Состояние иммунного статуса и метаболизма лимфоцитов у больных острым и хроническим гайморитами

Автор: Коленчукова О.А., Савченко А.А., Борисов А.Г., Кузнецов С.А., Бородина Н.А., Отто В.С.

Журнал: Сибирский журнал клинической и экспериментальной медицины @cardiotomsk

Статья в выпуске: 3-1 т.23, 2008 года.

Бесплатный доступ

Целью исследования явилась оценка изменений, происходящих в иммунной системе у больных хроническим гайморитом в стадии обострения и острым гайморитом. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали методом непрямой иммунофлуоресценции. Концентрацию иммуноглобулинов исследовали методом радиальной иммунодиффузии. Активность НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах определяли с помощью биолюминесцентного метода. У больных острым и хроническим гайморитами обнаружена иммунная недостаточность на фоне ряда как общих, так специфических изменений активности метаболических ферментов в лимфоцитах крови

Острый и хронический гайморит, иммунный статус, метаболизм лимфоцитов

Короткий адрес: https://sciup.org/14918871

IDR: 14918871

Текст научной статьи Состояние иммунного статуса и метаболизма лимфоцитов у больных острым и хроническим гайморитами

Патогенез гнойных воспалений околоносовых пазух сложен, а причины не всегда ясны, что вызывает затруднение в их лечении, частые рецидивы и осложнения. Острый гайморит является наиболее частым осложнением острой респираторной вирусной инфекции и стоит на одном из первых мест среди хронических заболеваний ЛОР-органов. В ряде случаев гаймориты отличаются упорным течением и трудно подаются консервативному лечению [1, 2]. Общая тенденция к росту воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух связана со снижением иммунореактивности населения. С другой стороны, хронические воспалительные реакции также способны нарушать функции иммунной системы [1, 3].

Целью данного исследования является оценка изменений, происходящих в иммунно-метаболическом статусе у больных хроническим гайморитом в стадии обострения и у больных острым гайморитом.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Под наблюдением находились 43 больных хроническим гайморитом (ХГ) в возрасте от 18 лет до 45 лет в острый период заболевания и 38 человек с острым гайморитом (ОГ). Тяжесть заболевания оценивалась с учетом выраженности клинических симптомов, а также на основании гематологических изменений периферической крови. Контрольную группу составили 32 практически здоровых человека аналогичного возрастного диапазона.

Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, CD16, CD72, HLA-DR (ТОО «Сорбент» г. Москва). Определение иммуноглобулинов А, М и G проводили методом радиальной иммунодиффузии в геле по Ман- чини. Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли по общепринятой методике.

Определение активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови проводили био-люминесцентным методом [4]. Данным методом определялась активность следующих ферментов: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глице-рол-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФДГ), малик-фер-мента (НАДФМДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и НАДН-ЛДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции малатдегидрогеназы (МДГ и НАДН-МДГ), НАДФ- и НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ и НАДФН-ГДГ), НАД- и НАДН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДГДГ и НАДН-ГДГ), НАДи НАДФ-зависимых изоцитратдегидрогеназ (НАДИЦДГ и НАДФИЦДГ, соответственно) и глу-татионредуктазы (ГР). Активность дегидрогеназ в лимфоцитах крови выражали в ферментативных единицах (1 Е=1 мкмоль/мин [5]) на 104 клеток.

Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Проверку гипотезы о статистической значимости различий исследуемых параметров проводили с помощью критерия Манна-Уитни. Статистическую обработку результатов осуществляли с помощью пакета прикладных программ Statistica 6.0 (StatSoft Inc., 2001).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В результате исследования показателей иммунного статуса обнаружено, что у лиц с хроническим гайморитом наблюдалось увеличение процентного содержания HLA-DR. При этом выявлено снижение показателей процентной концентрации лимфоцитов и абсолютного содержания CD3+-, CD4+-, CD8+-лимфоцитов, а также наблюдалось увеличение процентного содержания CD72+-лимфоцитов (табл.1). В группе лиц с острым гайморитом при анализе клеточного звена иммунитета не выявлено статистически значимых различий с группой контроля.

При сравнительном анализе показателей иммунного статуса в группах больных с ОГ и ХГ обнаружено увеличение процентной концентрации CD72+-лимфоцитов в группе больных ХГ относительно группы с ОГ. При исследовании гуморального звена иммунной системы у лиц с хроническим гайморитом обнаружено статистически значимое снижение показателей, характеризующих относительный уровень синтеза Ig А.

В группе больных острым гайморитом обнаружено снижение концентрации Ig А и показателя, характеризующего относительный уровень синтеза Ig А в сыворотке крови относительно группы контроля. При этом наблюдается увеличение ЦИК относительно контрольной группы.

