Изучение субхронической токсичности препарата Мастигард на коровах
Автор: Солодкова К.В., Шантыз А.Х., Кашковская Л.М., Сафарова М.И., Балышев А.В.
Статья в выпуске: 1 т.257, 2024 года.
Бесплатный доступ
Целью исследования стала оценка субхронической токсичности лекарственного препарата для ветеринарного применения Мастигард на коровах. Результаты исследования показали, что применение испытуемого препарата в сроки и в дозах, превышающих рекомендуемые инструкцией, способно оказывать умеренное местно-раздражающее действие на паренхиму вымени, косвенно характеризующиеся увеличением количества соматических клеток. Однако, данные изменения являются обратимыми после прекращения введения препарата. Стоит отметить, что длительное применение терапевтической дозы препарата Мастигард не вызывает местно-раздражающего действия на молочную железу, а также не оказывает системного влияния на организм животных.
Мастит, левофлоксацин, нозигептид, преднизолон, субхроническая токсичность, коровы
Короткий адрес: https://sciup.org/142240432
IDR: 142240432 | DOI: 10.31588/2413_4201_1883_1_257_228
Текст научной статьи Изучение субхронической токсичности препарата Мастигард на коровах
Молочное скотоводство – наиболее перспективная отрасль агропромышленного комплекса в России, первостепенная задача которой – увеличение объемов надоя молока, сохранение и повышение его биологической ценности [2]. Маститы наносят значительный экономический ущерб, который складывается из снижения молочной продуктивности стада (порядка 10-15%), а также ухудшения качественных характеристик молока [4]. Примерно в 40% случаев они становятся рецидивирующими, что связано с несоответствующим лечением, низким уровнем общей резистентности и ослаблением иммунной системы организма коров. Терапия мастита в большинстве случаев начинается после появления клинических признаков заболевания [6], которые развиваются по прошествии нескольких недель, а иногда и месяцев с момента начала патологического процесса в молочной железе. Поздние сроки лечения приводят к значительному нарушению функции железы. Следовательно, важной целью лечения мастита является эффективное и быстрое восстановление продуктивности животного [3].
Отечественная компания NITA-FARM разработала оригинальный комбинированный препарат Мастигард для лечения различных форм мастита. Входящие в состав препарата левофлоксацин и нозигептид позволяют уничтожать широкий спектр бактерий в просвете соскового канала и в тканях молочной железы, а преднизолон снимает воспалительную реакцию, усиливает регенерацию тканей и ускоряет выздоровление. Особенность лекарственной формы Мастигарда позволяет обеспечить высокую эффективность терапии при коротком курсе, что было подтверждено исследованиями при различных формах мастита коров [5].
Целью данного исследования являлась оценка безопасности применения препарата Мастигард при длительном поступлении в увеличенных дозах коровам.
Материал и методы исследований. Исследование проводили на здоровых дойных коровах голштинизированной чёрно-пёстрой породы в возрасте 4,5-5 лет, массой 410450 кг, 2-3 лактации, которых разделили на три группы (2 опытные и 1 контрольная) по 5 голов в каждой. Лекарственный препарат Мастигард коровам вводили интрацистернально, в каждую четверть вымени, один раз в сутки в течение 6 дней: в первой опытной группе – в терапевтической дозе (40 г/голову), во второй опытной группе – в двукратной терапевтической дозе (80 г/голову) [8]. Коровам контрольной группы препарат не применяли. За животными вели наблюдение на протяжении всего периода введения препарата и 10 дней после его отмены. В ходе эксперимента оценивали следующие показатели: на 1, 7 и 16 сутки – масса тела, температура, пульс, дыхание, руминация, отбирали пробы крови для гематологического и биохимического анализов, а также пробы молока для подсчета количества соматических клеток с помощью диагностикума Кенотест. Ежедневно проводили наблюдение за общим состоянием животных, потреблением корма и воды, а также состоянием молочной железы. Последнее выполняли методом осмотра, поверхностной и глубокой (бимануальной) пальпации, определяли форму вымени, симметричность долей и сосков, целостность кожи, наличие болезненности, очагов уплотнения или размягчения.
Полученные экспериментальные данные подвергали статистической обработке с использованием коэффициента Стьюдента.
Результат исследования . В результате исследований установлено, что интрацистернальное введение препарата Мастигард в терапевтической и увеличенной дозах не оказало негативного влияния на общее состояние и клинические показатели животных. На протяжении всего эксперимента не отмечали угнетения и признаков интоксикации у коров; аппетит, жвачка и потребление воды оставались прежними и не различались между опытными и контрольной группами. Значения температуры, пульса, дыхания, частоты сокращения рубца экспериментальных животных на протяжении всего исследования были сопоставимы с аналогичными показателями контрольных особей.
