Сезонные содержания и изменчивость эритроцитарных параметров овцематок романовской породы в условиях Кузбасса

Романовская порода овец происходит от североевропейской короткохвостой овцы [3]. Порода обладает хорошими производственными показателями, высокой плодовитостью, широко используется в программах скрещивания для улучшения признаков других пород овец во всех странах [3, 4, 5], характеризуется высокими адаптивными свойствами, что обуславливает её широкое географическое распространение. Однако в более ранних исследованиях было отмечено угнетающее влияние чрезмерной летней жары на активность самцов и плодовитость самок романовской породы [6]. К настоящему времени особенности чувствительности млекопитающих, и в частности, мелких жвачных описан достаточно подробно [7]. Степень чувствительности зависит от различных факторов, главным образом от физиологического состояния организма, гормонального статуса, породы, возраста [7, 8, 9].

Взаимосвязь гематологических показателей с сезоном года может быть обусловлена не только температурным фактором, влажностью, атмосферным давлением, но и связана с колебаниями мелатонина. В последние годы активно обсуждаются оказываемые им иммуномодулирующее, антиоксидантное действия, антиапоптотический и противовоспалительный эффекты, включая влияние на гематологические, в том числе эритроцитарные параметры [10].

Сезонные эффекты в изменении гематологического статуса могут быть обусловлены изменениями парциального давления кислорода. При состояниях, связанных со снижением поступающего в организм кислорода, количество эритроцитов возрастает вследствие перераспределения крови из физиологических депо и увеличения секреции эритропоэтинов в красном костном мозге. Цирканнуальные колебания температуры воздуха, циркадные ритмы влияют на уровень потребление кислорода организмом животных [11].

Кроме того, в овцеводстве остаётся актуальной проблема, связанная с сезонными паразитарными инфекциями, оказывающими нега-гативное влияние на гематологический статус. Такие инфекции представляют собой серьезную угрозу для здоровья и продуктивности овец. Самые высокие показатели инфицирования приходятся на лето поскольку температура и влажность определяют эпидемиологию паразитарных инфекций [12].

Природные условия Кузбасса характеризуются выраженной сезонной сменой внешних факторов. Наиболее ярко отличия по температуре и продолжительности дня проявляются летом и зимой. Жизнедеятельность организма сельскохозяйственных животных, разводимых в резко-контитентальном климате Кузбасса, связана с напряжением регуляторных, гомеостатических и эффекторных систем. Исходя из этого, значительный интерес представляет оценка неспецифических и специфических компонентов адаптивных механизмов организма овец во время сезонных изменений, в том числе на основе эритроцитарных параметров.

Цель исследования заключалась в оценке содержания и изменчивости показателей эритроцитарного звена гемограммы с учетом сезона года у овцематок романовской породы, разводимых в Кузбассе.

Условия, материалы и методы. Объектом исследования были овцы романовской породы. Эритроцитарные параметры были изучены в зимний и летний период у чистопородных не суягных овцематок в возрасте 18±1 месяцев, выращиваемых на территории Кузбасса. Экспериментальный период длился с февраля 2022 года по август 2022 года и включал два климатических сезона: зиму и лето. Среднемесячная температура февраля в Кузбассе составляет -14 ... -21°С, в июле -от +17°С до +22°С. Зона районирования овец имеет благоприятный экологический статус [13].

Содержание овцематок осуществлялось изолированно от баранов в специально оборудованных загонах с использованием соломы в качестве подстилочного материала. Животным был обеспечен беспрепятственный доступ к источникам воды. Кормление осуществлялось в соответствии с нормативами для романовской породы овец. Масса тела варьировала в диапазоне от 46 до 56 кг. У овцематок не наблюдалось клинических признаков заболевания, ректальная температура была 38,5±0,4°С.

Венозную кровь отобрали из яремной вены у 31 овцы в июле (до начала полового сезона) и у 35 голов в феврале (после окончания) в вакуумные пробирки Lab-Vac с К2ЭДТА, производитель: Shandong Chengwu Medical Products Factory (Китай). Объём пробок 4 мл.

При венепункции использовали иглы 20 калибра (20G×1 ½ (0,9×38 мм), производитель Zhejiang Gongdong Medical Technology Co. (Китай). Забор крови у овцематок проводился ветеринарным врачом в утреннее время после голодной паузы в соответствии с правилами асептики.

Все применимые международные, национальные и институциональные принципы ухода и использования животных были соблюдены.

Лабораторные исследования проведены в учебно-научной лаборатории биохимии и генетики кафедры ветеринарной генетики и биотехнологии Новосибирского ГАУ. Анализ параметров красной крови проводился на гематологическом анализа- торе PCE-90VET, программа «Овцы», режим цельная кровь.

Статистическая обработка данных включала проверку на соответствие нормальному распределению с использованием критерия Шапиро-Уилка и графического сравнения двух распределений Q-Q плот. Выявление выбросов проводили тестом Тьюки, гомоскедастичность дисперсий – тестом Левена. При нормальном распределения межгрупповые сравнения осуществляли с помощью критерия Стьюдента, в иных случаях использовали критерий Манна-Уитни. Расчеты проводились в программах Exсel и среде R studio.

