Изучение хронической токсичности нового миорелаксанта на кроликах

Автор: Ямалова Г.Р., Мишина Н.Н., Халикова К.Ф., Маланьев А.В., Асланов Р.М., Нигматулин Г.Н., Алеев Д.В.

Журнал: Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана @uchenye-zapiski-ksavm

Статья в выпуске: 1 т.261, 2025 года.

Бесплатный доступ

Использование миорелаксантов в ветеринарии приобретает большое значение при обездвиживании диких и домашних животных. Иммобилизация животных фармакологическими средствами основана на потере ими двигательной активности на определенной промежуток времени, что позволяет безопасно работать и фиксировать животных при оказании им какой-либо помощи, в том числе и лечебной. Обязательным условием применения новых веществ является проведение доклинических исследований. Целью исследования являлось изучение хронической токсичности нового миорелаксанта на кроликах. Исследование хронической токсичности проводилось в соответствии с руководством по проведению доклинических исследований. По внешнему виду препарат представляет собой мелкокристаллический порошок белого цвета, в качестве растворителя использовали воду для инъекций. Оценку токсичности проводили на 18 кроликах, разделенных по 6 голов в каждой. Первая - контрольная группа, которой вводили воду для инъекций-буфус, второй группе вводили 1/10 LD50, третья - получала полуторакратную дозу от 1/10 LD50. Результаты проведенных исследований свидетельствуют, что многократное внутримышечное введение миорелаксанта не оказывает отрицательного воздействия на общее состояние животных, прирост массы тела, гематологические и биохимические показатели крови кроликов.

Еще

Доклинические исследования, хроническая токсичность, препарат, кролики, миорелаксанты

Короткий адрес: https://sciup.org/142244565

IDR: 142244565 | DOI: 10.31588/2413_4201_1883_1_261_296

Текст научной статьи Изучение хронической токсичности нового миорелаксанта на кроликах

Перед ветеринарной медициной остро стоит вопрос гуманного обращения с животными при выполнении различных манипуляций и исследований. Иммобилизация, транспортирование, проведение ветеринарных процедур различной сложности – это далеко не полный перечень действий, вызывающих стресс как для животных, так и для работников, работающих в этой сфере [1, 5]. Применение миорелаксирующих препаратов представляет собой более безопасную альтернативу при ловле диких животных, позволяя ловить особо осторожных животных, обездвиживая их на расстоянии, а также сводя к минимуму риск нападения их на работников, участвующих в отлове [2, 6].

В связи с этим возникает острая необходимость в разработке эффективных и доступных отечественных препаратов, обладающих седативным и миореласирующими свойствами. В лаборатории сильнодействующих ядовитых веществ и химического синтеза отделения токсикологии ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» в ходе синтеза получен новый препарат, обладающий миорелаксирующими свойствами. Обязательным условием применения новых веществ является проведение доклинических исследований. Одним из необходимых этапов доклинических исследований является изучение хронической токсичности, направленное на выявление возможного токсического действия препарата при длительном его поступлении [3]. Согласно вышесказанному, целью данного исследования являлось изучение хронической токсичности нового миорелаксанта на кроликах.

Материал и методы исследований. Изучение хронической токсичности нового миорелаксанта проводилось в соответствии с руководством по проведению доклинических исследований [4]. По внешнему виду препарат представляет собой мелкокристаллический порошок белого цвета, легкорастворимый в воде. В качестве растворителя использовали воду для инъекций.

Эксперименты проводились на 18 кроликах породы «Шиншилла», возрастом 2,5-3 месяцев, массой от 2200 до 2400 г. Перед исследованием животные проходили адаптацию в течение 14 дней. Во время экспериментов изучалось клиническое состояние животных, потребление корма и воды, изменение массы и температуры тела, регистрировали патологоанатомическую картину.

Оценку хронической токсичности проводили на трех группах кроликов по 6 особей в каждой. Первая - контрольная группа, животным которой вводили воду для инъекций-буфус (1,0 мл/кг живой массы); животным второй группы вводили - 1/10 LD50, миорелаксанта (0,26 мг/кг); третья - полуторакратную дозу миорелаксанта от 1/10 LD50 - 0,38 мг/кг. Общая продолжительность эксперимента составила 28 суток - на протяжении 14 дней внутримышечно вводился исследуемый препарат, последующие 14 дней вели наблюдение за общим состоянием животных, регистрируя, внешний вид животных, наличие или отсутствие клинических признаков, изменение массы тела и температуры.

Для определения морфологических показателей крови использовали автоматический гематологический анализатор «Mythic 18 vet» (Франция).

Определение биохимических показателей производили на биохимическом анализаторе АРД-200 с использованием специальных наборов реагентов Chronolab .

Обработку цифрового материала проводили методом вариационной статистики с применением критерия достоверности по Стьюденту на персональном компьютере с использованием программ Excel.

Результат исследований.

Результаты исследований показали, что в ходе эксперимента не было обнаружено значительных изменений в массе тела кроликов по сравнению с контрольной группой (Таблица 1).

