Клиническая значимость уровней ММП-1 и ТИМП-1 в фолликулярной жидкости при различных исходах вспомогательных репродуктивных технологий
Автор: Трубникова Л.И., Таджиева В.Д., Маринова О.А., Абакумова Т.В.
Журнал: Ульяновский медико-биологический журнал @medbio-ulsu
Рубрика: Клиническая медицина
Статья в выпуске: 4, 2017 года.
Бесплатный доступ
Цель исследования. Определение клинической значимости исследования ММП-1 и ТИМП-1 в фолликулярной жидкости (ФЖ) и роли системы ММП-1/ТИМП-1 в регуляции функции яичника. Результаты изучения ферментов ММП-1 и ТИМП-1, обладающих провоспалительным действием, вызывающих деградацию внеклеточного матрикса и ограничивающих расщепление коллагена, могут объяснить отсутствие эффекта восстановления роста, развития и овуляции фолликулов в технологиях ВРТ. Материалы и методы. Исследована матриксная металлопротеиназа (ММП-1) и тканевой ингибитор (ТИМП-1) в ФЖ у 20 пациенток с различным генезом бесплодия, применивших в качестве лечения метод ВРТ. Для изучения системы ММП-1/ТИМП-1 использован количественный твердофазный иммуноферментный анализ типа «сэндвич». ФЖ забиралась при пункции фолликулов в программах ВРТ. Иммуноферментный анализ проводился на автоматическом планшетном фотометре Multiskan FC (USA, 2012). Результаты. Концентрация ММП-1 и ТИМП-1 в ФЖ находится в определенной зависимости от генеза бесплодия у каждой конкретной пациентки. Показано, что у пациенток с трубно-перитонеальным генезом бесплодия повышается концентрация ММП-1. При яичниковой недостаточности низкие уровни эстрогенов и прогестерона сопровождаются снижением концентрации ММП-1 и повышением активности ТИМП-1. Подобные изменения уровней металлопротеиназ могут приводить к усилению процессов фиброзирования и склерозирования ткани яичников, развитию атрезии фолликулов и увеличению риска развития яичниковой недостаточности.
Яичник, бесплодие, внеклеточный матрикс, соединительная ткань, матриксная металлопротеиназа, тканевой ингибитор матриксной металлопротеиназы
Короткий адрес: https://sciup.org/14113320
IDR: 14113320 | DOI: 10.23648/UMBJ.2017.28.8741
Текст научной статьи Клиническая значимость уровней ММП-1 и ТИМП-1 в фолликулярной жидкости при различных исходах вспомогательных репродуктивных технологий
Введение. В последние годы уделяется заметное внимание эндопептидазам, поддерживающим состояние и функцию яичника. Матриксные металлопротеиназы (ММП) – это семейство внеклеточных цинк- и каль-цийзависимых эндопептидаз, способных разрушать все типы белков внеклеточного матрикса. В настоящее время известно более 20 ММП, участвующих в механизмах ремоделирования ткани. Матриксная металлопротеиназа-1 (ММП-1) принимает участие в деградации коллагена при воспалительных заболеваниях [1–5].
Экспрессия ММП-1 обнаруживается в половых клетках всех стадий развития фолликулов. Специфическое маркирование выявляется и в ядре, и в цитоплазме ооцитов.
Иммунопозитивны и клетки гранулезной оболочки фолликулов разных стадий развития. Степень мечения гранулезных клеток прямо пропорциональна степени зрелости фолликулов: в примордиальном и начавшем рост первичном фолликуле гранулезные клетки слабо включают метку, в то время как наибольшее количество иммуногистохимических включений обнаруживается в клетках полостных вторичных и третичных фолликулов. Клетки theca interna маркируются умеренно, а локусы интерстициальных гормонопродуцирующих клеток и клетки покровного эпителия визуализируются четко. В сосудах определяется следовая реакция. Соединительнотканная строма яичника иммунонега-тивна. ММП-1 определяется в лютеиновых клетках функционально активных желтых тел и не определяется в стромальных компонентах [1, 6].
