Оптимизация условий получения плазмидной ДНК E. coli с фрагментами генов, кодирующих иммунодоминантные белки вируса АЧС
Автор: Бадамшин А.Д., Закирова Е.Ю., Галеева А.Г., Ефимова М.А., Мингалеев Д.Н., Ризванов А.А., Равилов Р.Х.
Статья в выпуске: 1 т.249, 2022 года.
Бесплатный доступ
Африканская чума свиней (АЧС) ввиду своей контагиозности и летальности вызывает серьёзные опасения в отношении благополучия мировой свиноводческой отрасли. Успешному предотвращению и ликвидации АЧС препятствует множество факторов, включая глобализированный характер животноводства и отсутствие средств специфической профилактики. Разработка эффективных мер противодействия АЧС имеет важное значение в борьбе с нынешними эпидемиями и связанными с ними торговыми ограничениями. Особый интерес представляет поиск антигенов вируса АЧС, способных обеспечить формирование протективного иммунитета. В настоящем исследовании проведён скрининг и отбор генов, кодирующих высококонсервативные иммунодоминантные белки вируса АЧС, проведён их филогенетический анализ, оптимизированы условия клонирования генов и культивирования трансформированных E. Coli c целью наработки плазмидных ДНК в препаративных количествах. Предлагаемые нами подходы позволяют получить очищенные препараты плазмидных ДНК в достаточных количествах для дальнейшей сборки векторов на основе аденоассоциированного вируса (ААВ), что, в свою очередь, ляжет в основу эффективной и безопасной стратегии создания кандидатной вакцины против АЧС. Учитывая свойства рассматриваемых белков, можно предположить, что вакцина, впоследствии разработанная на основе комплекса антигенов p72, pp60, p54, p30, может быть применима не только на территории Российской Федерации, но и на территориях соседних стран Восточной Европы.
Вирус африканской чумы свиней, протективные антигены, клонирование генов
Короткий адрес: https://sciup.org/142234655
IDR: 142234655 | DOI: 10.31588/2413_4201_1883_1_249_23
Список литературы Оптимизация условий получения плазмидной ДНК E. coli с фрагментами генов, кодирующих иммунодоминантные белки вируса АЧС
- Великов, В. А. Молекулярная биология: практическое руководство / В. А. Великов. – Саратов, 2013. – 84 с.
- Иматдинов, А. Р. Экспрессия рекомбинантных генов, кодирующих фрагменты протективно значимых белков вируса африканской чумы свиней, в эукариотических клетках / А. Р. Иматдинов, А. Д. Середа, И. Р. Иматдинов и др. // Сельскохозяйственная биология. – 2016. – Т. 51, № 6. – С. 837-844. – https://doi.org/10.15389/agrobiology.2016.6.837rus.
- Казакова, А. С. Конструирование продуцентов рекомбинантных белков P72, P30 и P54 вируса африканской чумы свиней [Текст]: автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук (03.02.02) / Казакова Анна Сергеевна // ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии. – Покров, 2013. – 24 с.
- Колбасов, Д. В. Африканская чума свиней: создание вакцины актуально / Д. В. Колбасов // Животноводство России. – 2020. – № 7. – С. 29-33. – https://doi.org/10.25701/ZZR.2020.48.46.008.
- Колоскова, Е. М. Выделение и очистка плазмидной ДНК из трансформированных штаммов E. Coli DH5A и TG1 / Е. М. Колоскова,В. А. Езерский // Проблемы биологии продуктивных животных. – 2019. – № 4. – С. 105-112. – https://doi.org/10.25687/1996-6733.prodanimbiol.2019.4.105-112.
- Мазлум, А. Клонирование генов, кодирующих трансмембранные белки и белки, ответственные за вирулентность вируса африканской чумы свиней / А. Мазлум, Н. Г. Зиняков, А. С. Иголкин, Н. Н. Власова // Ветеринария сегодня. – 2018. – № 2 (25). – С. 3-7. – https://doi.org/10.29326/2304-196X-2018-2-25-3-7.
- Маниатис, Т. Методы генетической инженерии / Т. Маниатис, Э. Фрич, Дж. Сэмбрук // Молекулярное клонирование. – Москва: Мир, 1984. – 479 с.
- Нефедьева, М. В. Анализ иммуномодулирующих белков вируса африканской чумы свиней / М. В. Нефедьева, И. А. Титов, К. А. Мима, А. С. Малоголовкин // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. – 2019. – № 1. – С. 42-48. – https://doi.org/10.17116/molgen20193701142.
- Шарыпова, Д. В. Усовершенствование методов получения антигена вируса африканской чумы свиней для серологических исследований: дисс. … канд. вет. наук: 06.02.02. / Д. В. Шарыпова // ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных», Владимир, 2019. – 123 с.
- Щербаков, А. В. Клонирование и экспрессия в E. Coli генов К205R и B602L вируса африканской чумы свиней / А. В. Щербаков, А. С. Яковлева, А. М. Тимина, М. Р. Якупов // Ветеринария сегодня. – 2015. – № 2. – С. 27-31.
- Andres, G. African Swine Fever Virus Protease, a New Viral Member of the SUMO-1-specific Protease Family / G. Andres, A. Alejo, C. Simon-Mateo, M. L. Salas // Journal of Biological Chemistry. – 2001. – № 276 (1). – P. 780-787. – https://doi.org/10.1074/jbc.M006844200.
- Cohen, S. N. Nonchromosomal Antibiotic Resistance in Bacteria: Genetic Transformation of Escherichia Coli by R-Factor DNA / S. N. Cohen, A. C. Y. Chang, L. Hsu // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 1972. – № 69 (8). – P. 2110-2114. – https://doi.org/10.1073/pnas.69.8.2110.
- Chen, W. A. Seven-gene-deleted African swine fever virus is safe and effective as a live attenuated vaccine in pigs / W. Chen, D. Zhao, X. He [et al.] // Sci China Life Sci. – 2020. – № 63(5). – P. 623-634. – https://doi.org/10.1007/s11427-020-1657-9.
- Jia, N. Roles of African Swine Fever Virus Structural Proteins in Viral Infection / N. Jia, Yu. Ou, Z. Pejsak [et al.] // J. Vet. Res. – 2017. – № 61(2). – P. 135–143.–https://doi.org/10.1515/jvetres-2017-0017
- Lokhandwala, S. Adenovirusvectored African swine fever virus antigen cocktails are immunogenic but not protective against intranasal challenge with Georgia 2007/1 isolate / S. Lokhandwala, V. Petrovan, L. Popescu [et al.] // Vet Microbiol. – 2019. – V. 235. – P. 10-20. – https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2019.06.006
