Изменения в клеточном звене иммунитета у пациентов с заболеваниями системы крови, перенесших COVID-19

Вирус SARS-CoV-2, вызывающий COVID-19, связывается с клеткой через рецепторы хозяина ACE-2 и TMPRSS2 и реплицируется внутри клетки [1]. В ответ на это активируется врожденный иммунный ответ, в основном опосредованный гранулоцитами, антиген-представляющими клетками и провоспалительными макрофагами. Эта система координируется и поддерживается адаптивным иммунным ответом, пред-

COVID-19, when compared with the control group, reveal significant changes in the adaptive and innate links of the immune system. A decrease in the absolute values of total T-lymphocytes (p=0.0001) and T-cytotoxic lymphocytes (p=0.003) was found. In the main group, statistically significant decreases in the absolute values of total B lymphocytes (p=0.0001), as well as all studied subpopulations of B lymphocytes were revealed: B1 lymphocytes (p=0.004), B2 lymphocytes (p=0.002), memory B cells (p=0.001). The innate link of the immune system (NK and T-NK lymphocytes) in hematological patients turned out to be less altered after COVID-19, there was a decrease in the absolute values of only NK lymphocytes (p=0.003).

ставленным Т-лимфоцитами хелперами CD3+CD4+, Т-цитотоксическими лимфоцитами CD3+CD8+, T-регуляторными лимфоцитами и В-лимфоцитами [2, 3]. Активация и пролиферация CD3+CD4+ стимулирует CD3+CD8+, которые индуцируют гибель клеток, пораженных вирусом [4]. В-лимфоциты секретируют антитела для нейтрализации вируса или индуцируют лизис инфицированных клеток путем активации комплемент-антителозависимой клеточ- ной цитотоксичности, опосредованной натуральными киллерами (NK) [5]. Пациенты с заболеваниями системы крови на фоне COVID-19 по сравнению с пациентами с COVID-19 без гематологической патологии имеют значительное снижение процента NK-клеток, Т-клеток и В-клеток [6, 7]. Bilich и соавторы продемонстрировали нарушение ранее существовавших и вновь образовавшихся ответов Т-лимфоцитов хелперов CD3+CD4+ на SARS-CoV-2 у пациентов с гематологическими заболеваниями и отметили признаки истощения Т-лимфоцитов [8]. Пациенты с лимфопролиферативными заболеваниями, получающие терапию моноклональными антителами к CD20, к CD38, в основе действия, которых лежит стратегия истощения В-клеток, имеют длительное снижение В-клеток памяти [9, 10, 11]. У данной группы пациентов выработка антител к антигенам, остается сниженной даже через 6-10 месяцев после лечения [12].

Таким образом, пациенты с заболеваниями системы крови имеют значительные нарушения в клеточном звене иммунитета. Однако остается не до конца ясным вопрос о влиянии вируса SARS-CoV-2 на состояние клеточного звена иммунной системы у данной категории больных.

Цель. Исследовать особенности функционирования клеточного звена иммунной системы у гематологических пациентов, перенесших COVID-19.

Материалы и методы

С января по декабрь 2021 г. в гематологическом центре ФГБУ «ГВКГ им. Н.Н. Бурденко» (далее – госпиталь) проведено исследование крови для оценки состояния клеточного звена иммунной системы после перенесенной НКИ. Основная группа состояла из 76 пациентов с гематологической патологией, перенесших COVID-19 в течение 1-6 месяцев до исследования, в возрасте от 19 до 98 лет, медиана возраста 54,73 года, из них мужчин было 63 (83%), женщин – 13 (17%). Из 76 пациентов у 39 (51%) диагностировались лимфомы, у 14 (18%) – множественная миелома, у 12 (16%) – острые лейкозы и у 11 (15%) – миелодиспластический синдром, хронические миелопролиферативные заболевания.

Контрольная группа включала 17 практически здоровых доноров, перенесших COVID-19 в течение 1-6 месяцев до исследования. Всем испытуемым были исследованы параметры клеточного звена иммунной системы (Т-, В-, NK- и TNK-лимфоциты).

Статистический расчет выполнен на персональном компьютере с использованием приложения Microsoft Excel и пакета статистического анализа данных Statistica 10 for Windows (StatSoftInc., USA).

Результаты

Была выполнена оценка состояния клеточного звена иммунной системы у гематологических пациентов после перенесенной инфекции COVID-19, выполнено сравнение с результатами в контрольной группе.

При оценке Т-клеточного звена адаптивной иммунной системы (рисунок 1) в группе гематологических больных Т-лимфоциты общие (CD3+) снижены: 1,047 (0,696-1,496) х109/л против 2,25 (1,83-2,47) х109/л в контрольной группе (р=0,00001), хотя в относительных цифрах в основной группе отмечается повышение CD3+ – 80 (72-88) % против 74 (71,8-78) % в группе контроля, что также статистически достоверно (р=0,014). Отмечено значительное снижение как абсолютных значений Т-хелперов (CD3+CD4+) в основной группе – 0,531 (0,338-0,769) х109/л против 1,39 (0,93-1,53) х109/л (р>0,0001), так и относительных значений – 39 (25-49) % против 45 (43,9-49,3) % (р >0,05). Абсолютные показатели Т-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+) в основной группе по сравнению с контрольной снижены – 0,422 (0,292-0,630) х109/л и 0,65 (0,58-0,76) х109/л (р=0,003), тогда как относительные значения выше в основной группе – 35 (25-46) % и 24,2 (20,4-27,4) %, что также статистически достоверно (р=0,002). Таким образом, установлена статистически досто-

■ CD3+            ■ CD3+ контроль     ■ CO3+CD4+

□ CD3+CD4+, контроль ■ CD3+CD8+         ■ CD3+CD8+, контроль

Рисунок 1. Сравнительный анализ Т-клеточного звена адаптивной иммунной системы в основной и контрольной группах, M (Q25-Q75)

верная разница в Т-клеточном звене иммунной системы у гематологических пациентов, перенесших COVID-19).

