О перспективе коррекции синдрома посттравматических стрессорных расстройств обогащенными ресвератролом продуктами питания

Актуальность проблемы

В настоящее время со стороны исследователей нарастает интерес к ресвератролу как к адаптогену, способному эффективно корригировать повреждения различных органов и тканей [1]. Более того, в экспериментальных исследованиях выявлена способность ресвератрола увеличивать продолжительность жизни лабораторных животных [3]. Столь многоплановое действие ресвератрола в значительной степени связано с его антиоксидантным действием [2]. Синдром посттравматических стрессорных расстройств (ПТСР) развивается как отдаленное последствие перенесенной психологической травмы и характеризуется нарушениями психического здоровья, которое отягощено развитием психосоматической патологии. Среди сцепленных с ПТСР болезней присутствуют заболевания сердечно-сосудистой системы, сахарный диабет, метаболический синдром и т. д. [6]. ПТСР характеризуется устойчивостью к действию лекарственных препаратов. Поэтому для эффективной коррекции

ПТСР требуются новые немедикаментозные подходы, включающие в себя гипоксические тренировки, умеренные физические нагрузки и функциональные продукты питания. Известно, что ресвератрол преимущественно содержится в различных сортах красного вина [4]. Безусловно, для применения ресвератрола в медицинских целях требуется включение его в другие продукты питания с сохранением его усвояемости для организма. Поэтому целью данной работы являлась проверка способности ресвератрола, внесенного в состав хлебопродуктов, корригировать экспериментальное ПТСР.

Материалы и методы

Исследование выполнено на 32 половозрелых беспородных самцах крыс. Все экспериментальные процедуры проводили в соответствии с регламентом Декларации ЕС от 2010 г. об использовании лабораторных животных.

Были сформированы четыре группы животных: 1-я — «интактные животные», 2-я — «ПТСР», куда входили крысы, подвергавшиеся воздействию запаха хищника (кошачьей мочи, предаторный стресс) в течение 10 суток по 10 мин ежедневно, с последующим содержанием в стандартных условиях; 3-я — «ресвератрол», состоящая из животных, в рацион которых на протяжении всего эксперимента входили продукты обогащенные ресвератролом; 4-я — «ПТСР + ресвератрол», состоящая из животных, испытывавших пре-даторный стресс (10 дней по 10 мин) и одновременно получавших продукты, обогащенные ресвератролом, в течение всего времени эксперимента.

Сухой стандартизованный экстракт кожицы черного винограда (Beldzer, Германия; страна происхождения сырья — Китай), содержащий 98,2 % ресвератрола (ВЭЖХ), растворяли в 96%-м этиловом спирте до конечной концентрации 20 мг/мл. На заранее подготовленные снеки вносили по 100 мкл растворенного ресвератрола и оставляли на 30 мин в темном месте для испарения спирта. Снеки с ресвератролом раздавали группам «ресвератрол» и «ПТСР + ресвератрол», каждому животному индивидуально в течение всего периода эксперимента.

Для выявления поведенческих проявлений развития ПТСР животных в конце эксперимента тестировали в «приподнятом крестообразном лабиринте» (ПКЛ), где регистрировали время нахождения в открытых и закрытых рукавах в течение 600 с.

В сыворотке крови оценивали уровень кортикостерона, АКТГ, адреналина, кортизола используя им-муноферментные наборы Cloud-Clone Corp (США), и 6β-гидроксикортикостерона BlueGene Biotech (Китай).

Результаты и обсуждение

Установлено, что через 14 дней после завершения предаторного стресса у беспородных крыс наблюдались признаки повышенной тревожности, которые выражались в увеличении времени пребывания в темных рукавах лабиринта и сниже- ния времени пребывания в светлых рукавах. Так, в контроле время пребывания в темных рукавах составило 393,3 ± 27,8 с (n = 6), а в открытых — 206,7 ± 39,45 с (n = 6). У стрессированных животных время пребывания в темных рукавах повысилось на 20 % и составило 474,0 ± 37,9 с (n = 8; p < 0,05). Соответственно, время пребывания в светлых рукавах снизилось на 40 % и составило 126,00 ± 31,33 с (n = 8; p < 0,05). Ресвератрол сам по себе не оказывал статистически значимого влияния на показатели тревожности. В этой группе время пребывания в закрытых рукавах составило 423,5 ± 78,8 с (n = 10), а в открытых — 176,5 ± 69,6 с (n = 10). У стрессированных животных введение ресвератрола ограничило выраженность тревожности и расстройств. Так, в группе «ПТСР + ресвератрол» по сравнению с группой «ПТСР» время пребывания в закрытых рукавах снижено на 35 % и составило 308,25 ± 33,85 с (n = 10; p < 0,05), а в открытых рукавах повышено в 2,3 раза и составило 291,75 ± 39,45 с (n = 10; p < 0,01). Таким образом, потребление обогащенных ресвератролом продуктов питания способствует нормализации характерных для ПТСР поведенческих расстройств тревожного характера.

