Энтеромикробиоценоз цыплят-бройлеров при ассоциативной кишечной инфекции

В птицеводческих хозяйствах значительную часть среди всех болезней занимают кишечные инфекции, главную роль в их этиологии играют условно-патогенные микроорганизмы и их ассоциации [1; 2; 3].

Желудочно-кишечный тракт ‒ место обитания различных микроорганизмов, формирующих энтеромикробиоценоз. Это важнейшая экосистема, обеспечивающая функционирование и жизнедеятельность макроорганизма. Содержит более четырехсот различных видов микроорганизмов, среди которых в процессе эволюции сформировались множественные взаимосвязи как между собой, так и с макроорганизмом. Для нормального физиологического состояния микрофлоры кишечника характерен стабильный видовой состав; она играет важную физиологическую, иммунологическую и антагонистическую роли в жизнедеятельности организма. По численности и значимости в

энтеромикробиоценозе преобладают бифидо - и лактобактерии, вместе с тем условнопатогенная микрофлора также является постоянным обитателем кишечника и выполняет свои функции. Нарушение нормального количественного соотношения микробиоценоза происходит в результате резкой смены состава корма и его несбалансированности по питательным веществам, применения антибиотиков, высокой микробной обсеме-ненности помещений, воды, кормов, воздуха, а также различных технологических стрессов. При уменьшении полезной микрофлоры интенсивно размножаются условнопатогенные микроорганизмы. Они вступают в ассоциации, активируя свои вирулентные и патогенные свойства, и вызывают кишечные инфекции, проявляющиеся диареей, интоксикацией, обезвоживанием организма [4; 5; 6].

Общепризнано, что антибиотики оказывают отрицательное влияния на нормальную микрофлору желудочно-кишечного тракта, однако исключить их применение в промышленном птицеводстве не всегда возможно. Лечение цыплят-бройлеров при кишечных инфекциях перспективно проводить препаратами, которые восстанавливают рост нормальной микрофлоры, имеют выраженную антагонистическую активность в отношении патогенных микроорганизмов. Сегодня существует широкий спектр препаратов для коррекции кишечного микробиоценоза [7; 8; 9]. Все шире для лечения мик-роэкологических нарушений в пищеварительном тракте используют препараты немикробного происхождения, способные оказывать лечебный эффект на организм хозяина путем селективной стимуляции роста и размножения собственной нормальной микрофлоры [10; 11]. К таким средствам относятся препарат «Пепидол». Он обладает антимикробным и энтеросорбирующим действиями, уменьшает проницаемость слизистой оболочки кишечника, повышает ее защитные свойства, нормализует обменные процессы и повышает естественную резистентность организма. Его широкий спектр физиологической и биологической активности успешно применяют во многих областях гуманитарной медицины [12]. Ранее нашими исследованиями установлено, что пепидол обладает антимикробной активностью на возбудителей кишечных инфекций птиц in vitro и in vivo, предохраняет организм цыплят-бройлеров от возбудителей, профилакти-рует развитие инфекционного процесса [13; 14; 15].

Цель исследования - изучить влияние препарата «Пепидол» на микробиоценоз цыплят-бройлеров при ассоциативной кишечной инфекции.

Материал и методы

Экспериментальное исследование проведено на базе птицеводческого хозяйства и в отделе ветеринарии ФГБНУ СибНИИП. Для постановки опыта отбирали цыплят с клиническими признаками кишечной инфекции, подтвержденной бактериологическим методом. Из 3-дневных цыплят-бройлеров кросса «Росс 308» по принципу аналогов были сформированы контрольная и четыре опытные группы (по 20 гол. в каждой). Цыплята контрольной группы с лечебной целью получали антибиотик «Польодоксин» в дозе 1 мл/л воды в течение пяти дней. Бройлерам первой и второй групп выпаивали соответственно 2- и 1 %-ный препарат «Пепидол» (в дозах 4 мл на гол. в течение пяти дней). Цыплята третьей и четвертой групп получали в первые пять дней лечения антибиотик «Польодоксин», с шестого по десятый - соответственно 2- и 1 %-ный пепидол в тех же дозах. Наблюдали за птицей опытных групп в течение 15 дн. лечения. Условия содержания и кормления были одинаковыми для всех групп.

Для бактериологических исследований отбирали пробы содержимого кишечника: через 5 и 10 дн. лечения от 5 гол. каждой группы в стерильные, предварительно взвешенные флаконы. Исследуемый материал разводили физиологическим раствором в соотношении 1 : 10, готовили ряд последовательных десятикратных разведений. Проводили посевы, используя диагностически значимые разведения, на пластинчатые питательные среды не позднее двух часов после отбора проб. Количество лактобактерий определяли на лактоагаре, бифидобактерий ‒ на среде Блаурокка, энтеробактерий ‒ на среде Эндо, энтерококков ‒ на энтерококкагаре, стафилококков ‒ на стафилококкагаре, гемолитических форм микроорганизмов ‒ на кровяном агаре, сальмонелл ‒ на висмут-сульфит агаре [16]. После культивирования проводили количественный учет характерных колоний. Экспериментальные данные обрабатывали методом статистики с использованием критерия достоверности Стьюдента.

