Острая токсичность и кумулятивные свойства местного анестетика ропивакаина гидрохлорида (Наропин®)

Ропивакаин, местный анестетик, представляет собой моногидрат гидрохлорида 1-пропил-2,6 пипеколоксилидида. Ропивакаин относится к той же группе, что и бупивакаин с мепивакаином, однако если последние представляют собой рацемическую смесь S и R-изомеров, то ропивакаин является чистым S-изомером (S. Leone et al., 2008). Ропивакаин гидрохлорид запатентован в 1985 г. и прошел клиническую апробацию в 1996 г. (US FDA). В Российской Федерации препарат зарегистрирован в 1999 г. В медицине человека Наропин®, созданный как альтернатива ранее разработанным пипеколоксилидидам, применяют для инфильтрационной анестезии, блокады периферических нервов и сплетений и эпидуральной анестезии и аналгезии (А.М. Овечкин, А.В. Гнездилов, 2000). Однако, возможнсти использования ропивакаина в ветеринарной практике изучены недостаточно.

Целью нашего исследования являлось изучение параметров острой токсичности и кумулятивного действия 1 %-ного Наропина® на крысах.

Материалы и методы. Острую токсичность 1 %-ного инъекционного Наропина® (“Astra-Zeneca”) оценивали на 60 белых беспородных крысах обоего пола живой массой 155-210 г при однократном внутрибрюшином и подкожном применениях. Наблюдение за экспериментальными животными вели ежедневно в течение 14 суток с момента введения препарата. Учитывали время развития интоксикации, симптомы осторой интоксикации, общее состояние и поведение, срок и процент гибели и результаты патологоанатомического вскрытия павших животных. Расчеты параметров острой токсичности проводили по методу Миллера и Тейнтера (1944) (по описанию М.Л. Беленький, 1959). Индекс кумуляции (I кум) при проведении острого опыта рассчитывали по формуле согласно (П.Н. Бабич, 2004).

Изучение кумулятивного действия 1 %-ного Наропина® проводили на 22 беспородных белых крысах-самках с исходной массой 140-185 г при подкожном применении в дозе равной десятой части от ранее установленной однократной подкожной ЛД50 с использованием теста субхронической токсичности, предложенного Lim R.K., et al. (1961). Отмечали при этом клиническую картину, потребление корма и воды, поведение и летальность животных. Контрольным животным вводили физиологический раствор. Погибших животных вскрывали для установления характера повреждающего действия испытуемого препарата. Расчет коэффициента кумуляции производили по формуле, предложенной Ю.С.Каганом и В.В.Станкевичем (1964).

Результаты исследований. Токсичность при внутрибрюшинном введении изучали на 36 белых беспородных крысах обоего пола. Препарат вводили белым крысам из расчета 50, 60, 70, 80, 90 мг/кг живой массы. Первые признаки токсического действия отмечались у белых крыс после введения Наропина®, через 1-8 мин., которые проявлялись снижением тонуса мускулатуры конечностей и угнетенным состоянием. Эти признаки были более выраженными у самок. Клинические признаки интоксикации после применения Наронина® в дозе 50 мг/кг проявлялись клоническими судорогами (только у самок) и слюноотделением продолжительностью до 30 секунд в течение первых 30 мин. Общее угнетение наблюдали у всех животных в течение 1-1,5 часа. При дозе 60 мг/кг через 8-10 мин после введения отмечались судороги и саливация у 4 животных из 6-ти. Одна самка погибла во время судорог. Угнетение общего состояния и непроизвольное мочеиспускание регистрировали у всех подопытных животных.

Судороги периодически возникали у 4 животных из 6-ти через 5-8 мин после введения им Наропина® в дозе 70 мг/кг и продолжались в течение 25-30 мин после чего впадали в коматозное состояние. После введения указанной дозы погибли 2 самки через 2 мин от начала судорог. Коматозное состояние и непроизвольное мочеиспускание отмечали у всех подопытных животных. Через 1-1,5 часа после прекращения судорог крысы начинали двигаться по клетке, приминали воду и корм. Наропин® в дозе 80 мг/кг вызывал такие же клинические признаки отравления, что и в дозе 70 мг/кг, но с более высоким уровнем развития. Все самки погибли в течение первых 4-8 мин, а два самец остались живыми. Все 100% крыс погибли в течение 2-3 мин после введения препарата в дозе 90 мг/кг.

При патологоанатомическом вскрытии погибших крыс не выявлено отклонений в внутренних органах. Средне-смертельная доза Наропина® (ЛД50) при внутрибрюшинном применении составила 72,0±4,8 мг/кг; ЛД100 – 90,0 мг/кг; ЛД16 – 59,0 мг/кг; ЛД84 – 88,0 мг/кг. Животные, не погибшие в течение первых часов после введения препарата, оставались живыми. Минимальную определенную информацию о кумулятивных свойствах Наропина® можно получить путем определения индекса кумуляции (I кум) . В данном случае этот показатель – 0. Вариабельность смертельных доз Наропина® определенная отношением показателей ЛД84 к ЛД16 равна 1,5. Чем ближе данное соотношение к единице, тем уже зона смертельного действия и соответственно выше опасность исследуемого соединения.