При клиническом осмотре вымени до введения препарата, отмечено здоровое состояние молочной железы у всех подопытных коров. Молочная железа ваннообразной формы, по величине средняя и выше средней, все четверти развиты равномерно. Целостность кожи сосков не нарушена, цвет розовый, при пальпации безболезненные, мягкие, длинной 6-7 см, диаметр составил 3-4 см. Тонус и проходимость сфинктера сохранены, деформации нет. При пальпации лимфатические узлы не определяются. Кровеносные сосуды наполнены, умеренно напряжены. Молоко при контрольном доении сдаивалось легко, имело белый цвет, характерную консистенцию. Посторонних примесей в молоке не обнаруживали.
Ежедневное интрацистернальное введение Мастигарда в терапевтической дозе на протяжении 6 суток (превышая длительность курсового приема в два раза) не вызвало изменений в состоянии молочной железы экспериментальных животных. Так, ежедневные наблюдения показали, что ее форма, консистенция, целостность сосков и другие параметры не отличались от таковых до введения препарата и от показателей контрольной группы.
При наблюдении за животными, которым применяли Мастигард в увеличенной дозе, с первых по пятые сутки эксперимента также не выявляли изменений в состоянии молочной железы. Однако на 6 сутки введения препарата у четырех коров выявили уплотнения паренхимы вымени, а также незначительное изменение характера и количества секрета (водянистый, желтоватого цвета), получаемого при контрольном сдаивании.
Через 10 суток после завершения применения испытуемого препарата, в результате клинического осмотра в опытных группах, при пальпации не было выявлено уплотнения паренхимы вымени, а при сдаивании молоко было естественного цвета, посторонние примеси в молоке не обнаруживались, что свидетельствует о здоровом состоянии молочной железы и не отличалось от контрольной группы.
Анализ динамики уровня соматических клеток в молоке экспериментальных животных показал отсутствие раздражающего действия на ткани молочной железы на фоне применения препарата Мастигард в терапевтической дозе на протяжении 6 суток (таблица 1). У коров, которым вводили препарат в увеличенной дозе, на следующие сутки после последнего введения препарата отмечали увеличение соматических клеток выше нормативных значений, что косвенно свидетельствует о местно-раздражающем действии на ткани вымени. В то же время установили, что выявленные изменения носят обратимый эффект, что подтверждается снижением уровня соматических клеток до нормы и соответствует значению в контроле.
Таблица 1 – Количество сематических клеток в молоке (n = 5)
Показатель |
Количество соматических клеток в 1 мл 0 – 170000 (здоровы) >170 000 – 500000 (субклинический мастит) |
||
№ группы |
До введения |
7 сутки опыта |
16 сутки опыта |
Первая опытная |
0 – 170000 |
0 – 170000 |
0 – 170000 |
Вторая опытная |
0 – 170000 |
>170000 – 500000 |
0 – 170000 |
Контроль |
0 – 170000 |
0 – 170000 |
0 – 170000 |
Таблица 2 – Гематологические показатели крови подопытных животных (n = 5)
Показатель |
До введения препарата |
На 7 сутки опыта |
На 16 сутки опыта |
||||||
5 $ св щ 1 й о |
5 § & й о |
5 О « |
5 $ св щ 1 й |
5 § й о |
5 |
5 $ св щ 1 й |
5 § й о |
О |
|
Гематокрит, % |
38,2± |
40, ± |
39,6± |
39,6± |
41,2± |
39,8 ± |
40,0± |
38,2± |
39,0± |
1,6 |
402,,2± |
3,9 |
3,4 |
41,22± |
3,1 |
2,9 |
1,6 |
3,2 |
|
Гемоглобин, г/л |
103,8± |
104,8± |
100,2± |
104,2± |
98,2± |
102,8± |
101,4 ± |
100,4± |
102,8± |
6,4 |
7,2 |
8,8 |
8,2 |
8,8 |
8,2 |
9 |
7,3 |
6,5 |
|
Эритроциты, 1012/л |
6,5± 0,7 |
6,4± 0,9 |
6,04± 1 |
6,1± 0,8 |
5,9± 1,1 |
6,1± 0,9 |
6,3± 0,7 |
6,3± 0,5 |
6,48± 0,9 |
Лейкоциты, 109/л |
6,5± |
6,2± |
5,92± |
10,6± |
12,5± |
8,1± |
7,9 ± |
11,6± |
7,4± |
1,4 |
61,2,3± |
0,9 |
0,6 |
0,4 |
0,6 |
1,8 |
2 |
1,9 |
|
