Особенности клинических проявлений и диагностики метэструсассоциированного сахарного диабета у собак

Актуальность исследования. Рост случаев сахарного диабета, как в гуманной, так и в ветеринарной медицине, а также осложнения вызываемые данным заболеванием представляет большой интерес для исследователей [1, 8, 10, 11]. Метэструсассоциированный сахарный диабет занимает особое место в развитии патологии углеводного обмена собак [3-7, 10, 11]. Это нарушение отмечают у взрослых сук в период метэструса и реже во время беременности, чему способствует повышенная продукция прогестерона, инсулиноподобного фактора роста 1, гормона роста и ряда других, что приводит к снижению чувствительности клеток к инсулину [10,11]. У собак с метэструсассоциированным диабетом значительно повышается вероятность возникновения устойчивого сахарного диабета в следующей фазе полового цикла [11]. Данное состояние характеризуется серьезными изменениями в организме самки и приводит к формированию тяжелых осложнений в функции печени и почек [3]. Своевременное выявление и правильно построенный план лечения позволяют улучшить клинический статус больных собак, а в ряде случаев достичь полного выздоровления [4].

Цель работы заключалась в изучении клинико-лабораторных изменений происходящих в организме сук при развитии метэструсассоциированного сахарного диабета.

Материалы и методы . Исследования проведены на кафедре акушерства, хирургии и незаразных болезней животных ФГБОУ ВПО «Ивановская ГСХА имени академика Д.К. Беляева» в лечебнопрофилактическом и лабораторнодиагностическом ветеринарном центре «Ветасс» в период с 2007 по 2015 годы.

В настоящее исследование включено 25 собак, с впервые установленным диагнозом метэструсассоциированный сахарный диабет. Установление клинического статуса у заболевших проведено на основании анамнестических, клинических, лабораторных и инструментальных методов исследования. Критериями включения в группу исследования являлись клинические (полидипсия, полиурия, снижение массы тела) и лабораторные (гипергликемия, глюкозурия) признаки сахарного диабета, а также время возникновения заболевания – период метэструса, который устанавливали по данным анамнеза и определению уровня прогестерона (≤ 6,36 нмоль/л). Ультразвуковое исследование брюшной полости выполнено аппаратом «Сономед – 500» (Россия); гематологические показатели (лейкоциты, тромбоциты, эритроциты, гемоглобин, гематокрит) определены на автоматическом гематологическом анализаторе PСЕ-90Vet(HTI, США); биохимические показатели (глюкоза, общий белок, альбумин, мочевина, креатинин, билирубин, лактат, калий, хлориды, натрий, активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), γ-глутамилтрансферазы) – на полуавтоматических биохимических анализаторах BioChem ВA (США) иBA-88A (Китай), триглицериды и холестерин – на анализаторе «Сапфир» (Япония), с набором реактивов фирмы «Хьюман», инсулин – методом иммуноанализа (лаборатория «Инвитро»); антиоксидантный статус – с использованием тестов Randox TAS, (производитель Randox Laboratories Ltd); малоновый диальдегид - методом Л. И. Андреевой (1988); прогестерон – радиоиммунохимическим методом на аппарате «Нарко Тест» с набором фирмы BECKMANCOULTERCOMPANYIMMUNO TECH (Прага), двенадцатиканальном гамма-счетчике (радиоизотопная лаборатория МУЗ ГКБ №4 г. Иваново), результаты обрабатывали на программном обеспечении для радиоиммунохимических исследований «Микрогамма» 2001 г., версия 9.10.

Результаты и их обсуждение . У сук, поступивших в клинику, в анамнезе выявлено наличие течки более месяца назад; отмечены полиурия и полидипсия, сухость слизистых оболочек, вялость и сонливость у 100% животных, рвота у 64% (16 гол.), диарея у 52% (13 гол.), снижение тургора кожи у 92% (23 гол.).

