Переносимость лекарственного препарата для ветеринарного применения тулатрин

Свиноводство – одна из важных отраслей животноводства. Скороспелость данного вида животных, их плодовитость позволяет хозяйствам с интенсивными методами выращивания получать высокие прибыли. Однако высокую продуктивность могут обеспечить только здоровые свиньи, поэтому, наряду с организацией правильного кормления и содержания, необходимо предусматривать защиту их от различных заболеваний [1].

Огромный экономический ущерб, причиняемый животноводческим хозяйствам желудочно-кишечными и респираторными заболеваниями, вызывает необходимость поиска путей и методов совершенствования и изыскания новых эффективных средств в их профилактике и лечении [4, 5, 6].

Несмотря на значительное количество разработанных комплексных препаратов, проблема патологий респираторного тракта поросят не теряет своей актуальности [2].

Высокоэффективным и наиболее рациональным инструментом контроля инфекционных заболеваний в условиях крупного промышленного свиноводства принято считать массовую антибактериальную терапию, осуществляемую по лечебнопрофилактическим схемам.

Объектом исследований являлось лекарственное средство Тулатрин – антибактериальный препарат группы макролидов, который назначают для лечения бактериальных инфекций у крупного рогатого скота и свиней. Тулатромицин, действующее вещество препарата, обладает широким спектром действия. Активен в отношении многих грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, в том числе в отношении Mannheimia (Pasteurella) haemolytica, Pasteurella multocida, Haemophilussomnus, Haemophilusparasuis, Mycoplasma bovis, Mycoplasma hyopneumonia, Actinobacillus pleuropneumoniae, Moraxella bovis, Neisseriaspp. Механизм бактериостатического действия тулатромицина основан на подавлении белкового синтеза на рибосомальном уровне.

Цель исследований – оценка переносимости препарата поросятами технологической группы доращивания.

Изучение переносимости препарата целевыми видами животных при многократном введении в терапевтической и повышенных дозах необходимо для выявления совокупности функциональных или морфологических нарушений, появляющихся у животного после длительного применения испытуемого лекарственного препарата и при его передозировке.

Материал и методы исследований.

Исследования по оценке переносимости целевыми видами животных (свиньи) лекарственного препарата для ветеринарного применения Тулатринпро вводили, в условиях Учебно-опытного хозяйства «Кубань» (г. Краснодар), которое является структурным подразделением ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет им. И.Т. Трубилина». Лабораторные исследования крови выполняли на кафедре терапии и фармакологии факультета ветеринарной медицины и в отделе терапии и акушерства ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии».

Животных содержали изолировано от остального поголовья в специализированной комнате для группы доращивания. По принятой в хозяйстве технологии в 30-суточном возрасте поросят отнимают от свиноматок и переводят на доращивание, где они содержатся 50-55 дней. Комната доращивания поделена на 8 станков, станок рассчитан на 25 голов, на каждые два станка предусмотрен кормовой автомат на 50 голов.

В течение 7 дней до начала введения препарата вели ежедневный контроль клинического состояния животных. По результатам ежедневного осмотра установили, что все поросята были клинически здоровыми. На момент проведения опыта каждому животному был присвоен индивидуальный номер, помечаемый биркой.

В период опыта все поросята находились в идентичных условиях содержания и кормления,  параметры микроклимата           соответствовали зоогигиеническим нормам. Поросята экспериментальных групп    получали стартовый полнорационный  комбикорм

СПК-4.

Ветеринарно-профилактические мероприятия на предприятии проводятся по схеме, утвержденной руководителем в соответствующем порядке.

Таблица 1 – Схема научно-хозяйственного опыта

Группа	№ станка	Кол-во поросят, гол.	Длительность эксперимента, сут.	Доза введения препарата
Контроль	1	6	16	Препарат не вводился
Опыт 1	2	6	16	Внутримышечно, 1 мл на 40 кг массы животного
Опыт 2	3	6	16	Внутримышечно, 3 мл на 40 кг массы животного

В соответствии с планом исследования было сформировано 2 опытные и 1 контрольная группы поросят по 6 голов в каждой группе. Животным опытных групп испытуемый препарат вводили внутримышечно, в течение 5 дней в дозах: 1 опытная группа: терапевтическая доза – внутримышечно, 1 мл на 40 кг массы тела животного; 2 опытная группа: трёхкратная терапевтическая доза – внутримышечно, 3 мл на 40 кг массы тела животного; контрольной группе поросят лекарственный препарат не применялся. Схема научно-хозяйственного опыта представлена в таблице 1.