Тромбоциты, 109/л |
513± |
521± |
522± |
547± |
544,6± |
564± |
552 ± |
559± |
558± |
32 |
47 |
38 |
29,5 |
38,1 |
47 |
69,7 |
63 |
58 |
|
Палочкоядерные |
2,6± |
3,6± |
3,2± |
4,6 ± |
5,8± |
3,4± |
3,6± |
3,8± |
3,4± |
нейтрофилы, % |
1,1 |
1,4 |
1,4 |
0,68 |
1 |
0,7 |
1,1 |
1 |
0,7 |
Сегментоядерные |
28,4± |
27,4± |
27,8± |
25,8 ± |
24,4± |
28,8± |
26,0± |
25,8± |
27,0± |
нейтрофилы, % |
2,3 |
1,9 |
2 |
3,4 |
3,7 |
3,8 |
1,2 |
2,7 |
2,3 |
Эозинофилы, % |
5,8± |
6,0± |
6,6 |
4,4 ± |
3,4± |
6,0± |
6,0± |
5,8± |
6,4 ± |
1,6 |
1,8 |
± 1,9 |
41,4,1± |
1,7 |
2 |
2 |
1,4 |
1,4 |
|
Моноциты, % |
4,4± |
5,4± |
4,6± |
3,6 ± |
3,4± |
4,0 ± |
4,4± |
3,0± |
3,6± |
4 1,4,1± |
1,1 |
42,6,1± |
1,4 |
1,4 |
0,9 |
42,4,3± |
1,5 |
1,9 |
|
Лимфоциты, % |
58,8± |
57,6± |
57,8 |
61,6 ± |
63,0± |
57,8± |
60,0± |
61,6± |
59,6± |
3,8 |
2,3 |
± 2 |
2,9 |
3,6 |
2,7 |
3,5 |
3,9 |
3,1 |
Общий клинический анализ крови животных показал, что после 6 суток ежедневного интрацистернального введения препарата Мастигард в терапевтической и двукратной терапевтической дозах, у коров опытных групп незначительно увеличилось содержание лейкоцитов, однако полученные значения находились в пределах видовой нормы и имели обратимый характер. Так, через 10 суток после прекращения введения препарата в терапевтической дозе количество лейкоцитов соответствовало первоначальным значениям, полученным до введения препарата (Таблица 2). В целом увеличение данного показателя обосновано, как длительным ежедневным введением препарата в сосковый канал, так и большим объемом при введении увеличенной дозы и связано с механическим воздействием на эпителий соскового канала.
Результаты исследований сыворотки крови свидетельствовали о том, что биохимические показатели крови экспериментальных животных не имели статистически достоверных отличий от аналогичных показателей контрольных особей до введения испытуемого препарата, а также на 7 и 16 сутки эксперимента (Таблица 3).
Таблица 3 – Биохимические показатели крови подопытных животных (n = 5)
Показатель |
До введения препарата |
На 7 сутки опыта |
На 16 сутки опыта |
||||||
b h |
§ I о |
hQ 4 о £ и |
b h |
§ I о |
4 |
b h |
о |
||
Билирубин общий, |
5,6± |
5,6± |
5,9± |
6± |
5,8± |
5,6± |
5,7± |
5,6± |
5,6± |
мкмоль/л |
1 |
1 |
0,9 |
0,8 |
1,1 |
1,2 |
0,9 |
0,9 |
0,8 |
Билирубин прямой, |
1,3± |
1,3± |
1,6± |
1,2± |
1,1± |
1,3± |
1,02± |
0,9± |
1,1± |
мкмоль/л |
0,9 |
0,9 |
0,5 |
0,7 |
0,8 |
0,4 |
0,7 |
0,4 |
0,9 |
АСТ, Ед/л |
76± |
73,2± |
79± |
80,0± |
82,6± |
78,0± |
74,2± |
76,4± |
78,8± |
6,9 |
12,1 |
10,8 |
9,7 |
13,3 |
11,1 |
10,1 |
15,6 |
13,4 |
|
АЛТ, Ед/л |
24,0± 5,4 |
21,0± 7,5 |
22,6± 4,4 |
20,0± 6,6 |
22,2± 6,9 |
18,4± 7,2 |
21,8± 5,9 |
20,2± 4,3 |
19,8± 7,8 |
Мочевина, ммоль/л |
5,0± |
4,9± |
4,6± |
5,4± |
5,1± |
5,6± |
4,9± |
5,6± |
5,2± |
1,1 |
1,6 |
0,8 |
1,3 |
2,5 |
1,5 |
1,5 |
0,8 |
1,2 |
|
Креатинин, мкмоль/л |
84,3± 7,9 |
84,7± 8,6 |
82,8± 6,9 |
104,8± 35 |
108,3± 37,5 |
115,5 ± 40,2 |
84,6± 7,1 |
86,6± 7,4 |
84,1± 6,6 |
Общий белок, г/л |
79,2± 5,1 |
81,0± 4 |
81,4 ±4,9 |
79,6± 4,7 |
79,2± 3,3 |
81,2± 4,3 |
79,2± 4 |
77,6± 4,1 |
78,6± 2,9 |
Щелочная фосфатаза, Ед/л |
112,2± 11,3 |
120,4± 26,3 |
117,0± 25,3 |
123± 18 |
126,0± 24,4 |
128,4 ± 17,1 |
125,8 ± 20,3 |
127,2± 19,7 |
117,2 ± 20,7 |
Полученные результаты исследования согласуются с литературными данными. Так, в исследованиях на лабораторных животных при нанесении нозигептида на кожу и конъюнктиву, установлено слабо раздражающее действие на слизистую оболочку глаза [7]. В результате оценки местно-раздражающего действия комбинированного антибактериального препарата против мастита коров, содержащего в своем составе также преднизолон, было показано слабое раздражающее действие на конъюнктиву, проявляющееся в виде гиперемии [1].
