Особенности распределения антигенов HLA-DRB1 у детей с генерализованным туберкулезом и локальными формами заболевания

В последние годы отмечается некоторая стабилизация и снижение показателей заболеваемости и смертности от туберкулеза, что приводит к снижению числа впервые выявленных детей с туберкулёзной инфекцией. Показатель заболеваемости туберкулезом детей в возрасте от 0 до 14 лет уменьшился за последние годы на 7,7 % (2013 год – 14,3; 2014 год — 13,2; 2015 – 12,4, 2016 – 11,5 на 100 000 детей) (Нечаева О. Б., 2017). Ведущей формой туберкулеза по-прежнему остается туберкулез внутригрудных лимфатических узлов, который диагностируется в 75 – 76 % случаев. Генерализованные формы заболевания встречаются значительно реже, что обусловлено общим снижением заболеваемости. Внелегочные локализации регистрируются в 4,6 % случаев в зависимости от возрастной группы (от 3,7 % — в возрасте от 7 до 14 лет, и до 5,9 % — от 0 до 4 лет), при этом доля их за последние 15 – 16 лет имеет тенденцию к уменьшению (Шилова М. В., 2015). Как известно, туберкулез — мульти-факториальное заболевание. При взаимодействии организма с M.tuberculosis происходит активация собственного иммунитета, регуляция которого в значительной степени зависит от HLA-генотипа. Попытки найти комбинации HLA генов, ассоциированных с развитием инфекционного процесса у человека, и доказать взаимосвязь изменений иммунного ответа продолжаются на протяжении многих лет. Однако до настоящего времени нет четкого понимания причин возникновения генерализации инфекции у детей.

Цель исследования . выявить особенности распределения антигенов HLA-DRB1 у детей с генерализованным и локальными формами туберкулеза.

Материалы и методы . В клинике ФГБУ «СПб НИИФ» Минздрава РФ (отделение детской хирургии костно-суставного туберкулеза у детей и подростков)и в ФГБУ РосНИИГТ ФМБА России с 200 по 2016 гг. обследовано 1 детей в возрасте от 1 года до 14 лет с различными проявлениями туберкулезной инфекции. Группа популяционного контроля для сравнения результатов HLA – типирова-ния представлена 346 здоровыми жителями Северо-западного региона России (доноры крови).

На основании полученных при обследовании данных туберкулез исключили у 90 (47,9 %) детей, Локальная форма заболевания диагностирована у 9 детей (I группа); 51 ребенок (52,1 %) с туберкулезом внутригруд-ных лимфатических узлов (ТВГЛУ); 4 ребенка имели очаговые и инфильтративные изменения в легких с бактериовыделением. Генерализованный туберкулез был выявлен у 44 (44,9 %) пациентов (II группа) с изолированными специфическими поражениями в костно-суставном аппарате, а также в сочетании с туберкулезным поражением легких, вну-тригрудных лимфатических узлов, 2 — с туберкулезным менингитом, 2 — с поражением почек, 1 — с абдоминальным туберкулезом.

Всем детям проведен стандартный комплекс фтизиатрического обследования с включением иммунологических, лучевых и лабораторных методов диагностики.

Молекулярно-генетическое типирование аллелей генов HLA-DRB1 выполняли на уров-небазовогоразрешенияпосредствомполиме-разной цепной реакции (PCR-SSP) c панелью сиквенс-специфических праймеров с помощью стандартных коммерческих наборов реагентов PROTRANS Cyclerplate System Protrans HLA-DRB1*, позволяющих определить следующие группы аллелей: HLA DRB1: *01, *03, *04, *07, *0 , *09, *10, *11, *12, *13, *14, *15, *16 в Республиканском центре иммунологи- ческого типирования тканей (EFI аккредитованная лаборатория).

Статистический анализ проводили с применением программы Microsoft Office W ord Excel 2007, а также пакета прикладных программ Statistica 6.0 фирмы Stat.Soft. Inc. (США). Проведен анализ материала с применением методов параметрической и непараметрической статистики,а также расчет показателей: величины относительного риска (RR), превентивной фракции (PF), достоверность различий между группами оценивалась с помощью критерия Хи-квадрат.

Результаты и их обсуждение . На основании результатов иммуногенетического обследования двух выделенных групп детей установлены следующие особенности и различия. У больных туберкулезом детей (II группа) достоверно чаще (36,7 %), чем в группе популяционного контроля (21,1 %), встречается HLA-DRB1*04 (χ² = 10,0 ; р < 0,01). Показатель относительного риска (RR = 2,17) и этиологической фракции (EF = 0,19) указывают на предрасполагающую роль этой группы аллелей в развитии туберкулезного процесса. Кроме того, в этой же группе отмечалась редкая встречаемость аллелей HLA-DRB1* 07 (14,3 % против 27,5 %, χ² = 7,15, р < 0,01) и 15* (1 ,4 % против 2 ,3 %, χ² = 3,92; р < 0,01) по сравнению с контрольной группой. Показатели *07 (RR=0,44; PF=0,15), также как *15 (RR=0,56; PF=0,12) аллелей HLA-DRB1 ниже 1,0, что подтверждает их протективную роль.

Анализ особенностей распределения специфичностей HLA-DRB1 показал: при сопоставлении частоты встречаемости генов HLA-DRB1 в исследуемых группах установлено достоверное снижение частоты DRB1*01 у детей с генерализованным туберкулезом по сравнению с группой здоровых лиц, что может быть связано в данном случае с его протективными свойствами. Увеличение частоты внутрилокусного сочетания DRB1*03 DRB1*04 среди детей с генерализованной формой туберкулёза свидетельствует о возможной связи данного фенотипа с предрасположенностью к развитию такого течения инфекционного процесса. Следует отметить, что аллели DRB1*03 и DRB1*04 прочно ассоциируются с предрасположенностью к аутоиммунным заболеваниям, в частности, к аутоиммунным эндокринопатиям. Это лишний раз подтверждает ключевую роль иммуноге-

ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ

КОНФЕРЕНЦИЯ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ

«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ИММУНОГЕНЕТИКИ И ТКАНЕВОГО ТИПИРОВАНИЯ»

нетических факторов в развитии и характере течения туберкулёза.

Заключение . Полученные данные демонстрируют значимость генетического статуса в развитии туберкулезной инфекции у детей. Наличие в генотипе HLA-DRB1*04 группы ал-

Санкт-Петербург 30–31 мая 2018 г.

лелей свидетельствует о предрасположенности к развитию туберкулеза у детей, а также значимость особенностей HLA-DRB1,а именно снижение частоты встречаемости группы аллелей DRB1*01, на развитие генерализованной формы туберкулёза у детей.