Содержание биоаминов в тканях различных органов кроликов при недостатке аксотока в блуждающих нервах

В естественных условиях рост и развитие органов животных связаны с процессами дифференцировки, поэтому вполне обоснован интерес к анализу факторов, влияющих на эти процессы. Особое внимание уделяется взаимосвязи между нервными регуляторными системами и тканевым субстратом в ранний постнатальный период. Значительная роль в регуляции структурно-функционального развития органов отводится веществам, поступающим к тканям с током аксоплазмы, которые необходимы как для пополнения запасов метаболитов и ферментов в нервных окончаниях, поддержания возбудимости мембран аксона, регуляции функции синапсов посредством информационных макромолекул, так и передачи нервных импульсов с помощью доставки или локального синтеза нейромедиаторов (1).

В задачу наших исследований входило определение содержания биоаминов в тканях сердца, легких и печени кроликов в условиях дефицита аксотока в блуждающих нервах с целью выявления роли тока аксоплазмы в нервных волокнах при становлении биоаминного статуса тканей в постнатальном онтогенезе.

Методика . Объектом исследования служили две группы кроликов породы бабочка (опыт и контроль, по 18 гол. в каждой) в возрасте 10-120 сут. У животных опытной группы в 10-суточном возрасте блокаду тока аксоплазмы по волокнам блуждающих нервов вызывали воздействием колхицина по методу Волкова с соавт. (2). Для этого животных под наркозом фиксировали брюшком вверх, разрезали кожу по средней линии шеи и отделяли участок блуждающего нерва длиной 1 см, который помещали в чашечку, оформленную в операционной ране из вазелина и полиэтиленовой подложки. В чашечку заливали 30 мМ раствор колхицина на среде Рингера, который через 30 мин после начала аппликации удаляли вместе с чашечкой; мышцы и кожную рану зашивали. Заживление раны в основном происходило по первичному натяжению. Содержание биоаминов в тканях сердца, легких и печени определяли люминесцентно-гистохимическими методами по Falck с соавт. в модификации Крохиной с соавт. (серотонин и катехоламины) (3, 4), а также по Cross с соавт. (гистамин) (5). Для идентификации и количественной оценки содержания биоаминов использовали метод микрофлуорометрии; на люминесцентном микроскопе была установлена дополнительная насадка ФМЭЛ-1. Интенсивность свечения выражали в единицах флуоресценции (усл. ед.) по регистрирующей шкале усилителя. Статистический анализ проводили при использовании MS Excel 2000, оценку достоверности — по критерию Стьюдента.

Результаты . У интактных животных (контроль) в возрасте 10, 30, 45, 60, 90 и 120 сут содержание серотонина в эндокарде составляло соответственно 0,025 ± 0,001; 0,046 ± 0,001; 0,059 ± 0,001; 0,061 ± 0,001; 0,088 ± 0,001 и 0,125 ± 0,001 усл. ед.; стенке бронха легких — 0,142 ± 0,001; 0,131 ± 0,002; 0,099 ± 0,001; 0,195 ± 0,002; 0,084 ± 0,001 и 0,092 ± 0,001; паренхиме легких — 0,098 ± 0,001; 0,078 ± 0,001; 0,056 ± 0,001; 0,093 ± 0,001; 0,046 ± 0,001 и 0,038 ± 0,001 усл. ед. (рис., а). В стенках миокарда этот показатель в период 10-60 сут снижался от 0,126 ± 0,001 до 0,055 ± 0,001, но максимально возрастал до 0,153 ± 0,001 усл. ед. к 120-м сут; в гепатоцитах — повышался от 0,035 ± 0,001 до 0,090 ± 0,001 к 45-60-м сут и вновь снижался до 0,065 ± 0,001 усл. ед. к 120-м сут.