ММП относятся к индуцируемым ферментам. На уровне траскрипции в роли активатора может выступать ряд факторов: стероидные и тиреоидные гормоны, цитокины, факторы роста, химические агенты, глюкоза крови и т.д. Также ММП могут активироваться низкой РН, гипертермией и ПОЛ [1, 3, 6, 7].
На посттрансляционном уровне регуляция активности ферментов осуществляется при взаимодействии с тканевыми ингибиторами металлопротеиназ (ТИМП). ТИМП-1 присутствуют в ооцитах и гранулезных клетках фолликулов разных стадий развития. Фолликулы ранних стадий развития выявляют слабую экспрессию, наиболее ярко маркируются зрелые фолликулы, причем распределение ТИМП-1 выражено в фолликулярных эпителиальных клетках, theca interna, интерстициальных эндокриноцитах и покровном эпителии. Экспрессии ТИМП-1 в соединительнотканной строме не выявлено, в атрети-ческих телах экспрессия ТИМП-1 выражена слабо. Основные места экспрессии ТИМП-1 -это яичники и костная ткань. ТИМП-1 ингибирует развитие опухоли, метастазирование и ангиогенез [1, 2, 6].
ТИМП образуют высокоаффинные необратимые комплексы с ММП, тем самым нивелируя патологическое влияние ММП [1].
Следует отметить, что система ММП-1/ ТИМП-1 играет ключевую роль в процессах ремоделирования внеклеточного матрикса, связанного с развитием фолликула в неизмененных яичниках. Качественные характеристики созревающего фолликула во многом зависят от уровня и соотношения компонентов ММП-1/ТИМП-1-системы [3-5].
В яичниках происходит постоянный рост фолликулов и желтых тел. Этот процесс требует непрерывной реорганизации в клеточном составе этих структур и реорганизации окружающего соединительнотканного матрикса при непосредственном участии системы ММП-1/ТИМП-1 [1, 5, 8].
Существует хрупкое равновесие между делением клеток, формированием внеклеточного вещества и его разрушением. Благодаря этому в яичниках создаются оптимальные условия для быстрорастущих фолликулов и желтых тел, образования атретических тел. В результате ооциты и фолликулоциты созревающих фолликулов получают возможность расти и дифференцироваться. Перестройка коллагена также способствует клеточной миграции. Пролиферация фолликулярных клеток и клеток theca interna вокруг увеличивающихся в объеме фолликулов, врастание тека-клеток при формировании атретических тел, прогрессивное увеличение лютеоцитов, врастание периферических лютеоцитов в формирующиеся желтые тела происходят под контролем системы ММП-1/ТИМП-1 [8-11].
Нарушение деградации белков соединительной ткани может приводить к развитию патологических состояний, дисбаланс возникает под влиянием как наследственных факторов, так и неблагоприятных факторов в эмбриональном и постнатальном периодах, в периодах воздействия экзогенных факторов (неблагоприятная экологическая обстановка, стрессы, неполноценное питание и др.) [3, 5-7, 12, 13].
Учитывая биологическую роль ММП-1 и ТИМП-1, можно полагать, что дисбаланс в этой системе ведет к структурно-функциональным нарушениям экстрацеллюлярного матрикса, индуцируя его патологическое ремоделирование и фиброз. Согласно современным представлениям при фиброзе тканей уровень ММП снижается, а уровень ингибиторов возрастает. При разрушении коллагена, наоборот, содержание ММП увеличивается, а ингибиторов снижается. Надо полагать, что эти процессы имеют непосредственное отношение к функциональной активности яичников и формированию полноценных ооцитов [5, 7, 12, 14].
Цель исследования. Определение клинической значимости исследования ММП-1 и ТИМП-1 в фолликулярной жидкости и роли системы ММП-1/ТИМП-1 в регуляции функции яичника.
