Особенности рецепции и микроциркуляции миометрия при дискоординированной родовой деятельности

Общеизвестно, что роль прогестерона и эстрогенов в поддержании беременности и развитии регулярной родовой деятельности высока [5,6].

По мнению Гаспарян Н.Д. [1], механизм развития регулярной родовой деятельности зависит в большей степени не от содержания эстрадиола и прогестерона в плазме периферической крови, а от чувствительности утеромиоцитов к половым стероидам и утеротропинам, т. е. от состояния рецепторного аппарата миометрия.

В изученной нами литературе мы не нашли оценку рецепции миометрия в родах, а также изучение зависимости состояния рецепторного аппарата матки от вида родовой деятельности.

Весьма актуальным является вопрос изменения микроциркуляции миометрия [2] как один из возможных механизмов развития дискоординированной родовой деятельности.

Целью нашего исследования явилось определение объемной плотности рецепторов к эстрогенам и прогестерону, изучение объемной плотности сосудов микроциркуляции (CD34), оценка потенциала ангиогенеза (VEGF - сосудистый эндотелиальный фактор роста) в миометрии, полученном при операции кесарево сечение у рожениц с физиологической и дискоординированной родовой деятельностью по типу шеечной дистоции.

Материалы и методы. Изучался биопсийный материал миометрия матки, полученный при операции кесарево сечение. Абдоминальное родораз-решение проводилось по экстренным показаниям со стороны матери или плода у 7 рожениц с физиологической родовой деятельностью (контрольная группа) и у 10 рожениц с дискоординированной родовой деятельностью по типу шеечной дистоции при отсутствии эффекта от коррекции данного вида аномалии родовой деятельности (основная группа). Диагноз шеечной дистоции устанавливался по клинико-партографическим и токографическим данным. В процессе родов выявлялись: болезненные схватки, различные по силе и продолжительности, снижение растяжимости, напряжение и спастическое сокращение на схватку краев маточного зева, раскрытие шейки матки менее 0,4 см/ч, отсутствие поступательного движения головки. По данным наружной гистерографии определялись нарушения «тройного нисходящего градиента» маточных сокращений, проявляющиеся дискоординацией сократительной деятельности матки и повышением активности основных ее функциональных отделов, появление сдвоенных схваток, отсутствие полноценной фазы расслабления (диастолы схватки). С целью коррекции дискоординированной родовой деятельности по типу шеечной дистоции использовались эпидуральная анестезия, спазмолитики (галидор, но-шпа), при гиподинамическом типе сократительной деятельности матки - простагландины (энзапрост, миролют), при утомлении женщины предоставлялся медикаментозный сон-отдых (ГОМК).

У всех исследуемых женщин проведено мор-

Проблемы здравоохранения

фологическое изучение миометрия, полученного при операции кесарево сечение, которое выполнялось поперечным разрезом в нижнем маточном сегменте. С диагностической целью в области операционного разреза иссекался участок передней стенки матки размером 0,5x1x1 см.

Во всех случаях было осуществлено углубленное морфологическое изучение биопсийного материала с применением метода иммуногистохимии. Иммуногистохимическое исследование проводили на парафиновых срезах толщиной 5 мкм, которые депарафинировали по стандартной методике. Для работы использовали операционный материал матки с длительностью фиксации в 10 %-ном растворе нейтрального формалина в течение 24-48 часов.

Срезы для выявления антигенов обрабатывали в микроволновой печи мощностью 600 Вт в течение 10 минут в 0,01 М цитратном буфере (pH 6,0); далее охлаждали 30 мин при комнатной температуре и промывали в фосфатно-солевом буфере (pH 7,4). Для иммунного окрашивания использовали стреп-тавидин-биотиновый пероксидазный метод и соответствующий набор детекции (“Novocastra”, Великобритания). Срезы инкубировали с моноклональными антителами к рецепторам клеток эндотелия (CD34), антигену сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF), во влажной камере 60 мин при температуре 37 °C. Представительство рецепторов половых гормонов на клеточных мембранах миоцитов изучали с помощью МКАТ к рецепторам эстрогенов (ER) и прогестерона (PR) (табл. 1).

В качестве хромогена использовали 3,3-диаминобензидина тетрахлорид, входящий в указанный выше коммерческий набор детекции. Во всех случаях проводили докрашивание ядер гематоксилином Майера в течение 0,5-2 минут. Контроль ные реакции выполняли без первичных специфических антител.