Таблица 1 – Влияние длительного внутримышечного введения миорелаксанта на динамику массы тела кроликов, г (M±m)

Группа	Срок исследования
Группа	Фон	7 день	14 день	28 день
1	2,310±0,243	2,557±0,151	2,704±0,289	2,998±0,267
2	2,347±0,208	2,560±0,134	2,703±0,284	2,989±0,245
3	2,376±0,211	2,566±0,138	2,706±0,276	2,992±0,229

Исследование температуры тела в начале эксперимента показало, что у всех кроликов контрольной и опытных групп, которым вводили миорелаксант в дозах 0,26 и 0,38 мг/кг, изучаемый показатель

Таблица 2 – Влияние длительного внутримышечного введения миорелаксанта на ректальную температуру кроликов, °С (M±m)

Группа	Срок исследования
Группа	Фон	7 день	14 день	28 день
1 группа (контроль)	38,62±0,03	38,63±0,04	38,61±0,05	38,64±0,05
2 группа	38,91±0,07	38,82±0,04	38,87±0,05	38,94±0,07
3 группа	38,71±0,06	38,63±0,04	38,74±0,07	38,71±0,04

Клинические признаки в

исследуемых дозах не проявлялись.

Гематологические показатели кроликов в ходе эксперимента представлены в таблице 3.

Изучение гематологических находился в пределах нормы. В течение всего периода исследования показатель температуры тела не претерпевал значительных отличий от контрольных животных (Таблица 2).

показателей имеет важное значение при оценке безопасности нового синтезированного препарата на организм животных. Эритроциты являются элементами крови, участвующими в нейтрализации вредных веществ.

Лейкоциты играют важную роль в иммунной системе организма. В нашем эксперименте гематологические показатели крови животных контрольной и опытных групп при многократном поступлении препарата не претерпевали значительных изменений. Количество лейкоцитов, эритроцитов, лимфоцитов, моноцитов, тромбоцитов, гемоглобина и показатель гематокрита находились в пределах референсных значений для данного вида животных. Данные результаты свидетельствуют о том, что миорелаксант не оказывает токсического воздействия на гематологические показатели крови кроликов.

Таблица 3 – Влияние длительного внутримышечного введения миорелаксанта на гематологические показатели кроликов, (M±m)

Показатель	Срок исследования, сут
Показатель	7 день	14 день	28 день
1 группа, контрольная группа
Лейкоциты, х 10⁹/л	8,71±0,12	8,63±0,08	8,72±0,05
Лимфоциты, %	70,43±0,61	69,37±1,41	71,22±1,51
Моноциты, %	5,43±0,22	5,31±0,34	5,17±0,71
Гранулоциты, %	24,14±1,15	25,32±1,40	23,61±1,71
Эритроциты, х 10¹² /л	5,83±0,22	5,72±0,28	6,03±0,19
Гематокрит, %	37,84±1,39	39,36±1,01	38,73±0,52
Гемоглобин, г/л	124,21±0,54	123,92±0,92	124,81±0,65
Среднее содержание гемоглобина в эритроците, пг	15,73±1,00	16,64±0,67	16,17±0,51
Тромбоциты, х10⁹/л	342,52±35,01	377,81±29,78	353,33±25,00
2 группа, миорелаксант 0,26 мг/кг
Лейкоциты, х 10⁹/л	8,19±0,13	7,97±0,35	8,25±0,18
Лимфоциты, %	67,68±0,51	65,94±2,13	68,26±1,25
Моноциты, %	6,17±0,17	5,91±0,43	6,36±0,22
Гранулоциты, %	26,15±1,90	28,15±2,22	25,38±2,73
Эритроциты, х 10¹² /л	5,63±0,04	5,58±0,06	5,61±0,02
Гематокрит, %	35,63±0,31	35,91±0,38	35,45±0,44
Гемоглобин, г/л	124,48±0,17	124,18±0,53	124,63±0,41
Среднее содержание гемоглобина в эритроците, пг	15,15±0,75	15,91±0,03	15,82±0,08
Тромбоциты, х10⁹/л	332,54±25,01	357,81±18,99	343,63±13,8
3 группа, миорелаксант 0,38 мг/кг
Лейкоциты, х 10⁹/л	8,45±0,16	8,17±0,44	8,63±0,38
Лимфоциты, %	64,12±0,81	63,37±1,42	64,37±0,50
Моноциты, %	6,18±0,19	5,91±0,27	5,82±0,27
Гранулоциты, %	29,70±1,66	30,72±1,15	29,81±0,85
Эритроциты, х 10¹² /л	5,74±0,194	5,64±0,096	5,71±0,024
Гематокрит, %	36,63±1,84	38,58±1,56	37,12±1,36
Гемоглобин, г/л	124,83±0,39	124,15±0,66	124,63±0,23
Среднее содержание гемоглобина в эритроците, пг	15,65±1,00	16,53±1,09	15,27±1,22
Тромбоциты, х10⁹/л	326,82±23,01	349,74±18,63	333,36±16,23

Биохимические исследования так же играют важную роль при разработке новых эффективных лекарственных препаратов, с целью выявления возможного токсического действия препарата на организм животных. Данные биохимических исследований сыворотки крови кроликов представлены в таблице 4.

