Определение фактора некроза опухоли альфа, интерлейкина-6 и интерлейкина-4 в содержимом кист придатка яичка

Одной из актуальных проблем современной урологии и андрологии является изучение диагностической значимости кистозных образований придатка яичка Существует несколько теорий, объясняющих этиологию и патогенез данного заболевания, где была изучена роль гормональных дисрегуляторов (диетилстилбестрол) стеноза эпидидимального протока,перенесенных воспалительных заболеваний, а также травмы органов мошонки [1-3]. Кисты придатка яичка относятся к категории доброкачественных образований, которые выстланы изнутри цилиндрическим эпителием и содержат элементы семенной жидкости, сперматоциты и сперматозоиды [4–6].

По данным различных авторов частота встречаемости кистозных образований придатка яичка составляет 14,4–16,2% среди всех заболеваний органов мошонки Стоит отметить, что в 70,5% случаев они обнаруживаются случайно при выполнении ультразвукового исследования (УЗИ) и в 35–62% случаях могут сопровождаться болевым симптомом при пальпации [6-10]. Является актуальным изучение влияния кистозных образований придатка яичка на количественные и качественные показатели эякулята [9, 10].

Несмотря на то, что хорошо изучена проблема определения уровня цитокинов в сыворотке крови при различных воспалительных заболеваниях, нет достаточных данных, свидетельствующих о значимости оценки цитокинов при урологических заболеваниях Имеются лишь отдельные исследования, указывающие на то, что местная продукция про- и противовоспалительных цитокинов участвуют в образовании эпидидимальных кист [11].

Учитывая это, а также тот факт, что в Кыргызской Республике не уделяется должного внимания данной проблеме, определена актуальность проводимого исследования, целью которого явилось оценка значимости определения интерлейкина-6, интерлейкина-4 и фактора некроза опухоли альфа в жидкости кист придатка яичка.

В данной научной работе произведено исследование про- и противовоспалительных цитокинов, а именно определение уровня фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-альфа), интерлейкина-4 (ИЛ–4), интерлейкина-6 (ИЛ–6) в содержимом кист придатка яичка. По данным литературы в эякуляте пациентов, страдающих бесплодием, содержится большое количество цитоки-нов,причем концентрация некоторых из них значительно превышают концентрацию последних в сыворотке крови (ИЛ–6, ФНО – альфа) [12, 13]. Это позволяет предположить, что цитокины могут оказывать негативное влияние на сперматогенез [14, 15]. В частности, фактор некроза опухоли альфа и ИЛ-6 может негативно влиять на подвижность сперматозоидов,что в свою очередь, может приводить к снижению мужской фертильности. Доказан тот факт, что наличие ФНО-альфа в семенной жидкости свидетельствует о наличии бессимптомного воспаления в мужских половых железах. Полученные данные свидетельствуют о том, что мужское бесплодие может быть связано с повышенным уровнем ИЛ–6 и ФНО-альфа [16]. Содержание ИЛ–4 также тесно связано с мужской репродуктивной функцией, влияя на оплодотворяющую функцию сперматозоидов [17].

В доступных научных публикациях имеются единичные указания на изучение состава содержимого кист придатка яичка и при этом не уделялось должного внимания оценке воспалительного фактора [11].

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В исследование были включены данные 116 пациентов, которые обратились в Республиканский научный центр урологии при Национальном госпитале Министерства здравоохранения Кыргызской Республики с клиническим диагнозом киста придатка яичка в период с 2017 по 2020 гг. У всех исследуемых пациентов проводился сбор анамнестических данных,выполня-лись общие и биохимические исследования крови. Исследование гормонального профиля проводилось с использованием тест-системы производства «Human» методом иммуноферментного анализа в соответствии с инструкцией фирм-производителей, а также всем пациентам выполнялось ультразвуковое исследование органов мошонки. Метод определения цитокинов в кистозной жидкости придатка яичка был основан на «сэндвич» варианте твердофазного иммунофермент-ного анализа с применением моно-и поликлональных антител к ФНО-альфа, ИЛ-4 и для ИЛ-6. Для определения концентраций ФНО-альфа, ИЛ-4 и ИЛ-6 использовали коммерческие тест системы «Вектор Бест» Полученные данные статистически обработаны в программе SPSS.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Средний возраст исследуемых составлял 33 ± 5 года. Согласно опросу, пациенты предъявляли следующие жалобы:

• •    дискомфортные ощущения при половом акте в 6,8% (n=8) случав;

• •    ощущение инородного тела в области мошонки – 13,7% (n=16);

• •    боль в области мошонки – 31,2% (n=36);

• •    асимметрия мошонки – 4,3% (n=5);

• •    мужское бесплодие – 20,6% (n=24).