Необходимо отметить, что в клинических исследованиях введение препарата в терапевтической дозе в течение трех дней коровам с воспалительным процессом в молочной железе приводило к купированию воспаления с последующим восстановлением молочной продуктивности. Таким образом, при применении лекарственного препарата Мастигард, согласно инструкции, негативного влияния на ткани молочной железы не установлено [5].
Заключение. Установлено, что длительное применение терапевтической дозы препарата Мастигард не вызывает местно-раздражающего действия на молочную железу. Препарат в терапевтической и повышенной дозах не оказывает патологического системного влияния на организм коров. Увеличение дозы и кратности введения препарата, рекомендуемых инструкцией, приводит к раздражению тканей молочной железы, однако данные изменения самостоятельно купируются после отмены препарата.
Список литературы Изучение субхронической токсичности препарата Мастигард на коровах
- Белявский, В. Н. Фармако-токсикологическая оценка препарата "Лактомаст" и его терапевтическая эффективность при мастите у коров / B. Н. Белявский, И. Т. Лучко, А. Ю. Кравец // Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства. -2015. - № 18 (2). - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/farmako-toksikologicheskaya-otsenka-preparata-laktomast-i-ego-terapevticheskaya-effektivnost-pri-mastite-u-korov.
- Волостнова, А. А. Эффективность комплексной терапии маститов у коров // А. А. Волостнова, К. С. Грехнева, Н. М. Волошина, А. Н. Монастырева // Colloquium-journal. - 2022. - №2 (125). -URL: https://cyberleninka.ru/article/n/effektivnost-kompleksnoy-terapii-mastitov-u-korov. EDN: FMZXSO
- Глотова, Т. И. Возбудители мастита у коров на крупных молочных комплексах и их резистентность к антибактериальным препаратам / Т. И. Глотова [и др.] // Актуальные проблемы лечения и профилактики болезней молодняка: материалы Международной научно-практической конференции (г. Витебск, 2-4 ноября 2022 г.) / Витебская государственная академия ветеринарной медицины, Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии. - Витебск: ВГАВМ. - 2022. - C. 72-79. EDN: NZDIBT
- Грицюк, В. А. Терапевтическая эффективность препарата "Субмастин-КРС" при субклиническом мастите у коров / В. А. Грицюк [и др.] // Ученые записки учреждения образования "Витебская ордена "Знак Почета" государственная академия ветеринарной медицины". -2022. - Т. 58. - Вып. 1. - С. 8-11. EDN: FAGTDS
- Кашковская, Л. М. Мастигард -новое средство для лечения коров при м аститах // Л. М. Кашковская, С. В. Новикова, В. Н. Зубарев // Ветеринария. - 2022. - № 11. - С. 43-47. -DOI. DOI: 10.30896/0042-4846.2022.25.11.43-47 EDN: LLKRNS
- Красочко, П. А. Изучение видового состава микроорганизмов и их чувствительность к антибактериальным препаратам при маститах у коров / П. А. Красочко [и др.] // Актуальные проблемы инфекционной патологии жи в отных и пути их решения: материалы Международной научно-практической конференции, посвященной Дню белорусской науки и 95-летию кафедры эпизоотологии и инфекционных болезней (15-16 декабря 2022 г.) / Витебская государственная академия ветеринарной медицины. - Витебск: ВГАВМ, 2023. - С. 67-69. EDN: YRZAIN
- Отчет об оценке кормовой добавки Нозигептид. Комиссия по безопасности пищевых продуктов. Комитет по специальным исследованиям удобрений и кормов. - 71 с. - URL: https://www.fsc.go.jp/iken-bosyu/pc4_hishiryou_nosih_210219.pdf.
- Приказ Минсельхоза от 6 марта 2018 г. N 101 "Об утверждении правил проведения доклинического исследования л екарственного средства для ветеринарного применения, клинического исследования лекарственного препарата для ветеринарного применения, исследования биоэквивалентности лекарственного препарата для ветеринарного применения" // Зарегистрировано в Минюсте РФ 05.06.2018 N 51296. - 32 с.