В течение 16 суток за животными велось ежедневное наблюдение, обращали внимание на общее состояние и поведение животных, потребление корма и воды.

В течение всего периода опыта проводили ежедневное наблюдение за общим состоянием и поведением животных, потреблением корма и воды. На 1, 6 и 16 сутки регистрировали динамику живой массы поросят, путем группового взвешивания животных каждой группы определяли показатели температуры, пульса, дыхания. Также ежедневно оценивался клинический статус поросят.

Отбор проб крови проводили натощак из яремной вены на 1, 6 и 16 сутки опыта. Кровь для проведения биохимических исследований отбирали в полимерные одноразовые пробирки с активатором свертываемости. Биохимические исследования показателей крови проводили на полуавтоматическом биохимическом анализаторе BS-3000P (Sinnova, КНР) с набором биохимических реагентов для ветеринарии Диа ВетТест (Диакон-ДС, Россия). Исследование проводили по следующим показателям:

билирубин общий и прямой, АСТ, АЛТ, мочевина, креатинин, общий белок, щелочная фосфатаза.

Полученные цифровые значения результатов исследований обрабатывали методами математической статистики, принятой в биологии и медицине [3], с использованием стандартной программы Microsoft Office Excel 2013 в операционной системе Windows 10. Результаты считали достоверными при уровне вероятности p≤0,05.

Результат исследований.

Изменение живой массы и основные физиологические показатели в экспериментальных группах представлены в таблице 2.

Таблица 2  – Изменение живой массы и основные физиологические показатели в экспериментальных группах

Примечание		Масса, кг	Т, ос	Пульс, уд/мин	Дыхание, дых. движ. в мин.
На день 1 опыт	контроль	21,5±1,962	40,317±0,048	196,5±1,893	56,5±1,5
	1 Опытная	20,0±0,816	40,383±0,031	200,833±3,114	62,833±1,078***
	2 Опытная	21,667±0,843	40,4±0,026	203±1,966*	64,333±1,358***
На 6 день опыта	контроль	26,167±2,414	40,183±0,054	166,667±1,838	48,667±0,667
	1 Опытная	24,5±0,671	40,183±0,083	174,83±4,68	47,5±0,428
	2 Опытная	25,667±0,882	40,25±0,076	180,333±1,838***	47,833±0,477
На 16 день опыта	контроль	31,667±2,201	40,05±0,043	146,333±4,055	41,167±0,543
	1 Опытная	31,0±1,0	40,067±0,076	149,333±4,971	42,5±0,719
	2 Опытная	34,667±1,726	40,067±0,067	150,5±6,381	42,667±0,803

*P >0,05; ** P >0,01; *** P >0,001

Проведенные исследования указывают, что при многократном введении препарата Тулатрин (в терапевтической и повышенных дозах) во всех опытных группах, на протяжении всего периода клинического наблюдения за животными, не отмечали падежа и проявления клинических признаков интоксикации (угнетение, рвота, слюнотечение, диарея и др.). Животные были активные и хорошо поедали корм. Живая масса поросят, находящихся в опытных группах, достоверно не отличалась от животных, которые содержались в контрольных группах.

Исследования клинических показателей – температуры, пульса и дыхания, также указывало на отсутствие клинических признаков интоксикации опытных животных. Исследуемые физиологические показатели находились в референтных значениях нормы согласно их возрасту.

Анализ биохимического состава крови в экспериментальных группах указывает на влияние изучаемого препарата на определенные органы (Таблица 3).

В первый день опыта нами отмечено, что исследуемые биохимические показатели крови опытных и контрольных животных находились в референтных значениях.

На 6 день проведения эксперимента в контрольной группе все изучаемые показатели были в пределах физиологической нормы. У животных первой опытной группы мы регистрировали повышение креатинина и ЩФ до 232,95 ммоль/л и 402,13 ЕД/л, соответственно, но эти показатели находились в верхних пределах физиологической нормы. Во второй опытной группе отмечено повышение AST до 80,4 Ед/л, что не является патологией, но находится в верхней границе нормы, такая же тенденция прослеживается и в показателях общего белка – 60,2 г/л, креатинина– 262,4 ммоль/л и ЩФ – 480,3 Ед/л.