В 23,4% (n=27) случаев заболевание было диагностировано случайно при проведении осмотра (табл.1).

При выполнении УЗИ органов мошонки у 18 (15,8%) пациентов на стороне кистозного образования отмечалась гипертрофия головки придатка яичка средний размер которого был равен 20 х 18 мм, а средний размер контралатерального придатка яичка – 10 х 12 мм. Средний размер кист придатка яичка составил 30 ± 0,5 мм. У 54 (46,5%) исследуемых диагностирована киста придатка правого яичка и у 62 (52,4%) – придатка левого яичка. У 30 (25,8%) больных отмечалось двухстороннее поражение.Единичные кисты придатка яичка были отмечены у 94 (81,0%) пациентов а множественные (2 и более) – у 22 (19%). В зависимости от анатомической области придатка яичка, в 83,5% (n=96)случаев кистозное образование располагалось в области головки придатка, что вероятнее всего было связано с частой травматизацией данного отдела.В области тела придатка у 7 (5, 5%) пациентов и в хвостовой части придатка яичка – у 13 (11%) (табл. 2).

По данным клинического анализа крови, средние показатели лейкоцитов у исследуемых составил 4,5±1,5•10 ⁹ г/л, средние значений лейкоцитов по данным общего анализа мочи составляет 6,3±1,5 в поле зрения, что свидетельствует об отсутствии лабораторных признаков инфекционно-воспалительного процесса.

По результатам оценки гормонального профиля сыворотки крови, средний уровень фолликулостимулирующего гормона составил 3,5±1,5 МЕ/л, лютеинизирующего гормона 4,27±1,5 МЕ/л, общего тестостерона 17±2 нмоль/л, пролактина 280±15,0 МЕ/л (табл. 3).

Таблица 1. Причины обращения пациентов к урологу Table 1. Reasons for referring patients to a urologist

Жалобы Complaints	Число больных (абс.) Number of patients (abs.)
Дискомфорт при половом акте Discomfort during intercourse	8
Ощущение инородного тела в области мошонки Feeling of a foreign body in the scrotum	16
Боль в области мошонки Pain in the scrotum	36
Асимметрия мошонки Scrotal asymmetry	5
Мужское бесплодие Male infertility	24
Киста случайно выявленна при осмотре The cyst accidentally revealed when viewed	24

Таблица 2. Локализация кист в зависимости от анатомической области придатка яичка Table 2. Localization of cysts depending on the anatomical region of the epididymis

Локализация кисты Localization of cysts	Число больных (абс.) Number of patients (abs.)
Головка придатка яичка Head of the epididymis	96
Тело придатка яичка Body of epididymis	7
Хвост придатка яичка The tail of the epididymis	13

Таблица 3. Гормональный профиль пациентов с кистозными образованиями придатка яичка

Table 3. Hormonal profile of patients with epididymal cystic formations

Показатели Indicators	Средние показатели Average indicators
Лютеинизирующий гормон, МЕ/л Luteinizing hormone, IU / L	4,27 ± 1,5
Фолликулостимулирующий гормон, МЕ/л Follicle-stimulating hormone, IU / L	3,5 ± 1,5
Пролактин, МЕ/л Prolactin, IU / L	280 ± 15,0
Общий тестостерон, нмоль/л Total testosterone, nmol / l	17 ± 2

При исследовании состава содержимого кист придатка яичка, полученного при оперативном иссечении у 82 (70,6%) пациентов были обнаружены сперматозоиды у 34 (29,4%) содержимое было представлено транссудатом без сперматозоидов.