Материалы и методы. Исследованы матриксные металлопротеиназы и тканевые ингибиторы матриксных металлопротеиназ фолликулярной жидкости (ФЖ) у 20 женщин. Возраст пациенток колебался от 27 до 36 лет, в среднем составил 30,95±0,52 года. В городе проживали 90 % пациенток, 55 % имели высшее образование, у 75 % женщин зарегистрирован первый брак.
Соматический анамнез был отягощен у 13 (65 %) женщин. Основную группу заболеваний составили вегетососудистая дистония (35 %), болезни эндокринной системы и обмена веществ (30 %). У 25 % женщин выявлены заболевания печени и желудочнокишечного тракта, у 10 % – почек и мочевыделительной системы.
Возраст менархе в среднем составил 13,35±0,30 года. Нарушения менструальной функции отмечены у 60 % пациенток. Длительность бесплодия составила в среднем 3,30±0,56 года, причем у 45 % пациенток было диагностировано первичное бесплодие, у 55 % – вторичное. Среди пациенток, страдающих вторичным бесплодием, у 9,5 % предыдущие беременности закончились родами, у остальных женщин (90,5 %) была патологическая беременность (эктопическая, нераз-вивающаяся, самопроизвольные выкидыши, медицинские аборты).
Следует отметить, что все пациентки в анамнезе имели один или несколько очагов хронического воспалительного процесса органов малого таза, неоднократно лечились. Кроме того, у 45 % женщин имелись сопутствующие эндокринные нарушения. В соответствии с этим были выделены две группы обследованных: 1-ю группу составили пациентки с трубно-перитонеальным генезом бесплодия (11 чел.), 2-ю группу – с трубно-эндокринным генезом бесплодия (9 чел.) (табл. 1).
Таблица 1
Гинекологические заболевания и эндокринные нарушения |
1-я группа (n=11) |
2-я группа (n=9) |
N70 Сальпингит и оофорит |
7 (63,6) |
6 (66,7) |
N71 Воспалительные заболевания матки |
4 (36,4) |
5 (55,6) |
N72 Воспалительные заболевания шейки матки |
4 (36,4) |
3 (33,3) |
N73 Другие воспалительные заболевания женских половых органов (тазовый перитонит, гидросальпинкс) |
3 (27,3) |
- |
N83 Кисты яичников |
6 (54,6) |
5 (55,6) |
D25.9 Миома матки |
- |
1 (11,1) |
N80 Эндометриоз |
- |
4 (44,4) |
N85.0 Гиперплазия эндометрия |
- |
5 (55,6) |
Е22.1 Гиперпролактинемия |
- |
6 (66,7) |
Е28.2 СПКЯ, гирсутизм |
- |
4 (44,4) |
А50–А64 ИППП |
13 (118,2) (1,2 заболевания на одну пациентку) |
12 (133,3) 1,3 заболевания на одну пациентку) |
ВСЕГО гинекологических заболеваний, исключая ИППП |
24 (1,9 заболевания на одну пациентку) |
39 (4,3 заболевания на одну пациентку) |
Структура гинекологических заболеваний и эндокринных синдромов у пациенток программы ЭКО и ПЭ, абс. (%)
Обращает на себя внимание высокий индекс гинекологических заболеваний в каждой группе: почти каждая пациентка имела в анамнезе гинекологические заболевания нескольких локализаций одновременно. Почти с равной частотой регистрировались воспалительные заболевания матки (45 %), придатков (65 %) и шейки матки (35 %). У 15 % пациенток с трубно-перитонеальным генезом бесплодия обнаруживался тазовый перитонит и гидросальпинксы. Почти у каждой женщины в анамнезе была выявлена ИППП. У пациенток с эндокринными нарушениями чаще имело место поражение нескольких органов эндокринной системы, в среднем выявлялось 2 заболевания на каждую пациентку, их наличие существенно отягощало течение бесплодия. Эти пациентки в течение длительного времени проходили программы лечебно-реа- билитационных мероприятий и гормональной коррекции по восстановлению репродуктивной функции.