На 16 день проведения опыта у животных второй опытной группы отмечалось повышение AST на 22,4 ЕД/л по сравнению с группой контроля, что выше верхней нормы референтных значений на 3,3 ЕД/л. Зарегистрировано повышение глюкозы, общего белка до 249 г/л, креатинина до 251,73 ммоль/л, мочевины до 6,93 ммоль/л, и ЩФ до 609,41 Ед/л. Схожие изменения в биохимических показателях крови прослеживаются и в первой опытной группе.

Таблица 3 – Биохимические показатели сыворотки крови экспериментальных поросят в динамике

Показатель	На день 1 опыта			На 6 день опыта			На 16 день опыта
	контр.	опыт1	опыт 2	контр.	опыт1	опыт 2	контр.	опыт1	опыт 2
ALT, Ед/л	26,88 ±1,21	27,86 ±1,72	26,3 ±1,17**	26,15 ±2,45	28,52 ±1,02	26,1 ±1,56	23,33 ±0,89	18,18 ±1,53**	18,2 ±3,14
AST, Ед/л	63,35 ±6,45	68,96 ±3,26	64,43 ±4,38	63,65 ±9,34	71,08 ±3,16*	80,4 ±4,07*	64,95 ±2,64	69,85 ±2,73	87,38 ±3,47***
Глюкоза, ммоль/л	6,51 ±1,1	6,03 ±1,51*	7,45 ±0,81**	6,9 ±0,55	6,35 ±0,481	7,03 ±0,30	7,2 ±0,32	9,33 ±0,76	11,3 ±0,88**
Общий белок, г/л	70,30 ±3,54	56,18 ±3,45**	60,5 ±0,64**	55,46 ±1,9	53,0 ±2,102	60,23 ±4,68	70,56 ±2,44	170,16 ±5,9**	249,06 ±48,6**
Общий билирубин, мкмоль/л	13,43 ±0,55	10,08 ±0,46***	9,63 ±0,36***	10,1 ±1,483	15,58 ±3,276	11,61 ±2,09***	10,95 ±0,85	11,3 ±0,35	10,55 ±0,35
Мочевина, ммоль/л	5,51 ±1,17	4,56 ±0,12	4,76 ±0,30	4,25 ±0,677	4,48 ±0,626	5,25 ±0,39	4,99 ±1,12	6,6 ±0,50	6,93 ±0,71*
Креатинин, ммоль/л	118,31 ±9,5	113,61 ±9,76	112,4 ±14,72	118,1 ±10,7	232,95 ±18,4***	262,4 ±13,06***	221,45 ±43,45	232,4 ±6,16*	251,73 ±3,97**
Щелочная фосфатаза, Ед/л	291,85 ±6,1	297,41 ±5,05	297,7 ±5,22	304,3 ±23,7	402,13 ±25,4**	480,3 ±22,96***	307,0 ±26,07	589,73 ±1,77*	609,41 ±3,0***
Билирубин прямой, Ед/л	2,1 ±0,37	2,28 ±0,3	2,18 ±0,35	2,28 ±0,32	3,117 ±0,21*	3,367 ±0,30*	2,66 ±0,21	2,7 ±0,11	2,43 ±0,23

*P>0,05; ** P>0,01; *** P>0,001

Подобные изменения в картине крови мы связываем с длительным применением тестируемого антибиотика, в том числе в увеличенной дозе. Как известно, макролидные антибиотики являются одной из самых безопасных групп антимикробных препаратов и характеризуются хорошей переносимостью. Тулатрин относится к числу безопасных лекарственных средств, собственная гепатотоксичность, свойственна всем препаратам этой группы (макролидам), в связи с их применением в высоких дозах или длительного использования. В этом случае возможен риск развития нарушений функции печени [7, 8]. Следует отметить, что повышение AST происходит на фоне некоторого снижения ALT и нормального уровня билирубинов, также максимальное изменение указанных показателей не превышает 10 % от границ нормы. Принимая во внимание, что клиническое значение имеет повышение печеночных проб в 2-3 раза, можно предположить, что в данном случае изменение уровня ALT и AST не имеет диагностического значения или повреждение печени носит следовой характер.