При пальпации брюшной стенки самки проявляли беспокойство. Выявлено выраженное напряжение мышц брюшной стенки. Ультразвуковым исследованием органов брюшной полости установлено наличие эхоструктурных изменений печени по типу хронического гепатита у 48% (12

гол.), признаки стеатогепатоза у 40% (10 гол.), кисты яичников и железистокистозная гиперплазия эндометрия у 20% (5 гол.), признаки нефропатии и пиелонефрита у 52% (13 гол.) самок. Клинический анализ крови собак с метэструсассоциированным сахарным диабетом показал, что содержание лейкоцитов и тромбоцитов было 10,46±1,39( х 10 9 /л) и 280,74±45,08( х 10⁹/л) соответственно, эритроцитов – 5,98±0,99(х10¹²/л), гемоглобина –116,38±5,24 г/л, гематокрит – 35,9±0,87(%), что не выходило за рамки референс-величин, установленных в лечебно-профилактическом и лабораторнодиагностическом ветеринарном центре «Ветасс» (р≤0,01).

Данные биохимических исследований сыворотки крови приведены в таблице 1. В ходе анализа данных установлено повышение содержания креатинина, мочевины, общего билирубина и лактата на

50,4; 45,8; 7,6 и 20,5%, соответственно. Полученные данные объективно указывают, что для метэструсассоцированного сахарного диабета характерно увеличение уровней мочевины и креатинина, что отражает функциональную недостаточность почек у данной группы больных. Данные нарушения возникают в следствии преренальных и ренальных расстройств. Уровень лактата характеризуетгипоперфузию тканей, что свою очередь ухудшает функциональное состояние печени и почек. Увеличение уровней щелочной фосфатазы и АЛТ в 5,50 и 1,83 раза соответственно отражает выявленные при ультразвуковом исследовании перерождение паренхимы печени, нарушение ее синтетической функции и неспособности превращать значительную часть молочной кислоты в гликоген.

Таблица 1 - Биохимические показатели крови собак с метэструсассоциированным сахарным диабетом, n = 25, M±m

Показатель	Норма по М.Филиппову (2001)	Единицы измерения	Собаки с метэтрусассоциированным сахарным диабетом
Общий белок	54,0…77,0	г/л	69,47±1,64
Альбумин	25,0…37,0	г/л	28,99±3,49
Креатинин	35,0…133,0	мкмоль/л	199,99±56,07
Мочевина	4,3…8,9	ммоль/л	12,98±1,26
Глюкоза	3,3…6,0	ммоль/л	29,65±6,37
Билирубин общий	0…7,5	мкмоль/л	8,07±4,65
Аланинаминотрансфераза	10,0…55,0	МЕ/л	100,78±20,43
Щелочная фосфатаза	10,0…150,0	МЕ/л	826,3±153,6
γ-глутамилтрансфераза	1,0…10,0	МЕ/л	6,09±0,99
Лактат	0,5…2,2	ммоль/л	2,65±0,22

Повышение концентрации триглицеридов в 5,8 раза и холестерола в 1,3 раза наряду (рис.) с глюкозой (табл. 1), превышающей верхнюю границу нормы в 4,94 раза, а почечный порог – в 2,97 раза, установленные у пациентокотражают процессы активации глюконеогенеза и липолиза [9].

У больных собак выявлены нарушения обмена электролитов (табл. 2), которые проявились в снижении уровня калия на 6,84% и хлоридов на 3,51%, при этом натрий-калиевый коэффициент составил 40,3, что, по-видимому, связано с патологическими потерями (рвота, диарея).

