Патоморфологическая оценка пролонгированного действия препарата Мелапол Плюс на структуру семенников крыс

С целью оценки степени продолжительного влияния препарата "Мелапол плюс", содержащего синтетический аналог мелатонина на структуру семенников животных были выполнены гистологические и патоморфологические, гистологические и гистохимические исследования структуры семенников у лабораторных крыс на 15, 30, 45 и 60-е сутки опыта.

Установлено, что после подкожного введения препарата "Мелапол плюс" на 15-е сутки семенники подопытных крыс не отличались по макроскопическим признакам от семенников контрольных животных. Гистологические изменения в семенниках подопытных животных характеризовались появлением уменьшенных в объеме и имеющих полиморфную структуру поперечного сечения семенных канальцев, сохранявшие высокий уровень содержания гликозаминогликанов в базальной мембране и клетках сперматогенного эпителия. Клетки, прилегающие к базальной мембране приобрели вид неравномерного по толщине монослоя и характеризовались однородностью. В большинстве сперматогонии были представлены темными клетками, выделявшиеся округлыми ядрами с конденсированным хроматином и небольшим по объему цитоплазмой, содержащий ШИК-положительной материал. Присутствие обновляющихся стволовых клеток с оксифильной структурой цитоплазмы и эухроматизированным ядром резко уменьшалось. Преобладание в базальной области эпителия семенных канальцев среди популяций сперматогоний темных, резервных клеток отражало адаптивную реакцию сперматогенного эпителия на искусственное повышение содержания индоламинов в организме подопытных крыс. Разреженные сперматоциты 1 порядка неравномерно распределялись в сперматогенном эпителии и отличались большим объемом цитоплазмы и гиперхромным ядром. Малочисленные значительно уменьшенные в объеме, с гиперхромными ядрами сперматоциты 2 порядка не обеспечивали полноценное образование сперматид. Сохранившиеся поддерживающие клетки резко уменьшались в объеме, и были вытянуты в сторону просвета канальцев и имели пониженное содержание ШИК-положительного материала. Большинство этих клеток утрачивали многочисленные зоны тесного контакта друг с другом. В резко вытянутой апикальной зоне сустентоцитов обнаруживали только единичные сперматиды и сперматозоиды, находящиеся в начальных стадиях формирования. В просвете отдельных семенных канальцев присутствовали неравномерно распределенные малочисленные сперматозоиды.

В окружающей семенные канальца соединительной ткани неравномерно кровонаполненные сосуды соприкасались с уменьшенной в объеме цитоплазмы интерстициальных клеток. Уровень содержания мукополисахаридов в стенке кровеносных сосудов и окружающей соединительной ткани не изменялся и был близок по насыщению, отмечаемому у контрольных животных.

На 30-е сутки морфологические изменения в клетках семенных канальцев, соответствующие снижению активности сперматогенеза приобрели еще более выраженный характер. На это указывали присутствующие в расширенных просветах большинства семенных канальцев малочисленных, в том числе атрофированных и атипичных сперматозоидов, семенных шаров, выделявшиеся размытыми контурами ядра и цитоплазмы (Рис. 1).

Рис.1 Ослабление процесса сперматогенеза в клетках семенных канальцев крыс на 30- сутки опыта. Окраска гематоксилином и эозином.

х 600

Расширение полостей канальцев происходило вследствие уменьшения плотности расположения клеток адлюминальной и в меньшей степени базальной областях. В базальной зоне возникли единичные небольшие участки разрежения монослоя сперматогоний, что указывало на ослабление в этот период клеточных механизмов гемато-тестикулярного барьера. Сперматоциты первого порядка становились малочисленными, а их ядра вследствие замедления биосинтетических процессов в кариоплазме приобрели гиперхромный вид из-за повышенного содержания гетерохроматина. На этот срок исследования только в цитоплазме сперматогоний обнаруживали присутствие ШИК–положительного материала, тогда как в цитоплазме клеток, расположенные в адлюминальной области, в том числе сустентоцитах гликопротеиды практически не обнаруживали. На их боковой и апикальной зонах цитоплазмы закреплялись единичные сперматиды. В цитоплазме интерстициальных клетках расположенных в мезенхиме семенников на данный срок исследований отмечали заметное уменьшение объема цитоплазмы и содержания в ней липоидных включений, что отражало пониженную выработку ими тестестерона.