Результаты и обсуждение. Первоначально с помощью теста Тьюки исключены потенциальные выбросы. Результаты последующего тестирования характера распределения с помощью теста Шапиро-Уилка (SW) и графиков кантиль-квантиль плот (Q-Q plot) с указанием числа наблюдений представлены на рисунке 1.

Нормальным распределением (SWp≥0,05) характеризовались в зимний сезон: общее число эритроцитов, средний объем эритроцита, среднее содержание гемоглобина в эритроците, средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах, ширина распределения эритроцитов; в летний сезон: гемоглобин, гематокрит, средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах.

Для всех изучаемых показателей по сезонам года представлены робастные показатели с расчётом 95% доверительного интервала (ДИ) для медианных значений методом бутстрэпа (табл. 1).

Биологическая вариация эритроцитарных параметров представляет собой естественные колебания количественных признаков, обусловленные генетическими, физиологическими и средовыми факторами. Представленные данные (табл. 1) свидетельствуют о значительной сезонной изменчивости эритроцитарных показателей у исследуемых овцематок романовской породы.

Медианные значения всех показателей за исключением числа эритроцитов выше зимой в сравнении с летним сезоном. Летом медиана RBC равна 7,4×10 ¹² /л, зимой – 3,98×10 ¹² /л. 95% доверительные интервалы медианных значений отражают аналогичные тенденции: в зимний период отмечается более узкий 95% ДИ, его относительная ширина составляет 6,5% от медианы, что, возможно отражает жесткую регуляцию в неблагоприятных условиях. Летом установлен широкий 95% ДИ для Ме, относительная ширина достигает 15,1%. Кроме того, можно отметить полное отсутствие перекрытия интервалов, абсолютное расстояние между ДИ составляет 2,13×10¹²/л.

Рисунок 1 - Результаты тестирования на нормальность распределения эритроцитарных параметров овцематок романовской породы в Кузбассе

Таблица 1 – Содержание и изменчивость эритроцитарных показателей несуягных овцематок романовской породы в Кузбассе

Показатель	Ме	Вариац. размах	IQR	Ме 95% ДИ	Ме	Вариац. размах	IQR	Ме 95% ДИ
	Зимний сезон				Летний сезон
RBCх10 1 2 /л	3,98	1,35	0,46	3,87- 4,13	7,4	5,9	2,2	6,26-7,38
Hb, г/л	114	33	10,5	107,1- 114,6	98	66	21,2	89,6-100,7
Ht, %	34,2	9,9	3,15	32,13- 34,37	29,4	19,8	6,45	26,89- 30,2
MCV, фл	81,5	45,83	13,9	77,8- 85,7	39,7	51,5	15,2	36,2-43,6
MCH, пг	26,8	17,2	4,2	25,8- 28,5	13,9	18,88	9,14	13,7-18,2
MCHC, г/л	348	96	35	338,2-357,8	339	65	22	332,4- 342,4
RDW, %	15,4	9,4	3,28	14,17-16,0	13,4	7,8	3,1	13,0-14,6

Примечание: Me – медиана; IQR – межквартильный размах; ДИ– доверительный интервал

Таблица 2 – Описательная статистика эритроцитарных показателей овцематок романовской породы в Западной Сибири

Показатель	x± Sx	σ	Cv	Ass	x± Sx	σ	Cv	Ass
	Зимний сезон				Летний сезон
RBC, х10 12 /л	3,99±0,05	0,328	8,22	-0,001				-0,772
Hb, г/л	110,7±2,07	11,1	19,9	-0,54	95,9±2,72	15,8	15,7	-0,02
Ht, %	33,21±0,62	3,4	10,1	-0,541	28,75±0,82	11,83	16,6	-0,028
MCV, фл	83,21±2,12	4,83	14,0	0,819				1,796
MCH, пг	27,62±0,75	4,02	14,6	0,635				1,068
MCHC, г/л	346,7±7,55	25,67	11,7	2,664	338,5±2,63	15,32	4,52	0,589
RDW, %	15,18 ±0,45	2,44	16,1	0,047				1,75

Примечание: x – средняя арифметическая; Sx – ошибка средней арифметической; σ – среднее квадратичекое отклонение; Cv – коэффициент вариации, %; Ass – показатель асимметрии.

Таблица 3 - Сравнительный анализ эритроцитарных показателей овцематок романовской породы в Западной Сибири

Показатель	U-test	St-test	p-value
Абсолютное число эритроцитов, 10 12 /л	84,5		4,12e-9*
Концентрация гемоглобина Hb, г/л		4,23	0,0000771*
Величина гематокрита Ht, %		4,61	0,0000931*
Средний объём эритроцитов MCV, фл	967		8,652e-11*
Среднее содержание Нb в эритроците, пг	900,5		1,992e-8*
Средняя концентрация Hb в эритроцитах, г/л	1,58		0,1188
Коэффициент распределения эритроцитов по ширине, %	650,5		0,03418*

Примечание: U-test - критерий Манна-Уитни, St-test - критерий Стьюдента для независимых выборок, *- p <0,05 - статистически достоверные различия.