Таблица 4 – Влияние длительного внутримышечного миорелаксанта на биохимические показатели сыворотки крови кроликов, (M±m)

Показатель	Срок исследования
Показатель	7 день	14 день	28 день
1 группа Контрольная группа
Общий белок, г/л	63,45±0,64	63,71±0,49	64,17±0,70
Глюкоза, ммоль/л	3,31±0,18	3,20±0,29	3,55±0,15
АЛТ, Ед/л	50,38±8,20	58,71±3,21	55,42±2,70
АСТ, Ед/л	22,45±0,90	23,78±1,24	23,51±0,17
Щелочная фосфатаза, Е/л	49,20±0,52	48,81±0,23	48,55±0,41
Холестерин общий, ммоль/л	2,60±0,24	2,79±0,17	2,63±0,24
2 группа миорелаксант 0,26 мг/кг
Общий белок, г/л	62,54±5,10	66,83±2,27	64,32±3,33
Глюкоза, ммоль/л	3,20±0,68	3,35±0,54	3,93±0,63
АЛТ, Ед/л	50,35±8,00	58,72±2,99	55,46±3,01
АСТ, Ед/л	20,77±3,38	26,28±5,23	22,45±4,00
Щелочная фосфатаза, Е/л	46,27±3,22	49,53±1,98	47,31±2,12
Холестерин общий, ммоль/л	2,59±0,26	2,80±0,16	2,65±0,29
3 группа миорелаксант 0,38 мг/кг
Общий белок, г/л	64,73±2,28	67,15±1,54	66,20±0,79
Глюкоза, ммоль/л	3,84±0,88	4,73±0,89	3,45±1,24
АЛТ, Ед/л	53,60±5,43	59,15±3,60	57,30±1,77
АСТ, Ед/л	24,51±4,22	28,90±3,01	26,81±1,96
Щелочная фосфатаза, Е/л	48,93±2,57	51,65±1,89	50,25±1,29
Холестерин общий, ммоль/л	2,73±0,33	3,15±0,24	2,94±0,18

На состояние обмена веществ указывают такие показатели, как белок и глюкоза. От этих показателей зависит рост и развитие организма. Данные таблицы 4 показывают, что количество данных показателей находятся в пределах референсных значений. Уровни аспартатаминотрансферазы (АСТ), аланинаминотрансферазы (АЛТ) и щелочной фосфатазы (ЩФ) являются важными показателями, указывающими на состояние печени. Биотрансформация лекарственных веществ, происходит именно в печени. В нашем эксперименте активность изучаемых ферментов была незначительной, уровень показателей соответствовал норме для данного вида животных. Содержание холестерина в крови аналогично ферментам не отличалось от показателей контрольной группы.

Патоморфологические исследования так же не выявили изменений структуры внутренних органов.

Заключение. Многократное внутримышечное введение миорелаксанта в дозах 0,26 и 0,38 мг/кг массы тела не оказало существенного влияния на динамику массы тела и температуру кроликов, также не повлияло на гематологические и биохимические показатели крови животных. При исследовании макроскопической картины внутренних органов патологических изменений не выявлено. Полученные данные свидетельствуют о том, что миорелаксант не проявляет хронической токсичности при длительном введении кроликам.

Список литературы Изучение хронической токсичности нового миорелаксанта на кроликах

Урядов, В. Г. Блокаторы холинорецепторов. Часть 1. Миорелаксанты. Становление представлений / В. Г. Урядов, М. С. Хакимов, Э. Н. Якупова, И. М. Фицев, Ж. Р. Насыбуллина // Бутлеровские сообщения. - 2022. - Т. 72, № 10. - C. 17- 25. EDN: VXHVSS
Громаков, В. В. Миорелаксанты: проблемы практического использования в ветеринарии / В. В. Громаков, Ю. А. Зимаков, И. Г. Хайрутдинов, В. В. Громаков // Ветеринарный врач. - 2002. - № 1. - С. 23.
Миронов, А. Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств: часть первая / А. Н. Миронов. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.
Мишина, Н. Н. Изучение хронической токсичности кормовой добавки "Комплисорбин" на кроликах / Н. Н. Мишина // Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова. - 2023. - № 4(73). - С. 80-87. EDN: ZNOWMZ
Перфилова, К. В. Определение хронической токсичности профилактическоо средства "Цеапитокс" / К. В. Перфилова, Э. И. Семенов, Л. Е. Матросова [и др.] // Ветеринарный врач. - 2021. №4. - С. 50-57. EDN: OGUGVT
Царёв, С. А. Применение деполяризующих миорелаксантов для временного обездвиживания диких и зоопарковых животных / С. А. Царёв, Ю. А. Зимаков, Ю. В. Ларина, А. В. Малев // Ветеринарный врач. - 2008. - № 5. - С. 4-7. EDN: JSJKRV

Еще

Статья научная