Востановлениеструктуры в семенниках подопытных крыс начали происходить на 45-е сутки после применения препарата. Они проявлялись увеличением и выравниванием профилей большинство семенных канальцев. В базальном слое увеличенные в объеме стволовые клетки -сперматогонии формировали многослойную структуру. В этих клетках, а также в цитоплазме сустентоцитов накапливался во все большем количество ШИК-положительный материал (Рис 2).

Рис. 2 Содержание полисахаридов в цитоплазме сустентоцитов на 45-е сутки опыта. ШИК реакция, окраска ядер гематоксилином. х 600

В адлюминальной области репаративные процессы проявлялись преимущественно за счет гипертрофии сохранившихся популяций клеток. Крупные сперматоциты 1-го и более мелкие клетки 2 – го порядка были хорошо обозначенные и располагались вследствие увеличения объема более тесно. На апикальной поверхности поддерживающих клеток появились единичные сперматиды, находящиеся на различных стадиях трансформации. В просвете семенных канальцев располагались многочисленные малодифференцированные сперматозоиды. Деструктивные изменения в клетках адлюминальной области обнаруживали все в меньшей степени. В сперматогенном эпителии ближе к адлюминальной области как результат приостановления цитокинеза обнаруживали клоны клеток, формирующие синцитии. Происходило восстановления структуры семенных канальцев и интерстициальной ткани органа. Следовательно, процесс сперматогенеза был практически восстановлен.

На 60-е сутки эксперимента отмечали восстановление утраченных в ходе пролонгированного действия комплексного препарата Мелапол – плюс структур сперматогенного эпителия семенных канальцев. Нарастание пролиферации сперматогоний способствовала формированию в базальной зоне крупных по объему клеток с глыбчатой структурой хроматина в кариоплазме. Увеличилось содержание клеток с незавершенным цитокинезом формирующие синцитиальные структуры из сперматоцитов. Расположенные в адлюминальной области большинство сустентоцитов восстанавливали цитоплазматические контакты с соседними клетками. На апикальной области цитоплазмы этих клеток располагались сперматиды и дифференцируемые сперматозоиды. В окружающей семенные канальца соединительной ткани не равномерно располагались интестициальные клетки, со значительно большим объемом цитоплазмы по сравнению с предыдущими сроками исследования.

Следовательно, пролонгированное действие комплексного гормонального препарата Мелапол-плюс вызывает на протяжении первых 30-ти суток ослабление пролиферации, дифференциации и биосинтетической активности сперматогенных, поддерживающих и интерстициальных клеток семенников подопытных крыс. Выявленные процессы имели обратимый характер, и они начинали ослабевать на 45-е сутки опыта. Полное восстановление процесса сперматогенеза у подопытных животных отмечали на 60-е сутки после введения комплексного препарата. Следует отметить, что постоянное присутствие непрерывного слоя сперматогоний на базальной мембране семенных канальцев указывало на сохранение во все сроки исследования гемато-тестикулярного баръера.

ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПРОЛОНГИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТА МЕЛАПОЛ ПЛЮС НА СТРУКТУРУ СЕМЕННИКОВ КРЫС

Мутагиров Р.И., Залялов И.Н., Пунегова Л.Н.

Резюме

Пролонгированное действие комплексного гормонального препарата Мелапол-плюс вызывает на протяжении первых 30-ти суток ослабление пролиферации, дифференциации и биосинтетической активности сперматогенных, поддерживающих и интерстициальных клеток семенников подопытных крыс. Выявленные процессы имели обратимый характер, и они начинали ослабевать на 45-е сутки опыта. Полное восстановление процесса сперматогенеза у подопытных животных отмечали на 60-е сутки после введения комплексного препарата. Следует отметить, что постоянное присутствие непрерывного слоя сперматогоний на базальной мембране семенных канальцев указывало на сохранение во все сроки исследования гемато-тестикулярного баръера.

PATHOMORPHOLOGICAL EVALUATION OF PROLONGED DRUG MELAPOL PLUS ON THE STRUCTURE OF RAT TESTES

Mutagirov R.I., Zalyalov I.N., Punegova L.N.