детальном исследовании может быть использован для дифференциальной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в благополучных по данному заболеванию хозяйствах. 2. Использование экспресс-теста впервые позволило изучить эпизоотическое состояние по туберкулезу крупного рогатого скота в 7 хозяйствах 3-х регионов республики Гана. 3. Экспресс-тест позволяет выявлять животных, инфицированных M. bovis с меньшими трудозатратами, в течении короткого времени (оценка результатов реакции в течении 20 минут) и достаточной для скрининговых исследований надежностью.

Целью данной работы, было изучение специфичности и чувствительности теста Rapid Bovine TB Ab для экспресс-диагностики туберкулеза крупного рогатого скота. Установлено, что экспресс-тест обладает более выраженной чувствительностью и специфичностью к M. bovis, чем ППД туберкулин для млекопитающих и при детальном исследовании может быть использован для дифференциальной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в благополучных по данному заболеванию хозяйствах.