Изучение эмбриотоксического действия неостомозана

Пиретроидные инсектициды широко используются в сельском хозяйстве и бытовой химии во всем мире. В практической ветеринарии в настоящее время в качестве инсектицидов применяют препараты синтетических пиретроидов, обладающие широким спектром инсектицидного действия и низкой токсичностью для животных [1]. Так, например, в опытах на белых крысах и телятах установлено, что комплексный пиретроидный препарат при метаболизме и детоксикации не угнетает антитоксическую функцию печени [2]. Однако постоянное использования данных препаратов вызывает появление в организме животных нейротоксических явлений [6, 14]. Известно, что основными признаками интоксикации являются симптомы нарушений нервной системы, печени, отмечено влияние на оксигеназную систему. В связи с этим у специалистов имеется настороженность по возможному действию пиретроидов на развитие нервной системы в эмбриональный период [3, 5].

Исследования эмбриотоксического и тератогенного действия ветеринарных препаратов проводятся с целью внедрения их в животноводство и ветеринарную медицину и являются актуальным направлением, способствующим установлению безопасности их применения. Токсичность препаратов зависит от многих факторов, в том числе от состояния и содержания животных, половозрастных аспектов, стабильности состава изучаемого вещества, в связи с этим проведение исследований по токсикологии регламентировано определенными правилами [4]. Известно, что в 1961 г. было установлено что лекарственные препараты могут проникать сквозь плаценту и оказывать на плод тератогенное действие, особенно в первые дни беременности. Поэтому использование во время беременности химиопрепаратов является серьезным риском развития врожденных пороков у плода. Так, специальными исследованиями репродуктивной функции лабораторных животных были определены побочные эффекты, обусловленные ранним воздействием препаратов группы пиретроидов на нервное развитие грызунов [10].

Целью настоящей работы было изучение эмбриотоксического действия Неостомозана на лабораторных крысах для обоснования его применения в ветеринарной практике.

Материал и методы исследований. В работе применяли препарат производства Seva Sante Animal (Франция) - Неостомазан концентрат 55 г/л (тетраметрин 50 г/л + циперметрин 5 г/л). Препарат содержит трансмикс и тетраметрин в органическом растворителе, которые действуют как нейротоксины на центральную и периферическую нервную систему эктопаразитов. Препарат рекомендуется использовать животным для борьбы с эктопаразитами, а также для уничтожения мух в животноводческих и подсобных помещениях [9].

Опыт по изучению возможных эмбриотоксических и тератогенных свойств Неостомозана проводили согласно современным методическим указаниям. Для опыта использовали 36 половозрелых беременных самок нелинейных белых крыс, массой тела к началу исследования от 180 до 220 г. Лабораторные грызуны содержались в оптимальных условиях окружающей среды в соответствии с «Руководством по содержанию и использованию лабораторных животных» [3]. Изучение действия препарата проводили в соответствии с «Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств» [8] и согласно «Методическим указаниям по изучению эмбриотоксического действия фармакологических веществ и влияния их на репродуктивную функцию» [7]. Изучение возможного токсического воздействия Неостомозана на эмбрионы крыс в антенатальный период проводили методом купания в Неостомозане 0,1 % концентрации в течение одной минуты. Опытные животные были разделены на 3 группы (n=9), крыс первой группы купали в Неостомозане 0,1 %-ой концентрации с 1-го по 6-й дни беременности, второй группы – в период с 6-го по 16-ый дни беременности и третьей группы – с 16-го по 19-й дни беременности. Животных контрольной группы (n=9) купали в дистиллированной воде. На 20-й день беременности животных после умерщвления подвергали исследованию.

Оценивали состояние матки, плацент и плодов, подсчитывали количество желтых тел беременности, изучали состояние плодов в рогах матки. Зная число живых плодов, желтых тел беременности и мест имплантации расчетным путем вычисляли общую, предимплантационную и постимплантационную смертность зародышей. Эксперименты проводились в соответствии с рекомендациями, установленными Международным комитетом по этике животных и этическим комитетом учреждения, а также в соответствии с действующими нормативными актами. Все исследования, выполнялись согласно Правилам гуманного обращения с лабораторными животными. Все процедуры с животными проводили в соответствии с Директивой 2010/63/US от 22 сентября 2010 г. [12]. Полученные данные исследования были обработаны методом вариационной статистики, значимость различий устанавливали по величине критерия Стьюдента [10].

Результат исследований.

Многократное купание беременных крыс в Неостомозане 0,1 % концентрации с 1-го по 6-й день беременности, с 6-го по 16-й день беременности и с 16-го по 19-й день беременности, судя по полученным данным эксперимента, не вызвало проявления токсического действия у животных. Результаты исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1 – Изучение влияния препарата Неостомозана в 0,1 % концентрации на эмбриональное развитие плодов самок крыс (X ± Sx, n=9)

При вскрытии самок крыс на 20-й день беременности и исследовании эмбрионов, полученных от контрольной группы и опытных групп, которые купались в Неостомозане 0,1 % концентрации, было установлено, что число желтых тел беременности у опытных групп немного меньше (на 2,515,3 %), чем в контрольной группе. Число мест имплантаций в контрольной и третьей группе было на одном уровне (10,3±0,99 и 10,3±0,79), а в первой и второй группах ниже (на 4,9 и 17,5 %). Количество рассасываний в первой опытной группе оказалось меньше на 3,0 %, второй – на 48,5 %, третьей – на 36,4 %, чем в контроле. Количество живых плодов в первой опытной группе было меньше на 5,0 %, во второй группе – на 16,7 %, чем в контроле, а в третьей группе живых плодов было даже на 3,3 % больше. Однако статистическая обработка данных показала, что у опытных животных не имелось достоверных отличий от контрольных животных по таким показателям как количество желтых тел беременности в яичнике, число мест имплантации и резорбции в матке, количество живых и мертвых плодов. Такие значимые показатели как общая эмбриональная, предимплантационная и постимплантационная смертность, в опытных группах также не отличались существенно (Р>0,05) от значений контрольной группы. При изучении длины и массы эмбрионов задержки роста и развития плодов в опытных группах не обнаружено. При осмотре плодов значительных видимых дефектов развития (уродств) не отмечено, макроскопических изменений не выявлено.

При изучении влияния Неостомозана на развитие плодов в антенатальный период видимых аномалий развития внутренних органов не обнаружено. Также при осмотре костной системы плодов от самок, подвергнутых обработке препаратом в различные периоды беременности, не было выявлено аномалий развития скелета, что указывает об отсутствии нарушений процесса формирования костной ткани. Сравнительная оценка числа костей во всех отделах скелета плодов подопытных групп показала отсутствие достоверных различий между контрольной группой и группами, купавшимися в Неостомозане 0,1 % концентрации. Таким образом, результаты исследования свидетельствуют, что Неостомозан не оказывает какого-либо специфического эмбриотропного действия и не приводит к нарушениям развития плодов у крыс.

Заключение. На основании полученных данных в модельном опыте на лабораторных крысах можно сделать вывод, что пиретроидный препарат Неостомозан 0,1 % концентрации не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием, регистрируемым в антенатальный период развития плодов крыс.