У 70 % женщин с лечебно-диагностической целью были проведены оперативные вмешательства на органах малого таза, причем во многих случаях у одной и той же пациентки могло быть проведено несколько оперативных вмешательств (табл. 2).
Таблица 2
Частота гинекологических операций, перенесенных пациентками, абс. (%)
Вид оперативного вмешательства |
1-я группа (n=11) |
2-я группа (n=9) |
Одно- и двухсторонняя тубэктомия по поводу гидросальпинкса, сактосальпинкса |
3 (15) |
1 (5) |
Одно- и двухсторонняя тубэктомия по поводу ВМБ |
6 (30) |
2 (10) |
Одно-двухсторонняя цистэктомия с резекцией яичника по поводу кист яичников, в т.ч. эндометриоидных |
3 (15) |
5 (25) |
Стоматопластика маточных труб |
9 (45) |
3 (15) |
Консервативная миомэктомия |
- |
1 (15) |
Внутриматочная хирургия (удаление полипов эндометрия, гиперплазированного эндометрия) |
2 (10) |
8 (40) |
ВСЕГО |
43 (2,2 на одну пациентку) |
С целью коррекции гормональных нарушений назначались патогенетические препараты.
В результате проведения программы ЭКО и ПЭ беременность наступила у 25 % пациенток.
ФЖ у пациенток, страдающих бесплодием и применивших в качестве лечения программы ВРТ, получали при трансвагинальной пункции яичников, во время стимуляции фолликулогенеза. Полученный биологический материал подвергали заморозке и хранению при температуре -20 ºС.
Содержание ММП-1 и ТИМП-1 в ФЖ определяли методами количественного твердофазного иммуноферментного анализа типа «сэндвич». Концентрацию MMP-1 устанавливали с помощью набора Matrix metalloproteinase-1 ELISA AbFrontier при диапазоне измерения 0,08–10 нг/мл. TIMP-1 определяли с использованием наборов eBioscience (Bender MedSystems, USA) при диапазоне измерения 0,06–10 нг/мл. Иммуноферментный анализ проводили на автоматическом планшетном фотометре Multiskan FC.
Гормональное исследование осуществляли иммуноферментным методом на аппарате УНИПЛАН+матричный принтер (АИФР-01, 2005), иммунохроматографический анализ – на аппарате Cobas e 411 (2010).
Статистический анализ результатов проводили с использованием пакета программ Statistica 6.0 for Windows (StatSoft Inc., США). Непрерывные переменные представляли в виде M±m, где M – среднее значение, m – ошибка среднего. При сравнении средних величин применяли расчет t-критерия Стьюдента. При сравнении количественных признаков в попарно не связанных группах использовали U-критерий Манна–Уитни. При исследовании взаимосвязей статистически значимыми считали отличия при вероятности ошибки заключения р<0,05.
Результаты и обсуждение. Результаты определения содержания ММП-1 и ТИМП-1 в ФЖ у 20 пациенток с различным генезом бесплодия, применивших в качестве лечения методы ВРТ, представлены в табл. 3.
Таблица 3
Показатель |
ММП-1 (n=20) |
ТИМП-1 (n=20) |
Среднее |
4,62±1,42 |
2436,3±92,2 |
Диапазон |
1,02-24,24 |
1700-2975 |
Размах вариации |
23,14 |
1275 |
Медиана (Ме) |
1,63 |
2500 |
Уровни ММП-1 и ТИМП-1 в ФЖ, нг/мл
Данные табл. 3 свидетельствуют, что уровень ММП-1 в ФЖ более чем в 500 раз ниже среднего показателя ТИМП-1. Характерен большой размах индивидуальных показателей ММП-1 - от 1,02 до 24,24 нг/мл, что указывает на зависимость концентрации ММП-1 от фак торов, характеризующих патогенез бесплодия.
При анализе содержания ММП-1 у женщин в зависимости от генеза бесплодия выявлено достоверное повышение ММП-1 у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием (табл. 4).