Как известно тулатромицин имеет способность взаимодействовать с CYP3A4-один из наиболее важных ферментов, участвующих в метаболизме ксенобиотиков и в основном находится в печени и кишечнике. Его целью является окисление небольших чужеродных органических молекул, таких как токсины или лекарства с тем, чтобы их можно было вывести из организма. Тулатромицин метаболизируется в печени при участии фермента CYP3A4- с образованием реактивных нитрозоалкановых форм, которые связываются с цитохромом Р-450. Образование комплекса метаболит-активный центр фермента приводит к необратимому угнетению активности цитохрома Р-450 [6]. В связи с этим, при длительном применении препарата и в повышенных дозах регистрируется повышение таких биохимических показателей как AST, глюкозы, общего белка и ЩФ Повышение креатинина и мочевины в организме опытных животных не превышает 10 % от верхней границы нормы, что малоинформативно с точки зрения оценки наличия повреждения почек. Также увеличение общего белка не носило фатального характера и не сказывалось на изменении клинического статуса животных. Мы не отмечали падежа животных и проявления клинических признаков интоксикации и гепатопатии.

Повышение этих показателей характерно для длительного применения антибиотиков, в том числе, в больших дозах.

Заключение. Установлено, что длительное внутримышечное применение препарата Тулатрин в терапевтической и трёхкратной терапевтической дозе не оказывает на организм свиней выраженного патологического действия. Во время проведения опыта не отмечали падежа животных и проявления клинических признаков интоксикации (угнетение, рвота, слюнотечение, диарея и др.). Животные были активные и хорошо поедали корм. Живая масса поросят, находящихся в опытных группах, достоверно не отличается от животных, которые содержались в контрольных группах.

Установлено, что наиболее чувствительной к действию тулатромицина при длительном поступлении препарата в повышенных дозах является печень, что подтверждается результатами биохимических исследований. Однако, собственная гепатотоксичность, связанная с применением в высоких дозах или длительным использовании, свойственна всем препаратам группы макролидов. Следует отметить, что в данном случае максимальное повышение маркерных печеночных ферментов не превышает 10 % от верхней границы нормы, поэтому можно сказать, что повреждение печени носит следовой характер, так как клиническое значение имеет повышение печеночных проб как минимум в 2 раза. Также увеличение общего белка не носило фатального характера и не сказывалось на изменении клинического статуса животных. Мы не отмечали падежа животных и проявления клинических признаков интоксикации и гепатопатии.

Тулатрин относится к числу безопасных лекарственных средств, и характеризуется хорошей переносимостью. Полученные результаты подтверждают безопасность применения препарата в рекомендуемом режиме дозирования.

Резюме

Высокоэффективным и наиболее рациональным инструментом контроля инфекционных заболеваний в условиях крупного промышленного свиноводства принято считать массовую антибактериальную терапию, осуществляемую по лечебнопрофилактическим схемам. Установлено, что длительное внутримышечное применение препарата Тулатрин в терапевтической и трёхкратной терапевтической дозе не оказывает на организм свиней выраженного патологического действия. Во время проведения опыта не отмечали падежа животных и проявления клинических признаков интоксикации (угнетение, рвота, слюнотечение, диарея и т.п.). Животные были активные и хорошо поедали корм. Живая масса поросят, находящихся в опытных группах достоверно не отличается от животных, которые содержались в контрольных группах. Наиболее чувствительной к действию тулатромицина при длительном поступлении препарата в повышенных дозах является печень, что подтверждается результатами биохимических исследований. Однако, собственная гепатотоксичность, связанная с применением в высоких дозах или длительным использовании, свойственна всем препаратам группы макролидов. Следует отметить, что в данном случае максимальное повышение маркерных печеночных ферментов не превышает 10 % от верхней границы нормы, поэтому можно сказать, что повреждение печени носит следовой характер, так как клиническое значение имеет повышение печеночных проб минимум в 2 раза. Также увеличение общего белка не носило фатального характера и не сказывалось на изменении клинического статуса животных. Мы не отмечали падежа животных и проявления клинических признаков интоксикации и гепатопатии. Тулатрин относится к числу безопасных лекарственных средств, и характеризуется хорошей переносимостью. Полученные результаты подтверждают безопасность применения препарата в рекомендуемом режиме дозирования.