Снижение Т-хелперов и повышение Т-цитотоксических лимфоцитов свидетельствует и снижении функции иммунной системы у данной когорты пациентов.

При оценке В-клеточного звена адаптивной иммунной системы (рисунок 2) в группе гематологических больных установлено статистически значимое снижение всех типов В-лимфоцитов в основной группе по сравнению с контрольной. Абсолютные значения В-лимфоцитов общих (CD19+) значительно снижены – 0,032 (0,003-0,151) х109/л против 0,22 (0,17-0,33) х109/л в контрольной группе (р=0,0001), что подтверждается относительными значениями – 3,0 (0,3-9,0) % и 8,9 (6,7-11,2) % (р=0,002). В-клетки памяти (CD19+CD5-CD27+) в основной группе снижены в абсолютных цифрах – 0,003 (0,00-0,016) х109/л против 0,057 (0,018-0,035) х109/л (р=0,001) и относительных цифрах – 0,26 (0,00-1,1) % против 3,1 (1,95,3) % (р=0,004). В1-лимфоциты (CD19+CD5+CD27+) в основной группе снижены как в абсолютных циф- рах – 0,004 (0,00-0,015) х109/л, так и в относительных – 0,21 (0,06-1,0) %, в контрольной группе эти показатели составили 0,062 (0,038-0,101) х109/л и 0,9 (0,71,7) % (р=0,004, р=0,01). В2-лимфоциты (CD19+CD5-CD27-) также снижены – 0,02 (0,002-0,019) х109/л и 1,4 (0,08-6,4) % против 0,179 (0,089-0,318) х109/л и 8,5 (5,6-13,7) % (р=0,002, р=0,0001).

При анализе состояния врожденного звена иммунной системы (рисунок 3) установлено повышение NK-лимфоцитов (CD3-CD16+56+) в основной группе в абсолютных цифрах – 0,28 (0,15-0,27) х109/л против 0,151 (0,069-0,23) х109/л в контрольной группе (р=0,003), статистически значимых отличий при сравнении относительных значений не выявлено (p >0,05). Отмечено, что T-NK-лимфоциты (CD3+CD16+56+) не имеют статистически значимой разницы при оценке абсолютных показателей – 0,047 (0,02-0,085) х109/л в основной группе и 0,04 (0,02-0,07) в контрольной группе (p>0,05), однако значительно повышены относительные показатели – 3,3 (2,2-5,2) % против 1,3 (1-3,3) %, что было статистически значимо (р=0,002).

■ CD19+, контроль          ■ CD19+                   ■ CD19+CD5-CD27+, контроль

□ CD19+CD5-CD27+         ■                      ■ CD19+CD5+CD27+

■ CD19+CD5-CD27-, контроль ■ CD19+CD5-CD27-

Рисунок 2 . Сравнительный анализ В-клеточного звена адаптивной иммунной системы в основной и контрольной группах, M (Q25-Q75)

■ CD3-CD16+56+           ■ CD3-CD16+56+, контроль

■ CD3+/CD16+56+         □ CD3+/CD16+56+, контроль

Рисунок 3 . Сравнительный анализ врожденного звена клеточного звена иммунной системы в основной и контрольной группах, M (Q25-Q75).

Обсуждение

Таким образом, выполненный анализ показывает, что пациенты с заболеваниями системы крови после перенесенной COVID-19 инфекции имеют значительные изменения в клеточном звене иммунной системы по сравнению с контрольной группой. Отмечено значимое снижение абсолютных показателей Т-лимфоцитов общих (р=0,0001), Т-хелперов (р>0,0001), Т-цитотоксических лимфоцитов (р=0,003) в основной группе по сравнению с контрольной, что говорит о выраженном иммунодефиците в Т-клеточном звене иммунной системы и согласуется с опубликованными данными [13]. Обращает внимание значительное повышение относительных показателей Т-цитотоксических лимфоцитов (р=0,002) у пациентов с заболеваниями крови. Установлено, что в большей степени страдает В-клеточное звено иммунной системы, выявлено статистически достоверное снижение абсолютных значений В-лимфоцитов общих (р=0,0001), а также всех исследованных субпопуляций В-лимфоцитов: В1-лимфоцитов (р=0,004), В2-лимфоцитов (р=0,002), В-клеток памяти (р=0,001), что подтверждает выраженные нарушения В-клеточного звена иммунной системы у гематологических больных на фоне инфекции COVID-19. Bange E.M. и соавторы также указывают на нарушение В-клеточного ответа и отмечали повышение Т-цитотоксических лимфоцитов CD3+CD8+, которое коррелировало с улучшением выживаемости, включая пациентов, получавших анти-CD20 антитела [14]. Врожденное звено иммунной системы (NK- и T-NK-лимфоциты) оказалось в меньшей степени изменено после COVID-19, отмечено снижение абсолютных показателей NK-лимфоцитов (р=0,003), что согласуется с опубликованными данными [6, 7]. Показатели T-NK-лимфоцитов в нашем исследование значимо не были изменены.

Заключение

У пациентов с заболеваниями системы крови в большей степени страдает В-клеточное звено иммунной системы, где выявлены статистически значимое снижение всех групп клеток. Выявлены изменения в Т-клеточном звене: снижение Т-хелперов и повышение Т-цитотоксических лимфоцитов, свидетельствует о снижении функции иммунной системы. Всё это требует дальнейшего изучения и оценки состояния клеточного звена иммунной системы у пациентов с различными гематологическими заболеваниями.