Седативная активность водных экстрактов некоторых представителей рода Melampyrum L

Актуальной проблемой фармацевтической науки является поиск новых эффективных средств для лечения заболеваний нервной системы, которые возникают в современном обществе вследствие стрессовых состояний, обусловленных неблагоприятной экологической обстановкой, несбалансированным режимом труда и отдыха, неправильным питанием, а также наследственной предрасположенностью. Невротические состояния, вызываемые разного рода негативными стрессовыми воздействиями, зачастую приводят к развитию тяжелых хронических заболеваний пищеварительной, эндокринной, сердечно-сосудистой систем.

Практически все современные препараты вызывают побочные действия и осложнения, кроме того, при длительном применении возможно возникновение лекарственной зависимости [13]. Поэтому интерес представляют препараты, полученные на основе лекарственного растительного сырья, содержащие комплекс биологически активных веществ, имеющие большую терапевтическую широту и обладающие уникальным сочетанием свойств. Известно, что седативные препараты растительного происхождения не вызывают миорелаксации, атаксии, сонливости, явления психической и физической зависимости, оказывают регулирующее влияние на центральную нервную систему (ЦНС_, усиливают процессы торможения и понижают процессы возбуждения. Усиливают действие анальгетиков и других

ноотропных успокаивающих средств. Снотворного действия не оказывают, но обеспечивают наступление нормального сна [12].

Среди дикорастущих растений, влияющих на нервную систему, выделяют виды рода Melampyrum L.. Марьянник лесной Melampyrum sylvaticum и марьянник луговой Melampyrum pretense, которые широко распространены на территории России и имеют достаточную сырьевую базу [3]. Благодаря своим уникальным свойствам эти растения широко применяются в народной медицине в качестве седативных и противосудорожных средств. Надземную часть растений используют для получения водных извлечений (настои, отвары), которые в малых дозах назначают в качестве эффективных средств при заболеваниях сердечно-сосудистой и нервной системы [11]. Широкое применение марьянников в народной медицине и очень малая изученность в химическом и фармакологическом отношении, сделали данные растения объектом исследования ученых. Изучение биологической активности растений рода марьянник активно проводились учеными Башкирского государственного медицинского института и показали перспективность дальнейших исследований. Было установлено, что м. луговой оказывает седативное, нейролептическое и противосудорожное действие. Настой травы усиливает парасимпатическую иннервацию, вызывает успокаивающее действие, напоминающее действие транквилизаторов [6]. Настой м. лугового действует тонизирующим образом на парасимпатическую иннервацию, усиливая влияние вагуса на сердце, и снимает ганглиоблокирующее действие камфоры [10]. М. луговой (настой) угнетает ЦНС у крыс, обладает нейролептическими свойствами; вызывает удлинение латентного периода и более быстрое угасание условных рефлексов, оказывает отчетливое успокаивающее действие без снотворного эффекта [5]. Было установлено, что успокаивающий эффект растения напоминает действие транквилизаторов. По седативному действию марьянник сильнее настоя валерианы [6].

В настоящее время проводится ряд научных исследований о возможности их использования, как лекарственных растений в научной медицине [2, 7, 9].Эффективность использования марьянников в народной медицине при лечении заболеваний нервной системы а также сведения об изучении биологичекой активности экстракционных препаратов указывает на перспективность дальнейшего изучения фармакологического действия этих растений.

Цель работы: изучение седативной активности экстрактов марьянника лесного и лугового семейства норичниковые.

Материалы и методы. Из растительного сырья (надземной части с корнями м. лугового и м. лесного) методом исчерпывающей экстракции были получены водные извлечения, которые затем упаривали до сухого остатка в ротационном вакуумном испарителе. Поученные сухие экстракты были исследованы на наличие седативной активности. В качестве препарата сравнения использовали экстракт валерианы.

Эксперименты выполняли на 40 белых беспородных мышах обоего пола массой 20-25 г. Животные содержались на стандартном пищевом рационе вивария в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» и требованиями Фармкомитета РФ к проведению доклинических испытаний. Опыты на животных выполнены в соответствии с Европейской конвенцией по защите и использованию позвоночных животных для экспериментальных и других целей EST №123 (1986 г.), ст.37 и ст.40 Федерального закона «О лекарственных средствах» (1998 г.), «Правилами лабораторной практики в Российской Федерации» (2003 г.). Животные содержались в контролируемых условиях окружающей среды при температуре воздуха +18-26оС, влажности не более 50%, объеме воздухообмена (вытяжка - приток) – 8:10. В комнате поддерживался 12-часовой цикл освещения. Животные находились в стандартных пластиковых клетках, в качестве подстила использовалась резаная автоклавированная бумага. Регулярно проводилась рутинная проверка подстила на микробиологические загрязнения. Животные адаптировались в лаборатории в течение 10 дней до начала введения исследуемых веществ.