При введении Наропина® подкожно белым крысам-самкам параметры острой токсичности составляли: ЛД50 - 75,5±2.8 мг/кг; ЛД100 – 85,0 ; ЛД16 - 68,5 мг/кг; ЛД84 - 82,5 мг/кг. Наропин® после однократного подкожного применения вызывал у белых крыс-самок внешние признаки отравления, аналогичные таковым при внутрибрюшинном введении. При вскрытии трупов павших животных после подкожного введения препарата не регистрировали макроскопических изменений во внутренних органах.

При изучении кумулятивных свойств Наропина® клинические признаки интоксикации отмечали при подкожном введении суммарной дозы 168,8 мг/кг. Симптомы интоксикации характеризовались незначительным угнетением общего состояния животных. В последующие дни опыта регистрировали продление времени сна, малую подвижность, неохотний прием корма. Судороги отмечали у некоторых животных, когда вводимая доза составляла 57,30 мг/кг, а суммарная – 455,2 мг/кг и регистрировали у всех крыс, когда вводимая доза составлила 85,95 мг/кг. Суммарная доза, вызвавшая гибель всех животных составила 884,8 мг/кг. При этом ЛД50 субхроническая составила 677,7 мг/кг для белых крыс-самок, а коэффициент кумуляции 8,97. Таким образом, согласно классификации химических веществ по степени кумуляции по Л.Н.Медведь (1964) (по описанию М.Н. Аргунова, 2007) Наропин® при подкожном введении относится к веществам со слабовыраженной кумуляцией. Данная величина согласуется с результатами, полученными при определении I кум.

При патологоанатомическом вскрытии животных, павших после введения препарата, наблюдали отечность и гиперемию кожи в месте инъекции. У всех подопытных животных отмечали гиперемию легких и петехиальные кровоизлияния на плевральной мембране.

Заключение. Проведенные исследования, свидетельствует о том, что Наропин® - препарат узконаправленного типа действия и обладает очень узкой зоной токсического действия и невыраженном кумулятивном эффектом после однократного введения при внутрибрюшинном и подкожном применении. Самки более чувствительны, чем самцы к действию Наропина® при внутрибрюшинном применении. Судороги и дыхательная недостаточность являются основными причинами смерти у крыс при острой токсичности. Анализ результатов эксперимента по изучению кумулятивных свойств дает основание утверждать, что Наропин® при подкожном введении относится к веществам со слабовыраженной кумуляцией.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Аргунов М. Н. Ветеринарная токсикология с основами экологии. // Издательство «Лань», 2007. – С. 160. 2. Бабич П.Н., Чубенко А.В., Лапач С.Н., и Жминько П.Г. Вычисление коэффициента кумуляции с использованием современных информационных технологий. // Современные проблемы токсикологии, 2004. - № 2. 3. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. – Рига, 1959. – С. 60-71. 4. Каган Ю.С. и Станкевич В.В. Коэффициент кумуляции как количественный критерий. // Сб. научн. Трудов актуальные вопросы гигиены труда, промышленной токсикологии и профессиональной патологии в нефтяной и нефтехимической промышленности. – Уфа, 1964. – С. 48-49. 5. Овечкин А.М. и Гнездилов, А.В. Наропин (ропивакаин) в лечении боли: идеальный выбор? // Вестник интенсивной терапии, 2000. -№ 3. – С. 13-17. 6. Leone S., Di Cianni, S. Casati, A. аnd Fanelli, G. Pharmacology, toxicology, and clinical use of new long acting local anesthetics, ropivacaine and levobupivacaine. // Acta biomed. – 2008. – Vol. 79. – P. 92-

105. 7. Lim R.K., Rink K.G., Glass H.G., Soaje-Echague E. Arch. Intern. Phar. Therapie, 1961, 130, 3-4. – P. 336.

ОСТРАЯ ТОКСИЧНОСТЬ И КУМУЛЯТИВНЫЕ СВОЙСТВА МЕСТНОГО АНЕСТЕТИКА РОПИВАКАИНА ГИДРОХЛОРИДА (НАРОПИН®)

Эль-Окал О.С., Гарипов Т.В.

Резюме

Наропин® - новый амидный местный анестетик длительного действия. Наропин® еще не достаточно активно применяется в ветеринарной практике. Целью данного исследования явилось установление точных даннов о параметрах острой токсичности и кумулятивного действия 1 %-ного раствора Наропина®. Установлено, что ЛД50 наропина® в расчете на активно чистое действующее вещество при внутрибрюшинном применении у крыс составляет 72,0±4.8 мг/кг, против 75,5±2.8 мг/кг при подкожном применении. Индекс кумуляции (I кум) при проведении острого опыта составил 0. Судороги сопровождающися депрессией являются основными признаками острой интоксикации препаратом. ЛД50 субхроническая составила 677,7 мг/кг для белых крыс-самок, а коэффициент кумуляции 8,97. Таким образом, Наропин® является препаратом узконаправленного типа действия со слабовыраженной кумуляцией при однократном и длительном применении.

ACUTE TOXICITY AND CUMULATIVE PROPERTIES OF THE LOCAL ANESTHETIC ROPIVACAINE HYDROCHLORIDE (NAROPIN®)

EL-Okal O.S., Garepof T.W.