Таблица 4
Уровни ММП-1, ТИМП-1 в ФЖ в зависимости от генеза бесплодия, нг/мл
Показатель |
1-я группа -трубно-перитонеальный генез (n=11) |
2-я группа -трубно-эндокринный генез (n=9) |
р |
ММП-1 |
7,3±2,36 (1,26-24,24) |
1,36±0,08 (1,02-1,76) |
<0,05 |
ТИМП-1 |
2361,4±134,7 (1700-2975) |
2527,8±132,0 (2000-2950) |
>0,05 |
Наиболее высокие показатели ММП-1 выявлены у пациенток с явной клинической картиной воспалительных заболеваний гениталий. Так, самая высокая концентрация ММП-1 (24,24 нг/мл) установлена в ФЖ пациентки В., 29 лет, страдающей вторичным бесплодием в течение 6 лет и перенесшей хронический сальпингоофорит, хронический эндометрит. При обследовании выявлен гид-росальпинкс слева, спаечный процесс 2 ст. в придатках матки. Для восстановления фертильности были сделаны попытки внутрима-точной инсеминации и 1 попытка ЭКО и ПЭ. Эффекта не получено.
Наиболее низкий уровень ММП-1 (1,26 нг/мл) установлен у пациентки С., 31 года, страдающей вторичным бесплодием в течение 2 лет после проведенного медицинского аборта. В последующем женщине были проведены 2 тубэктомии лапароскопическим доступом по поводу внематочных беремен- ностей. Из инфекционных агентов выявлялись уреаплазма и микоплазма, пациентка лечилась до включения в программу ВРТ.
Наиболее низкий уровень ММП-1 (1,02 нг/мл) в группе с преимущественно эндокринным генезом бесплодия установлен у пациентки Р., 30 лет. В течение 6 лет она страдала вторичным бесплодием. В анамнезе - хронический двухсторонний сальпинго-офорит, двухсторонняя тубэктомия по поводу внематочных беременностей; по поводу уреаплазмоза и хламидиоза получала лечение. Однако в последующие годы развилось нарушение менструального цикла, гиперпролактинемия (800 мМЕ/л) и дисфункция коры надпочечников с клиническими проявлениями гирсутизма и уровнем ДГЭА-С 4,2 Мкг/мл. После коррекции гормональных нарушений попытка ЭКО и ПЭ завершилась наступлением беременности.
Самый высокий уровень ММП-1 во 2-й группе (1,76 нг/мл) получен у пациентки Т., 33 лет, страдающей первичным бесплодием в течение 5 лет. В анамнезе - гиперплазия эндометрия, полип цервикального канала, проведено хирургическое и консервативное лечение.
Средняя величина уровня ММП-1 у женщин 25–30 лет составила 7,2±2,60 нг/мл, в возрасте 31-36 лет - 3,51±1,71 нг/мл (р>0,05).
Существенных различий содержания ММП-1 в зависимости от длительности бесплодия также обнаружено не было (табл. 5).
Таблица 5
Зависимость уровней ММП-1 и ТИМП-1 от длительности бесплодия, нг/мл
Показатель |
Длительность бесплодия |
Р |
|
1-3 года (n=13) |
4 года и более (n=7) |
||
ММП-1 |
2,73±0,73 |
8,12±3,81 |
>0,05 |
ТИМП-1 |
2480,8±101,6 |
2353,6±204,5 |
>0,05 |
Размах индивидуальных показателей ТИМП-1 оказался небольшим, различия составили 1275 нг/мл (табл. 3). У женщин с трубно-эндокринным генезом бесплодия уровень ТИМП-1 превышал аналогичный показатель у пациенток с трубно-перитонеальным бесплодием, однако различия не имели статистической значимости (табл. 4). Не получено существенных различий средних показателей ТИМП-1 у женщин 25-30 лет (2537,5±139,7 нг/мл) и более старшего возраста (2335,0±125,7 нг/мл), а также в зависимости от длительности бесплодия (табл. 5). В то же время при рассмотрении конкретных случаев прослеживается определенная связь уровней ТИМП-1 от тяжести и длительности бесплодия, а также от возраста.