Обсуждение результатов

На долю полезных микроорганизмов приходится основная часть энтеробиоценоза. Полезная микрофлора имеет элементы саморегуляции и в определенных пределах способна противостоять воздействию вредных факторов. В случае превышения компенсаторных возможностей микроэкологической системы кишечника численность популяции нормальной микрофлоры снижается, ее место занимают другие виды микроорганизмов. Нарушение баланса приводит к нарушению функции пищеварения, развитию инфекционного процесса и для выздоровления важно восстановление численности представителей нормальной микрофлоры. Результаты исследований по изучению влияния препарата «Пепидол» при ассоциативной кишечной инфекции на нормальную микрофлору цыплят-бройлеров представлены в табл. 1.

Таблица 1

Содержание полезной микрофлоры в кишечнике бройлеров, lg КОЕ/г

Показатель	Дни от начала лечения	Группа
		контрольная	1-я опытная	2-я опытная	3-я опытная	4-я опытная
Бифидобактерии	5-й	11,2 ± 0,1	12,4 ± 0,3*	12,6 ± 0,1***	11,3 ± 0,7	11,4 ± 0,5
	10-й	11,4 ± 0,1	12,6 ± 0,4*	12,7 ± 0,1***	12,7 ± 0,1***	12,9 ± 0,5*
Лактобактерии	5-й 10-й	8,9 ± 0,7	9,5 ± 0,5	9,3 ± 1,0	8,5 ± 0,5	8,7 ± 0,9
		9,0 ± 1,0	9,3 ± 0,8	9,3 ± 0,9	9,7 ± 0,9	9,7 ± 1,1

* Р < 0,05; *** Р < 0,001.

Содержание бифидобактерий в содержимом кишечника через 5 дн. лечения в первой и второй опытных группах было выше, чем в контрольной, на 1,2 и 1,4 lg КОЕ/г, в третьей ‒ на 1,1 и 1,3 lg КОЕ/г, четвертой ‒ на 1,0 и 1,2 lg КОЕ/г. При применении антибиотика количество бифидобактерий в кишечнике цыплят третьей и четвертой групп ‒ на уровне контрольной. Наибольший показатель зарегистрирован во второй группе (1 %-ный раствор препарата «Пепидол»).

Через 10 дн. лечения количество бифидобактерий у первой и второй групп оставалось на том же уровне, свидетельствуя о пролонгированном действии препарата. Наблюдали увеличение бифидобактерий в третьей и четвертой группах, по сравнению с показателями через 5 дн. лечения, соответственно на 1,4 и 1,5 lg КОЕ/г, это связано с применением препарата «Пепидол» в этих группах после пятидневного курса антибиотика.

Наибольшее количество бифидобактерий через 10 дн. лечения зарегистрировано при применении 1 %-ных растворов препарата «Пепидол»: во второй группе выше первой ‒ на 0,1 lg КОЕ/г, в четвертой группе ‒ на 0,2 lg КОЕ/г относительно третьей. В контрольной группе (антибиотик) количество бифидобактерий было наименьшим и за период опыта не изменялось.

При анализе данных по содержанию лактобактерий в кишечнике цыплят-бройлеров выявлена аналогичная тенденция. После 5 дн. в группах, где применяли пе-пидол, количество лактобактерий было наибольшим. Так, их содержание в первой и второй группах выше контрольной соответственно на 0,6 и 0,4 lg КОЕ/г, третьей ‒ на 1,0 и 0,8 lg КОЕ/г, в четвертой ‒ на 0,8 и 0,6 lg КОЕ/г. Отмечено пролонгированное действие препарата «Пепидол» на рост лактобактерий кишечника через 5 дн. после его отмены в первой и второй группах.

Использование для лечения цыплят-бройлеров при ассоциативной кишечной инфекции антибиотика широкого спектра действия снизило количество лактобактерий. Наименьшее их количество после 5 дн. лечения наблюдали в контрольной, третьей и четвертой группах. Вместе с тем через 10 дн. лечения в третьей и четвертой группах зафиксировали увеличение лактобактерий на 1,2 и 1,0 lg КОЕ/г соответственно (по сравнению с показателями 5 дн. лечения), это связано с применением препарата «Пепидол» после антибиотика. В контрольной группе уровень лактобактерий после 10 дн. лечения находился на том же уровне.

Таким образом, препарат «Пепидол» обладает пребиотическим свойством, способствует размножению и заселению кишечника птицы собственной полезной микрофлорой.

Неблагоприятные воздействия факторов окружающей среды приводят к повышенному заселению кишечника условно-патогенной и патогенной микрофлорой, в первую очередь энтеробактериями, стафилококками и стрептококками. Они относятся к транзиторной микрофлоре кишечника цыплят и часто являются возбудителями кишечных инфекций птиц.