Как видно из таблицы ниже, в условиях ПТСР наблюдалось снижение содержания АКТГ. При этом содержание кортикостерона в крови оставалось повышенным, что говорит о повышенном уровне чувствительности адренокортикоцитов пучкового слоя к стимулирующему действию АКТГ. Одновременно наблюдалось повышение содержания 6β-гидроксикортикостерона в плазме крови, являющегося продуктом метаболизма глюкокортикоидов через изоформу цитохрома Р450-CYP3A. О стимуляции при ПТСР мозгового слоя надпочечников свидетельствует повышенный уровень адреналина в крови. У нестрессированных животных потребление про-

Показатели эндокринного статуса животных, подверженных ПТСР до и после коррекции ресвератролом

Примечания

Данные представлены в виде средней арифметической величины и стандартного отклонения (M ± SD).

* Статистически значимые различия по сравнению с контролем, p < 0,05.

# Статистически значимые различия между «ПТСР» и «ПТСР + ресвератрол», p < 0,05.

дуктов питания, обогащенных ресвератролом, приводило к снижению уровня АКТГ при повышенном уровне кортизола. Таким образом, для ресвератрола также характерно повышение чувствительности клеток пучковой зоны надпочечников к стимулирующему действию АКТГ. При этом ресвератрол ограничивает у нестрессированных животных секрецию адреналина. У стрессированных животных потребление продуктов питания, обогащенных ресвератролом, приводило к существенной коррекции характерного для ПТСР эндокринного статуса. Так, в группе «ПТСР + ресвератрол» по сравнению с группой «ПТСР» повышено содержание АКТГ и снижено содержание кортикостерона при одновременном уменьшении уровня 6β-гидроксикортикостерона. Последнее свидетельствует о способности пищевых продуктов, обогащенных ресвератролом, отменять характерную для ПТСР десенситизацию адрено-кортикоцитов к стимулирующему действию АКТГ. Одновременно в группе «ПТСР + ресвератрол» по сравнению с группой «ПТСР» снижалось содержание 6β-гидроксикортикостерона, что свидетельствует об отмене характерной для ПТСР активации тканевого обмена глюкокортикоидов. Кроме того, потребление продуктов питания, обогащенных ресвератролом, отменило характерное для ПТСР повышение концентрации адреналина в крови.

Полученные результаты хорошо согласуются с данными Li и соавт. о способности ресвератрола корригировать тревожные расстройства при ПТСР [5]. В этих исследованиях показано, что транс-ресвератрол в дозах 10, 20 и 40 мг/кг оказывал реверсивное действие на вызванное экспериментальными ПТСР повышение значений показателей, характеризующих тревожность в тесте «крестообразный лабиринт». Реверсивное действие ресвератрола также касалось значения времени «замораживания» в контекстной парадигме страха. Поведенческие эффекты ресвератрола на экспериментальной модели ПТСР сопровождались повышением значения индекса надпочечников и концентрации кортикотропин-рилизинг-факто-ра (CRF), а также повышением дифференциальной экспрессии глюкокортикоидного рецептора (GR) в гипоталамусе, гиппокампе и миндалине. Нейробиологические исследования показали, что транс-ресвератрол усиливал фосфорилирование уровней белка, связывающего элемент ответа цАМФ (pCREB), и уровней нейротрофического фактора, происходящего из мозга (BDNF), которые были снижены у крыс, подвергшихся воздействию TDS. Эти результаты показывают, что трансресвератрол защищает нейроны от стрессовых воздействий, подобных ПТСР, путем регуляции функции оси L-HPA и активации нижестоящих нейропротективных молекул, таких как экспрессия pCREB и BDNF. Новизна наших исследований заключается в том, что они демонстрируют наличие протекторного действия пищевых продуктов, обогащенных ресвератролом, что открывает перспективы разработки новых ресвератрол-обогащенных продуктов питания для коррекции ПТСР.