В контроле содержание гистамина в эндокарде животных в 10-, 30-, 45-, 60-, 90- и 120-суточном возрасте составляло соответственно 0,461 ± 0,008; 0,418 ± 0,006; 0,264 ± 0,003; 0,342 ± 0,007; 0,144 ± 0,004 и 0,331 ± 0,006 усл. ед.; миокарде — 0,126 ± 0,002; 0,222 ± 0,002; 0,358 ± 0,018; 0,552 ± 0,012; 0,132 ± 0,005 и 0,226 ± 0,012; стенке бронха легких — 0,262 ± 0,011; 0,311 ± 0,006; 0,337 ± 0,013;

0,399 ± 0,012; 0,276 ± 0,012 и 0,411 ± 0,012; паренхиме легких — 0,156 ± 0,012; 0,216 ± 0,002; 0,389 ± 0,014; 0,268 ± 0,015; 0,283 ± 0,011 и 0,248 ± 0,008; гепатоцитах — 0,415 ± 0,012; 0,398 ± 0,012; 0,337 ± 0,013; 0,586 ± 0,015; 0,214 ± 0,011 и 0,247 ± 0,001 усл. ед. (см. рис., б).

В эндокарде интактных кроликов содержание катехоламинов по периодам постнатального онтогенеза увеличивалось на 69,3 % (см. рис., в). Динамика содержания катехоламинов в миокарде была аналогична таковой в эндокарде. В стенке бронха этот показатель составлял 0,021 ± 0,001; 0,039 ± 0,001; 0,023 ± 0,001 и 0,045 ± 0,001 усл. ед. соответственно в возрасте 10, 45, 90 и 120 сут; в паренхиме легких — уменьшался от 0,035 ± 0,001 до 0,012 ± 0,001 к 90-м и увеличивался до 0,023 ± 0,001 усл. ед. к 120-м сут. Динамика содержания катехоламинов в гепатоцитах кроликов была аналогична таковой в паренхиме легких.

Возраст, суг

Возрастная динамика содержания серотонина (а) , гистамина (б) и катехоламинов (в) в тканях внутренних органов кроликов породы бабочка при блокаде аксотока в блуждающих нервах: I, II, III, IV, V — соответственно эндокард, миокард, стенка бронха, паренхима легких, гепатоциты; 1 и 2 — соответственно контроль и опыт.

Блокада тока аксоплазмы в волокнах блуждающих нервов животных в опыте сопровождалась следующими изменениями в тканях сердца: содержание серотонина в эндокарде было на 71,5 и 12,0 % выше, чем в контроле, соответственно в возрасте 30 и 45 сут; на 12,0; 68,2 и 48,0 % ниже — соответственно в возрасте 60, 90 и 120 сут; в стенке миокарда — на 15,0-69,6 % ниже во все возрастные периоды (Р < 0,001) (см. рис., а). В тканях легких также было отмечено снижение содержания серотонина в опыте: в стенке бронха — на 74,1; 81,9; 47,3; 16,7 и 53,3 % меньше (Р < 0,001), чем у интактных животных, соответственно в возрасте 30, 45, 60, 90 и 120 сут, причем наблюдалось повышение содержания серотонина к 3- и снижение к 4-месячному возрасту. В паренхиме легких динамика содержания серотонина у животных в опыте соответствовала таковой в стенке бронха. В гепатоцитах этот показатель уменьшался на 22,0 (Р < 0,01); 79,9 (Р < 0,001); 13,4 (Р < 0,001) и 38,5 % (Р < 0,001) соответственно в возрасте 30, 45, 60 и 90 сут, а в 4месячном возрасте, наоборот, возрастал у кроликов в опыте по сравнению с контролем.

В эндокарде животных опытной группы в возрасте 30 и 45 сут содержание гистамина составляло соответственно 0,087 ± 0,001 и 0,236 ± 0,012 усл. ед. (меньше, чем в контроле, Р < 0,001), в возрасте 60, 90 и 120 сут — 0,623 ± 0,026; 0,373 ± 0,005 и 0,340 ± 0,004 усл. ед. (больше, чем в контроле) (см. рис., б). Динамика содержания гистамина в миокарде животных в опыте была аналогична таковой в эндокарде. Содержание гистамина в стенке бронха у животных в опыте в возрасте 30 и 45 сут было соответственно на 69,8 и 32,4 % ниже, в возрасте 60 и 90 сут — на 15,3 и 14,6 % выше (Р < 0,001), чем в контроле; к 120-м сут этот показатель снижался на 19,3 %. Динамика содержания 112

гистамина в паренхиме легких была такой же, как в стенке бронха. Количество гистамина в гепатоцитах у животных в опыте было на 60,4; 32,4; 59,8; 40,2 % меньше (Р < 0,001) и на 4,3 % больше (Р < 0,01), чем в контроле, соответственно в возрасте 30, 45, 60, 90 и 120 сут.