Количество энтеробактерий после 5 дн. лечения, как в контрольной, так и в опытных группах, находилось примерно на одном уровне, указывая на схожее антимикробное действие антибиотиков и препарата «Пепидол» (табл. 2). Наименьшее количество энтеробактерий отмечено во второй группе. В опытных группах содержание энтеробактерий через 10 дн. лечения оставалось на том же уровне. Наименьшие показатели засвидетельствованы во второй и четвертой группах. В контрольной уровень энтеробактерий увеличился на 1,7 lg КОЕ/г (по сравнению с показателями через 5 дн. лечения) и на 1,7‒2,2 lg КОЕ/г относительно опытных групп.

Таблица 2

Содержание патогенной и условно-патогенной микрофлоры в кишечнике цыплят-бройлеров, lg КОЕ/г

Показатель	Дни от начала лечения	Группа
		контрольная	1-я опытная	2-я опытная	3-я опытная	4-я опытная
Энтеробактерии	5-й	7,9 ± 0,2	7,7 ± 0,5	7,4 ± 0,8	7,8 ± 0,7	7,5 ± 0,4
	10-й	9,6 ± 0,4	7,9 ± 0,5*	7,5 ± 0,5*	7,8 ± 0,2*	7,4 ± 0,7*
Стафилококки	5-й	7,2 ± 0,7	6,0 ± 0,9	6,1 ± 0,7	7,0 ± 0,9	7,1 ± 0,5
	10-й	7,9 ± 1,0	6,6 ± 0,6	7,0 ± 0,5	7,1 ± 0,9	7,3 ± 0,5
Энтерококки	5-й	7,3 ± 0,5	7,1 ± 0,6	7,1 ± 0,6	7,4 ± 0,9	7,2 ± 0,6
	10-й	7,9 ± 0,5	7,0 ± 0,4	7,1 ± 0,5	7,1 ± 0,6	7,3 ± 0,5

* Р < 0,05.

По результатам анализа содержимого кишечника бройлеров: применение пепидо-ла снижало количество стафилококков. Так, их количество через 5 дн. лечения первой и второй групп было меньше соответственно контрольной ‒ на 1,2 и 1,1 lg КОЕ/г, третьей ‒ на 1,0 и 0,9 lg КОЕ/г и четвертой ‒ на 1,1 и 1,0 lg КОЕ/г.

После 10 дн. лечения количество стафилококков в содержимом кишечника контрольной группы по сравнении с опытными выше на 0,6‒1,3 lg КОЕ/г и на 0,7 lg КОЕ/г относительно показателей 5 дн. лечения.

Количество энтерококков в содержимом кишечника бройлеров первой и второй групп меньше контрольной на 0,2 lg КОЕ/г, третьей ‒ на 0,3 lg КОЕ/г и четвертой ‒ на 0,1 lg КОЕ/r соответственно. В контрольной группе содержание данных микроорганизмов после 10 дн. лечения увеличилось на 0,6 lg КОЕ/г (по сравнению с показателем 5 дн. лечения) и было выше на 0,6‒0,9 lg КОЕ/г относительно опытных групп. Применение пепидола после антибиотиков снижало количество условно-патогенных микроорганизмов. Отмечено пролонгированное действие пектина на рост условно-патогенной микрофлоры кишечника после 10 дн. лечения в первой и второй группах, где применяли пепидол без антибиотиков в течение 5 дн.

В первой и второй группах при использовании пепидола гемолитические бактерии в содержимом кишечника отсутствовали по сравнению с группами, где применяли антибиотик. Так, количество гемолитических бактерий после 5 дн. лечения составило в контрольной группе 6,3 lg КОЕ/г, третьей ‒ 7,2 lg КОЕ/г и четвертой ‒ 7,0 lg КОЕ/г. После 10 дн. лечения цыплят-бройлеров в содержимом кишечника третьей и четвертой групп (после пятидневного курса антибиотикотерапии проведен пятидневный курс лечения препаратом «Пепидол») гемолитических бактерий не обнаружено. В контрольной же группе на протяжении лечения в содержимом кишечника цыплят выделяли гемолитические бактерии (5,3 lg КОЕ/г).

Сальмонеллы в содержимом кишечника цыплят-бройлеров контрольной и опытных групп не выделены.

Таким образом, оба препарата уменьшают количество патогенной и условнопатогенной микрофлоры; антибиотик снижает, а пепидол стимулирует рост полезной микрофлоры в кишечнике птиц.

Заключение

Препарат «Пепидол» при ассоциативной кишечной инфекции цыплят-бройлеров нормализует микробиоценоз за счет антимикробного и пребиотического действий. Наилучший результат получен в группах при применении 1 %-ного раствора препарата «Пепидол».

A.V. Portyanko1,2, S.B. Lysko1, A.P. Krasikov1,2, A.A. Hoffmann1,2

• ¹Siberian Poultry Institute, v. Morozovka of the Omsk region

• ²Omsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin, Omsk

Enteromikrobiotsenoz broiler chickens in associative intestinal infection