Так, наиболее низкий показатель ТИМП-1 (1700 нг/мл) установлен у пациентки В., 30 лет, страдающей бесплодием в течение 2 лет. В анамнезе - эндометриоидная киста, НГЭ, хронический эндометрит, эктопия шейки матки. Проведены две лапароскопические операции: тубэктомия по поводу внематочной беременности слева; удаление эндометриоидной кисты, резекция яичника, коагуляция очагов эндометриоза. Попытка ЭКО и ПЭ закончилась неудачей.
Наиболее высокий уровень ТИМП-1 (2975 нг/мл) определялся у пациентки А., 35 лет, страдающей бесплодием в течение 10 лет. В анамнезе - 3 лапароскопические операции: две тубэктомии по поводу внематочных беременностей и операция по поводу спаечного процесса в малом тазу. Проведена биопсия яичника, при гистологическом исследовании диагностированы склеротические изменения стромы яичника. Операция ЭКО и ПЭ не восстановила фертильность женщины.
По всей вероятности, ТИМП-1 играет определенную роль в изменении морфост-руктуры яичника, вызывая стойкие необратимые изменения в строме, и влияет на процессы фолликулогенеза. При длительном бесплодии эти влияния ТИМП-1 усугубляются, что, видимо, уменьшает шансы на успех от проведения лечебных мероприятий и применения технологий ВРТ.
Учитывая наличие положительных и отрицательных исходов ВРТ в двух группах, проведен анализ уровня ММП-1 в ФЖ у женщин с различными исходами ВРТ (табл. 6). Эффективность ВРТ у обследованных женщин составила всего 25 %, причем положительные исходы были как в группе с трубноперитонеальным (3 женщины), так и в группе с трубно-эндокринным генезом бесплодия (2 женщины). Как видно из табл. 6, содержание ТИМП-1 у женщин с различными исходами ВРТ не отличалось друг от друга и средней величины показателя. Индивидуальные величины ТИМП-1 связаны с глубоким влиянием на структуру яичника и процессы фолликуло-генеза и зависят от других факторов.
Таблица 6
Уровни ММП-1 и ТИМП-1 в ФЖ у пациенток с разными исходами ВРТ, нг/мл
Показатель |
Средние показатели, M±m |
Положительный исход ВРТ (n=5) |
Отрицательный исход ВРТ (n=15) |
р |
ММП-1 |
4,62±1,42 (1,02-24,24) |
1,39±0,13 (1,02-1,64) |
5,70±1,84 (1,1-24,24) |
<0,05 |
ТИМП-1 |
2436,30±92,17 (1700-2975) |
2470,0±214,8 (2000-2950) |
2450,0±108,8 (1700-2975) |
>0,05 |
У пациенток с различным генезом бесплодия при положительных результатах программ ЭКО и ПЭ уровень ММП-1 в ФЖ составил 1,39±0,13 нг/мл, что в 3 раза ниже средних показателей в группе. При отрицательных результатах уровень ММП-1 достигал 5,70±1,84 нг/мл и был в 4 раза выше, чем при положительных исходах ВРТ. Содержание ММП-1, вероятно, отражает морфологические изменения в половой системе после воспалительных и эндокринных нарушений [1-4, 6, 8]. Надо полагать, что ММП-1 может рассматриваться в качестве маркера уровня деградации внеклеточного матрикса, состояния архитектоники ткани яичников, процесса фолликуло-генеза, а показатели ММП- 1 могут являться прогностическим фактором исхода ВРТ [1].
Безусловно, исследование ММП-1 следует проводить до выполнения ВРТ, пунктируя фолликулы в предыдущем цикле и оценивая прогноз планируемой технологии.
Средний возраст женщин, у которых наблюдался положительный исход программы ВРТ, составил 30,00±0,96 года, отрицательный исход - 31,00±0,64 года (р>0,05). Таким образом, возраст не оказывал влияния на результат ЭКО и ПЭ. Длительность бесплодия также существенно не отражалась на исходах ВРТ.