За 5 дней до начала эксперимента регистрировали исходные характеристики поведения мышей, после чего животные были разделены на 4 группы. Животные распределялись по группам рандомизированно. В качестве критерия принималась масса тела таким образом, чтобы ее индивидуальное значение не отклонялось от среднего значения в пределах одного пола более, чем на 10%. Измерение поведенческих показателей в каждой из четырех групп животных проводили до начала эксперимента (контроль), и далее через 10, 20 и 30 дней после приема препаратов.

В результате ранее проведенных исследований было выявлено, что экстракты марьянников лугового и лесного проявляют противосудорожную и гипотензивную активность в дозе 100 и 200 мг/кг [2, 4]. Представляло интерес изучить экстракты в данных дозировках на наличие седативной активности. В качестве препарата сравнения использовали экстракт валерианы. Согласно международной практике, терапевтическая доза экстракта валерианы составляет от 300 мг до 1 г. Дозы менее 100 мг оказывают эффект плацебо [8]. Препараты вводили перорально в виде водного раствора или суспензии. Животным первой (контрольной) группы вводили изотонический раствор натрия хлорида в дозе 1 мл/кг, второй и третьей – экстракты м. лесного и лугового соответственно в дозе 200 мг/кг, животным четвертой группы - экстракт валерианы в дозе 0,015 мг/кг, что соответствует средней терапевтической дозе [15]. Экстракты и изотонический раствор натрия хлорида вводили ежедневно в одно и то же время утром в течение месяца.

Активность оценивали в тесте «Открытое поле». Исследование проводили в специальной камере белого цвета, диаметром 34 см и высотой 17 см. Пол камеры разбит на окружности и сектора, расстояния между которыми соизмерим с размерами мышей. За 1 час до тестирования животных помещали в слабо освещенное место, в подготовительный период с животными никаких манипуляций не проводили. Во время тестирования животное помещали на один из периферийных квадратов открытого поля. Исследование проводили до начала эксперимента, а затем каждые 10 дней в течение 1 месяца. Оценивали влияние экстрактов на горизонтальную активность (по числу выходов животного в центр площадки и переходов по секторам переферии), вертикальную активность (по числу «вертикальных стоек» - вставание мышей на задние лапки), на наличие груминга (количество приближений передних лап ко рту и их облизывание – короткий груминг; чистка передней части морды, тела – длительный груминг) [14]. Статистическую обработку данных фармакологического эксперимента проводили с применением программы STAT по критерию Стъюдента, эффект считали достоверным при Р ≤ 0,05.

Результаты и обсуждение. Результаты, полученные в ходе проведенного эксперимента показывают, что при длительном применении (в течение месяца) водных экстрактов растений рода Марьянник наблюдается спад как вертикальной, так и горизонтальной активности. Установлено, количество «вертикальных стоек» с упором на стенку снижается примерно на 50%, а без упора на стенку – с 60% до 90% по сравнению с контрольной группой. При этом снижение вертикальной двигательной активности под влиянием настойки валерианы с упором на стенку отмечено лишь на 25%, а без упора – на 60% (рис. 1). Уменьшение числа «вертикальных стоек» у животных под влиянием экстрактов свидетельствует о седативном действии [1].

Рис. 1. Количество «вертикальных стоек» с упором на стенку

После 10 дней приема экстракта валерианы происходит снижение вертикальной активности на 50% (рис. 2). Отмеченный эффект усиливается после 20 дней приема и несколько снижается после 30 дней. Достоверное снижение вертикальной активности под действием экстракта м.лугового было отмечено после двадцатидневного приема. Экстракт м.лесного достоверно снижает двигательную активность на 50% после десятидневного приема, что сопоставимо с действием экстракта валерианы, при дальнейшем использовании эффект несколько усиливается.

Горизонтальная двигательная активность (по числу выходов в центр площадки) при переходе из сектора в сектор в сравнении с контрольными измерениями после месячного приема экстрактов уменьшилось с 64% (экстракт м. лесного) до 89% (экстракт м. лугового) (рис. 3). Под действием экстракта валерианы произошло уменьшение выходов в центр на 80%.

На рис. 4 показано изменение груминга под влиянием приема исследуемых препаратов. В сравнении с результатами контрольных изме- рений, проведенных в каждой группе животных, количество актов груминга после приема экстрактов марьянника лугового и лесного значительно увеличивается, что свидетельствует о снижении состояния повышенной тревожности животных. Изменение общей двигательной активности в % приведено на рис. 5. В результате длительного приема экстрактов наблюдается закономерное снижение активности животных в сравнении с контрольной группой и с показателями активности в каждой из групп до опыта.

Рис. 3. Горизонтальная активность (по числу выходов в центр площадки)

Рис. 4. Акты груминга

Рис. 5. Общая двигательная активность, %

Выводы: результаты проведенного эксперимента свидетельствуют об угнетении ориентировочно-исследовательского поведения животных под влиянием экстрактов марьянников. Полученные данные показывают, что действие водных экстракционных препаратов из травы Melampyrum sylvaticum и Melampyrum pratense подобно действию экстракта валерианы и является статистически достоверным. Наличие седативного действия наряду с гипотензивной и противосудорожной активностью позволяет рассматривать представителей рода Melampyrum как источник эффективных средств комплексного действия для лечения заболеваний нервной системы.