Таблица 1

Показатели клеточного и гуморального иммунитета у лиц с хроническим и острым гайморитом (Ме; С25–С75)

Показатели	Группа контроля, n=32	Хронический гайморит, n=43	Острый гайморит, n=38
Показатели	1	2	3
Лейкоциты, 10⁹/л	5,75 (5,00-6,15)	6,02 (4,75-7,15)	5,78 (5,02-7,75)
Лимфоциты, %	42,0 (34,1-50,2)	31,0 (17,0-44,0), P 1 <0,05	36,5 (18,0-46,0)
Лимфоциты 10⁹/л	2,47 (1,74-3,01)	1,76 (1,11-2,96)	2,01 (1,21-2,84)
CD3 + , %	68,2 (64,1-70,0)	63,0 (60,0-70,0)	66,0 (60,0-74,0)
CD3 + , 10⁹/л	1,61 (1,17-2,07)	1,08 (0,72-1,70), P 1 <0,05	1,40 (0,75-2,01)
CD4 + , %	43,0 (37,0-47,0)	38,0 (31,0-44,0)	38,0 (34,0-45,0)
CD4 + , 10⁹/л	0,90 (0,68-1,29)	0,57 (0,42-0,89), P₁<0,01	0,74 (0,45-1,23)
CD8 + , %	26,0 (25,0-30,0)	24,5 (20,0-31,0)	24,5 (20,0-31,0)
CD8 + , 10⁹/л	0,58 (0,47-0,83)	0,45 (0,22-0,71), P 1 <0,05	0,49 (0,27-0,85)
CD16 + , %	18,0 (15,0-23,0)	18,5 (15,0-21,0)	17,5 (14,0-21,0)
CD16⁺, 10⁹/л	0,43 (0,33-0,57)	0,32 (0,20-0,48)	0,37 (0,18-0,64)
CD72 + , %	11,0 (10,0-14,0)	17,5 (14,0-20,0), P 1 <0,001	15,0 (11,0-18,0), P₂<0,05
CD72 + , 10⁹/л	0,26 (0,18-0,38)	0,28 (0,17-0,46)	0,25 (0,15-0,47)
HLA-DR + , %	14,0 (11,0-19,0)	20 (16,0-25,0), P₁<0,01	18 (13,0-23,0)
HLA-DR + , 10⁹/л	0,34 (0,23;0,50)	0,41 (0,32-0,63)	0,50 (0,36-0,71)
CD4 + /CD8 +	1,59 (1,44-1,74)	1,52 (1,11-1,95)	1,60 (1,05-2,16)
Ig A, г/л	1,62 (1,31-2,68)	1,31 (1,00-1,88)	1,31 (0,87-1,73), ^<0,01
Ig M, г/л	1,05 (0,31-1,31)	0,82 (0,54-1,33)	1,26 (0,82-1,54)
Ig G, г/л	9,91 (6,68-12,12)	7,35 (6,51-10,04)	7,97 (6,59-10,64)
Ig A/CD72 + , нг/клетку	8,14 (5,27-10,75)	3,90 (2,19-7,93), ^<0,01	4,24 (2,27-8,76), P 1 <0,002
Ig M/CD72 + , нг/клетку	3,78 (1,21-7,58)	2,72 (1,72-4,46)	3,84 (1,46-7,63)
Ig G/CD72 + , нг/клетку	37,36 (25,03-54,55)	26,52 (14,51-51,38)	28,26 (17,04-53,12)
ЦИК, о.е.	15,01 (6,02-28,11)	16,02 (8,00-48,05)	18,00 (11,50-76,00), P 1 <0,05

Примечание: Р1 – статистически значимые различия с контрольной группой; Р2 – статистически значимые различия с группой больных хроническим гайморитом.

При определении особенностей метаболизма при ОГ и ХГ было обнаружено снижение таких ферментов, как Г6ФДГ – ключевого фермента пентозофос-фатного цикла, нарабатывающего интермедиаты для реакций макромолекулярного синтеза [6] и МДГ фермента, характеризующего интенсивность субстратного потока по циклу трикарбоновых кислот [5], что позволяет предположить у больных в лимфоцитах крови уменьшение интенсивности аэробного дыхания и обменных процессов в митохондриальном компарт-менте (табл. 2).