Следующим этапом произведено исследование кистозной жидкости придатка яичка на наличие про- и противовоспалительных цитокинов,а именно ФНО-альфа, ИЛ-4 и ИЛ-6. Нормативный показатель ФНО-альфа составляет менее 6 пг/мл, для ИЛ-6 – менее 10 пг/мл, а для ИЛ-4 – менее 4 пг/мл. При обследовании у всех 116 пациентов отмечается повышение уровней про- и противовоспалительных цитокинов независимо от наличия или отсутствия сперматозоидов в кистозной жидкости. Как показано в таблице 4 у исследуемых пациентов при наличии сперматозоидов в транссудате среднее значение для ИЛ-6 составляет 15 ± 1,5 пг/мл среднее значение для ФНО-альфа составляет 37 ± 1,7 пг/мл, среднее значение для ИЛ-4 составляет 16 ± 1,9 пг/мл, у исследуемых с транссудатом среднее значение для ИЛ-6 составляет 14 ± 1,3 пг/мл, среднее значение для ФНО-альфа составляет 35 ± 1,5 пг/мл, среднее значение для ИЛ-4 составляет 15 ± 1,7 пг/мл (табл. 4).

Повышение значений ФНО-альфа, ИЛ-6 и ИЛ-4 в содержимом кист придатка яичка может свидетельствовать об иммунологической активации организма Учитывая тот факт, что по данным клинического анализа крови и в общего анализа мочи показатель уровня лейкоцитов регистрировался в пределах нормативных значений,то подтвержденное повышение показателей исследуемых цитокинов свидетельствует о наличии асептического воспалительного процесса непосредственно в оболочке кист. Полученные данные могут свидетельствовать о том, что местная продукция цитокинов может принимать участие в формировании кист придатка яичка.

Таким образом, учитывая наличие лабораторных признаков асептического воспаления, всем прооперированным пациентам, при отсутствии заболеваний со стороны желудочно-кишечного тракта проводилась противовоспалительная терапия препаратами из группы НПВС (ацеклофенак) в таблетированной форме в дози- ровке 100 мг 2 раза в сутки до 7 дней. Все обследованные пациенты выписались благополучно с улучшением.

ОБСУЖДЕНИЕ

Кисты придатка яичка представляют с собой однокамерные или многокамерные мультилокулярные жидкостные образования в придатке яичка. Клинически киста представляют округлое, тонкостенное доброкачественное образование. Жидкость кисты придатка яичка представлена обычным транссудатом и элементами семенной жидкости. По нашим данным у всех исследуемых пациентов наблюдался повышение показателей ФНО-альфа, ИЛ-6 и ИЛ-4 в кистозной жидкости придатка яичка, которая свидетельствуют, что местная продукция про- и противовоспалительных цитокинов участвуют в образовании эпидидимальных кист, данные сопоставимы с работами других авторов [11, 18] Отличительной особенностью представленной научной работы от других, заключается в том, что проведено исследование не только провоспалительных но и противовоспалительных цитокинов. Показано повышение уровня средних показателей ИЛ-4, что свидетельствует в подавлении секреции макрофагами медиаторов про-воспалительных цитокинов а также ограничения воспалительного ответа, регулируя, таким образом тяжесть повреждения тканей.

ВЫВОДЫ

Опираясь на полученные данные, возможно предположить, что местная продукция провоспалительных цитокинов может играть активную роль в формировании кист придатка яичка. В свою очередь, повышение уровня про- и противовоспалительных цитокинов таких как ФНО-альфа, ИЛ-4 и ИЛ-6, подтверждает наличие асептического воспалительного процесса и может определять необходимость проведения противовоспалительной терапии.Стоит отметить,что необходимо продолжить проведение дальнейших исследований с включением большего количества пациентов.

Таблица 4. Средние показатели повышения ФНО-альфа, ИЛ-4 и ИЛ-6 в содержимом кист придатка яичка Table 4. Average indices of increased TNF-alpha, IL-4 and IL-6 in the contents of the cysts of the epididymis

Наименование исследования Research name	Нормативный показатель Standard indicator	Киста придатка яичка, содержащая сперматозоиды в транссудате Epididymal cyst containing sperm in transudate	Киста придатка яичка, содержащая транссудат без сперматозоидов Epididymal cyst containing transudate without sperm
Фактор некроза опухоли альфа, пг/мл Tumor necrosis factor alpha, pg/ml	< 6,0	37 ± 1,7	35 ± 1,5
ИЛ-4, пг/мл IL-4, pg/ml	< 4,0	16 ± 1,9	15 ± 1,7
ИЛ-6, пг/мл IL-6, pg/ml	< 100	15 ± 1,5	14 ± 1,3
р			< 0,05