Известно, что экспрессия, содержание и активность металлопротеиназ регулируются половыми гормонами [1]. Эстрогены при нормальных значениях приводят к снижению уровня ММП-1, и наоборот, дефицит эстрогенов обусловливает увеличение активности ММП-1. На уровень ТИМП-1 эстрогены оказывают незначительное влияние.
Прогестерон в любых концентрациях влияет на уровни ММП-1 и ТИМП-1. При нормальных концентрациях прогестерона активность ММП-1 снижается. Однако значи- тельное повышение содержания прогестерона увеличивает активность ТИМП-1, что ведет к накоплению внеклеточного матрикса и развитию склеротических и фиброзных изменений, способствующих атрезии фолликула.
17-ОН-прогестерон и пролактин в высоких концентрациях также оказывают неблагоприятное влияние на активацию ММП-1 и ТИМП-1, нарушая метаболизм коллагена и способствуя атрезии фолликулов [1].
Нами сделана попытка анализа уровней ММП-1 и ТИМП-1 у женщин в зависимости от исходного гормонального фона и результата ВРТ. Содержание гормонов в ФЖ не определялось, поскольку было нецелесообразным после стимуляции. Данные гормональных показателей исследовались на 7-й день предыдущего менструального цикла до программы ВРТ, отражали гормональный статус женщины и использовались для заключения о патогенезе бесплодия.
Проведенный анализ гормонального фона не позволил выявить закономерного влияния содержания гормонов на исходы ВРТ, за исключением уровня прогестерона, который был достоверно выше у женщин с положительными исходами ВРТ (58,6±8,0 нг/мл) по сравнению с отрицательными (42,4±4,8 нг/мл).
Заключение. Впервые проведенное изучение металлопротеиназ в ФЖ после стимуляции фолликулогенеза показало присутствие их в ФЖ всех пациенток, причем в достаточно широком диапазоне индивидуальных показателей. В количественном отношении уровень ММП-1 оказался в 500 раз ниже, чем уровень ТИМП-1 (р>0,05). Существенные различия в содержании ММП-1 были выявлены в группах с разным генезом бесплодия. Четко прослеживалось неблагоприятное влияние длительных воспалительных заболе- ваний, при которых и индивидуальные показатели, и их средняя величина оказывались существенно выше, чем при эндокринном генезе бесплодия. Метаболические процессы под влиянием металлопротеиназ достаточно сложны и индивидуальны по своему действию Известно, что ТИМП-1 в значительной степени нивелирует неблагоприятное действие ММП-1 на клеточные процессы в яичниках. При длительных патологических процессах с участием ТИМП-1 происходит склерозирование стромы яичников, нарушение фол-ликулогенеза, что оказывает влияние на исход лечения бесплодия. Данное предположение было подтверждено результатами определения уровня металлопротеиназ при различных исходах ВРТ. Установлено, что содержание ММП-1 зависит от активности воспалительного процесса: чем сильнее воспалительный процесс в яичниках, тем выше уровень ММП-1 и тем существеннее изменены процессы метаболизма коллагена [1–3]. И наоборот, чем ниже уровень ММП-1 в ФЖ, тем благоприятней исходы ВРТ. При этом уровень ТИМП-1 в ФЖ слабо зависит от степени тяжести воспалительного процесса.
Таким образом, полученные клинические и лабораторные данные позволили получить указание на биологическую роль системы ММП-1/ТИМП-1 в развитии бесплодия. По- нимание ключевых звеньев патогенеза пролиферативных заболеваний способствует формированию базовых критериев для создания схем лечения, оказывающих целенаправленное воздействие на патологически измененные клетки-мишени, являющееся одним из ключевых моментов в подготовке к проведению ВРТ.