Низкая активность НАДФН-ГДГ (восстановительное аминирование 2-оксоглутарата) свидетельствует о понижении оттока субстратов с цикла трикарбоновых кислот на реакции аминокислотного обмена в лимфоцитах у лиц с ОГ. Наблюдаемое повышение активности НАДФМДГ в группах больных, возможно, необходимо в целях компенсации недостаточности метаболических реакций в цикле Кребса в качестве шунтирования ряда ферментативных реакций ли-24

монного цикла. Особенностью метаболизма лимфоцитов у больных ХГ является увеличение активности Г3ФДГ. Этот фермент, характеризует уровень переноса продуктов липидного катаболизма на реакции анаэробного окисления глюкозы [5, 7]. Следовательно, у больных с ХГ увеличена субстратная стимуляция гликолиза, что также может определяться сниженным уровнем субстратного потока по гликолитическому пути. У больных ХГ относительно группы больных с ОГ имеет место увеличение активности аэробной реакции ЛДГ, которая определяет недостаточную способность лимфоцитов больных с ОГ метаболизировать эндогенный лактат и, в целом, в связи с ингибированием гликолиза ведет к понижению уровня наработки пирувата.

Таким образом, у больных хроническим гайморитом обнаружены более выраженные изменения иммунного статуса, чем у больных острым гайморитом. Состояние метаболизма лимфоцитов при гайморитах характеризуется снижением активности МДГ, но при

Таблица 2

Активность НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ (мкЕ) в лимфоцитах крови у больных хроническим и острым гайморитом (Ме; С25-С75)

Фермент	Группа контроля, n=32	Хронический гайморит, n=43	Острый гайморит, n=38
Фермент	1	2	3
Г6ФДГ	2,14 (0,56-10,75)	2,30 (0,07-10,72)	0,29 (0,03-4,03), P 1 <0,05
Г3ФДГ	0,01 (0,01-0,93)	1,04 (0,01-2,12), P 1 <0,05	0,12 (0,01-1,15)
ЛДГ	6,90 (1,93-16,75)	11,80 (4,91-18,67)	5,61 (1,13-13,33), P₂<0,05
НАДФМДГ	0,06 (0,01-9,62)	1,28 (0,01-19,87), P₁<0,01	1,33 (0,02-17,47), P 1 <0,05
НАДФГДГ	0,01 (0,001-0,01)	0,01 (0,01-0,16)	0,01 (0,01-0,11)
НАДФИЦДГ	1,14 (0,01-11,3)	0,95 (0,01-3,61)	0,79 (0,01-2,22)
МДГ	54,50 (13,31-153,46)	7,94 (1,07-27,51), P 1 <0,001	6,17 (0,01-41,19), P₁<0,01
НАДГДГ	9,52 (0,05-31,31)	2,09 (0,01-9,14)	3,04 (0,01-30,46)
НАДИЦДГ	0,01 (0,01-1,96)	0,04 (0,01-5,39)	0,19 (0,01-1,71)
НАДН-ЛДГ	3,24 (0,01-12,14)	12,47 (0,01-36,44)	3,36 (0,01-85,66)
НАДН-МДГ	3 8,46 (9,96-107,66)	48,34 (12,72-87,94)	62,19 (10,19-111,31)
ГР	1,53 (0,61-4,41)	0,99 (0,01-7,43)	1,45 (0,01-11,1)
НАДФН-ГДГ	4,55 (0,26-10,68)	6,39 (0,01-40,91)	7,47 (0,11-44,05), P 1 <0,05
НАДН-ГДГ	7,71 (3,38-29,38)	3,19 (0,21-28,26)	3,75 (0,63-11,04)

ХГ также наблюдается повышенный уровень катаболических процессов.

Список литературы Состояние иммунного статуса и метаболизма лимфоцитов у больных острым и хроническим гайморитами

Сединкин А.А. Острое воспаление слизистой оболочки носа и околоносовых пазух//Вестник оториноларингологии. -2000. -№ 3. -С. 6-11.
Игнатьева Г.А. Иммунная система и патология (лекция)//Патологическая физиология и экспериментальная терапия. -1997. -№ 4. -С. 26-37; -1998. -№ 1. -С. 35-42.
Крюков А.И., Жуховицкий В.Г. Гнойновоспалительные заболевания уха, горла, носа и верхних дыхательных путей: актуальность проблемы и пути решения//Вестник оториноларингологии. -2004. -№ 1. -С. 3-4.
Савченко А.А., Сунцова Л.И. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови биолюминесцентным методом//Лаб. дело. -1989. -№ 11. -С. 23-25.
Берёзов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия,. -М.: Медицина, 1998. -704 с.
Park I., Choe S.C., Choi A.H. et al. Increase in Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase in Adipocytes Stimulates Oxidative Stress and Inflammatory Signals//Diabetes. -2006. -Vol. 55. -P. 2939-2949.
Ikemoto A. Glycolysis and Glutamate Accumulation into Synaptic Vesicles. Role of glyceraldehydes phosphate dehydrogenase and 3-phosphphoglycerate kinase//J Biol Chem. -2003. -Vol. 278, № 8. -P. 5929-5940.

Еще

Статья научная