Рисунок - Содержание триглицеридов и холестерола в сыворотке крови у собак с метэструсассоциированным сахарным диабетом

Таблица 2 - Показатели электролитов в крови собак с метэструсассоциированным сахарным диабетом, n = 25, M±m

Показатель	Референтные значения	Единицы измерения	Собаки с метэтрусассоциированным сахарным диабетом
Натрий	135,0…147,0	ммоль/л	142,69±1,75
Калий	3,8…5,8	ммоль/л	3,54±0,22
Хлориды	105,0…122,0	ммоль/л	101,31±1,70
Скорректированный натрий	140,0…150,0	ммоль/л	149,14±1,57

В патогенезе сахарного диабета, по определению ВОЗ, лежит абсолютный или относительный недостаток инсулина в организме, вызывающий нарушение обмена веществ и патологические изменения в различных органах и тканях [12].

Экспертиза гормонального фона показала, что у сук с метэструсассоциированным сахарным диабетом количество прогестерона составило 32,12±5,91 нмоль/л, что в свою очередь соответствовало стадии метэструса и способствовало блокированию рецепторов инсулина с формированием инсулинрезистентности у сук, так как прогестерон блокирует собственный инсулин, тем самым нарушая нормальную регуляцию содержания глюкозы. При этом концентрация инсулина в сыворотке крови так же находилась в пределах физиологической нормы – 6,56±0,49 мкМЕ/мл.

Изучение особенностей течения адаптационных процессов организма животных при комбинации нескольких факторов     риска,     в     частности метэструсассоциированного     сахарного диабета, сопровождающегося сдвигом ряда биохимических     констант,     требует установления их антиоксидантного статуса [2]. Исследованиями установлено, что малоновый диальдегид находился на уровне 2,34 ± 0,09 мкмоль/л, то есть приблизился к нижней     границе     физиологически допустимого значения,    а общая антиоксидантная активность (ОАА) снизилась на 15,38% и составила 1,1 ±

0,029ммоль/л. Полученные данные в совокупности с изменением активности ферментов указывают на развитие окислительного стресса.

Выводы.

Метэструсассоциированный     сахарный диабет – тяжелое состояние самок, характеризующееся нарушением гомеостаза и развитием метаболического ацидоза. Это заболевание проявляется:

• 1.    функциональной почечной недостаточность, сопровождающейся повышением содержания мочевины и креатинина на 45,8 и 50,4% соответственно;

• 2.    гипоперфузией тканей отображающейся увеличением концентрации лактата на 20,5%;

• 3.    перерождением паренхимы печени эскортируемой повышением активностиЩФ и АЛТ соответственно в 5,50 и 1,83 раза и ультразвуковым исследованием;

• 4.    активацией глюконеогенеза и липолиза, иллюстрируемых повышением уровня триглицеридов, холестерола и глюкозы в 5,8; 1,3 и 4,94 раза соответственно;

• 5.    снижением обмена электролитов, отразившегося снижением содержания калия на 6,84% и хлоридов на 3,51%;

• 6.    стандартным гормональным фоном для периода метэструса у сук относительно содержания прогестерона и инсулина;

• 7.    окислительнным стрессом, сопровождающимся снижением общей антиоксидантной активности на 15,38%.

Эндокринология и репродукция собак и кошек. Пер. с англ. – М.: Софион, 2008. – 1256 с.

Резюме

В       статье      рассмотрены      клинико-диагностические      особенности метэструсассоциированного сахарного диабета у сук. Установлено увеличение содержания креатинина, мочевины, общего билирубина и лактата соответственно на 50,4; 45,8; 7,6 и 20,5%, свидетельствующих о функциональной недостаточности почек и гипоперфузии тканей. Концентрация триглицеридов, холестерола иглюкозы отражают процессы активации глюконеогенеза и липолиза. Установленный уровень прогестерона блокирует рецепторы инсулина и формирует инсулинрезистентность у сук. Повышенная активность щелочной фосфатазы и АЛТ в 5,50 и 1,83 раза дополняют выявленное УЗ-исследованием перерождение паренхимы печени. На фоне заболевания снижается общая антиоксидантная активность до 1,1±0,029ммоль/л. Совокупность полученных результатов указывает на развитие окислительного стресса у собак при метэструсассоциированным сахарном диабете.