В клинической практике это достигается путем использования терапии, направленной на коррекцию процессов образования коллагена. В качестве такой метаболической терапии рекомендовано использование гормональных препаратов, содержащих эстрогены, прогестерон в адекватных дозах, а также назначение витаминов D, С, В (оротовая кислота), препаратов магния. Проведение противовоспалительной и иммуномодулирующей терапии способствует нивелированию неблагоприятных влияний развития патологического склерозирования при высоких концентрациях металлопротеиназ.
Надо полагать, что исследование металлопротеиназ в процессе обследования и подготовки к ВРТ является желательным, поскольку их уровень может служить прогностическим критерием исхода ВРТ или выбора срока применения этих технологий после достижения нормальных значений концентрации металлопротеиназ.
Список литературы Клиническая значимость уровней ММП-1 и ТИМП-1 в фолликулярной жидкости при различных исходах вспомогательных репродуктивных технологий
- Потеряева О.Н. Матриксные металлопротеазы: строение, регуляция, роль в развитии патологических состояний (обзор литературы). Медицина и образование Сибири. 2010; 5: 7. URL: http://elibrary.ru/download/31536996.pdf (дата обращения: 30.04.2013) DOI: 10.1189/jlb.0607338
- Кореновский Ю.В., Синельникова Л.М., Фильчакова О.Н., Шабалина Ю.В., Ершова Е.Г., Фадеева Н.И., Ельчанинова С.А. Матриксные металлопротеазы и ингибиторы матриксных металлопротеиназ при беременности и родах. Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2012; 5 (87), 2: 146-149.
- Герштейн Е.С., Кушлинский Д.Н., Адамян Л.В., Терешкина И.В., Лактионов К.П. Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы в клиническом течении и прогнозе рака яичников. Молекулярная медицина. 2013; 6: 11-20.
- Baker A.B. Metalloproteinase inhibitors biological actions fnd therapeutic opportunities. J. Cell. Science. 2002; 115: 3719-3727.
- Visse R. Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases structure, function and biochemistry. Circulation Res. 2003; 2: 827-839.
- Ярмолинская М.И., Молотков А.С., Денисова В.М. Матриксные металлопротеиназы и ингибиторы: классификация, механизм действия. Журнал акушерства и женских болезней. 2012; 1: 113-125.
- Zhou H.Y., Wong A.S. Activation of p70S6 K induces expression of matrix metalloproteinase 9 associated with hepatocyte growth factor-mediated invasion in human ovarian cancer cells. Endocrinology. 2006; 147 (5): 2557-2566.
- Jokimaa V.A. Аltered expression of genes involved in the production fnd degradation ofendometrial extracellular matrix in patiets with unexplained infertility and recurrent miscarriages. Human reproduction. 2002; 12: 1111-1116.
- Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С. Исследование матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в опухолях и периферической крови онкологических больных. Клинические перспективы. Лабораторная служба. 2013; 1: 25-38.
- Юлдашева Д.Ю. Роль матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов при развитии гиперплазии эндометрия. Фундаментальные исследования. 2015; 1 (4): 845-847.
- Гасанов А.Г., Бершова Т.В. Роль изменений внеклеточного матрикса при возникновении сердечнососудистых заболеваний. Биомедицинская химия. 2009; 55 (2): 155-168.
- Тепляков А.Т., Адриянова А.В., Пушникова Е.Ю., Суслова Т.Е., Никонова Е.С., Конаков С.Н., Родионова О.А., Кузнецова А.В., Протопопова Н.В. Тканевой ингибитор матриксных металлопротеиназ-1 (ТИМР-1) как независимый маркер ишемического ремоделирования миокарда при хронической сердечной недостаточности. Сибирский медицинский журнал. 2014; 29 (2): 28-34.
- Vu T.H., Werb Z. Matrix metalloproteinases effectors of development fnd normal physiology. Genes Fadeeva N. And. Yelchaninova S. A & Development. 2000; 14: 219-226.
- Natoli A.K. Sex steroids modulate human aortic smooth muscle cell matrix protein deposition and matrix metalloproteinase expression. Hypertension. 2005; 46: 1129-1134.