Содержание катехоламинов в эндокарде кроликов в опыте не отличалось от контроля в возрасте 30 и 45 сут и составляло соответственно 0,010 ± 0,001 и 0,020 ± 0,001 усл. ед., затем возрастало к 60-м и 90-м сут до 0,023 ± 0,001 и 0,034 ± 0,001 (выше, чем в контроле) и уменьшалось к 120-м сут до 0,011 ± 0,001 усл. ед. (ниже, чем в контроле); динамика этого показателя в миокарде была аналогичной (см. рис., в). В стенке бронха содержание катехоламинов у животных в возрасте 30 и 90 сут было соответственно на 48,6 и 72,3 % выше; в возрасте 45 и 120 сут — на 33,4 % ниже в опыте, чем в контроле (Р < 0,001), и не отличалось от контроля в возрасте 60 сут. Динамика содержания катехоламинов в паренхиме легких оказалась такой же, как в стенке бронха. В гепатоцитах животных в опыте этот показатель был на 63,6 % ниже (Р < 0,001), на 20,6-54,9 % выше (Р < 0,01-0,001), чем в контроле, соответственно в возрасте 30, 4590 сут и не отличался от контрольных показателей в 4-месячном возрасте.

Таким образом, ткани сердца, легких и печени кроликов в процессе развития в постнатальном онтогенезе характеризуются неодинаковым содержанием биоаминов. Как известно, колхицин слабо диффундирует в перинервальном пространстве и не способствует увеличению количества нервных клеток ниже места аппликации (6). Следовательно, изменение содержания серотонина, гистамина и катехоламинов в исследуемых нами тканях связано с недостатком тока аксоплазмы в блуждающих нервах и в наибольшей степени выражено у животных в 30- и 45-суточном возрасте; в последующие периоды онтогенеза происходит восстановление тока аксоплазмы в нервных волокнах. Очевидно, что приток аксоплазмы по волокнам блуждающих нервов к различным тканям органов в постнатальном онтогенезе является необходимым условием поддержания оптимального содержания биоаминов.

Л И Т Е Р А Т У Р А

• 1.    Л ы с о в В.Ф. Постнатальное становление десимпатизированных сердца и почек у овец. В сб.: XVII съезд физиологов России. Ростов-на-Дону, 1998: 51-52.

• 2.    В о л к о в Е.М., Н а с л е д о в Г.А., П о л е т а е в Г.И. и др. Сравнительная характеристика электрофизиологических изменений мышечного волокна лягушки после денервации и после блокады аксоплазматического транспорта. Физиол. журн. СССР, 1977, 10: 1432-1434.

• 3.    F a l c k В., H i l l a r p N.A., T h i e m e G. e.a. Fluorescence of catecholamines and related compounds condensed with dormaldehyde. J. Hystochem. Cytochem., 1962, 10: 348-354.

• 4.    К р о х и н а Е.М., А л е к с а н д р о в П.М. Симпатический (адренергический) компонент эфферентной иннервации сердечной мышцы. Кардиология, 1969, 3: 97-102.

• 5.    C r o s s S.A., E w e n S.W., R o s t F.W. A study of methods available for cytochemical localization of histamine by fluorescence indeed with o-phtaldehyde or acetaldehyde. Hystchem. J., 1971, 3, 6: 471-476.

• 6.    З е ф и р о в Т.Л. Нервная регуляция сердечного ритма крыс в постнатальном онтогенезе. Автореф. докт. дис. Казань, 2000.

Чувашская государственная сельскохозяйственная             Поступила в редакцию 10

академия, 428000, Чебоксары, ул. К. Маркса, 29                             сентября 2002 года

BIOAMINES CONTENT IN TISSUES OF DIFFERENT RABBITS ORGANS IN THE CONDITIONS OF INADEQUATE AXOPLASM CURRENT IN VAGUS NERVES

S u m m a r y

The contents of serotonin, histamine and catecholamines in tissues of heart, lungs and liver in rabbits at the different periods of postnatal ontogeny were estimated. It was shown, that the character and the degree of changes of bioamines content are result in inadequate axoplasm current in vagus nerves, that become apparent in the most degree in 30-45 days-old animals. At the subsequent ontogeny period the axoplasm current in nerve fibers is restored.