Подсчет объемной плотности производился с помощью обработки цифрового изображения микропрепарата программным средством Bio Vision 2,0 (West Medica, Австрия).

При статистической обработке данных пользовались рекомендациями О.Ю. Ребровой [4]. Были использованы преимущественно непараметрические критерии. При проверке нулевой гипотезы (различия между группами отсутствуют) критический уровень значимости был принят равным 0,05. При сравнении групп по количественному признаку использовались критерии Манна-Уитни, Вальда-Вольфовица. При обработке данных применялся программный статистический пакет Statistica 6,0 (Stat Soft, USA).

Результаты исследования и их обсуждение. При изучении объемной плотности рецепторов к эстрогенам и прогестерону в миометрии было выявлено, что объемная плотность рецепторов к эстрогенам у рожениц с дискоординированной родовой деятельностью составила 0,643 ± 0,617, при физиологической родовой деятельности этот показатель равен 0,396 ± 0,573. Количество рецепторов к прогестерону в изучаемых группах имело статистически значимые различия и составило 1,332 ± ± 0,911 в 1 группе и 0,689 ± 0,575 во 2 группе. Оцененные данные представлены в табл. 2.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что избыточное содержание рецепторов к прогестерону в миометрии является одним из этиологических факторов в развитии дискоординированной родовой деятельности. Плотность рецепторов к эстрогену не имела статистически значимых различий в изучаемых группах, поэтому введение эстрогенсодержащих препаратов (сине-

Таблица1

Панель антител, использованная в иммуногистохимическом исследовании

МКАТ	Клон	Рабочее разведение	Фирма-изготовитель
CD34	QBEnd-10	1:25	“DAKO Cytomation”, Дания
VEGF	SP28	Готовые	“Diagnostic BioSystems”, США
Estrogen Receptor (ER)	6F11	1:60	“Novocastra”, Великобритания
Progesterone Receptor (PR)	16	1:150	“Novocastra”, Великобритания

Таблица 2

Объемная плотность рецепторов в миометрии

Показатель	Дискоординированная родовая деятельность п = 23	Физиологическая родовая деятельность п = 9	Р
Объемная плотность рецепторов к эстрогену, Me (UQ-LQ) %	0,643 (0,048-2,195)	0,396 (0,052-1,916)	0,056
Объемная плотность рецепторов к прогестерону, Me (UQ-LQ) %	1,332 (0,155-4,022)	0,689 (0,065-1,804)	0,044
Эстрогенпрогестероновый индекс, Me (UQ-LQ)	0,535 (0,04-2,31)	0,596 (0,166-2,184)	0,958

■ Таблица 3

Объемная плотность сосудов микроциркуляции и сосудистого эндотелиального фактора роста

Показатель	Дискоординированная родовая деятельность п = 23	Физиологическая родовая деятельность п = 9	Р
Объемная плотность сосудов микроциркуляции (CD34), Me (UQ-LQ) %	5,295 (1,542-10,449)	7,943 (0,972-16,968)	0,035
Объемная плотность сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF), Me (UQ-LQ) %	8,229(1,172-17,542)	8,874 (44,084-13,363)	0,034

Узлова Т.В., Семченкова О.В., Сычугов Г.В.

Особенности рецепции и микроциркуляции миометрия при дискоординированной...

строл, фолликулин) с целью коррекции аномалий родовой деятельности в родах, по нашему мнению, нецелесообразно.

При определении объемной плотности сосудов микроциркуляции и объемной плотности сосудистого эндотелиального фактора роста (табл. 3) было установлено, что при дискоординированной родовой деятельности в миометрии не только происходит снижение активности микроциркуляции, но и уменьшается потенциал ангиогенеза, что несомненно играет роль в этиопатогенезе изучаемой аномалии родовой деятельности.

Заключение. В миометрии рожениц с дискоординированной родовой деятельнстью по типу шеечной дистоции выявлено достоверное повышение экспрессии PR при практически неизмененной интенсивности экспрессии ER.

Изучение показателей микроциркуляции и ангиогенеза показало снижение этих величин при изучаемой аномалии родовой деятельности.

Таким образом, исследование рецепции и микроциркуляции миометрия несомненно улучшит понимание процессов, приводящих к структурным изменениям в шейке матки в ходе родового акта и позволит изменить подходы к профилактике и лечению аномалий родовой деятельности.