Сравнительный анализ экстрагентов для пробоподготовки хмелепродуктов при определении индекса хранения

Funding : The study was conducted under state assignment No. FGUS-2022-0004 by the Federal State Budget Scientific Institution V.M. Gorbatov Federal Scientific Center of Food Systems of the Russian Academy of Sciences.

Введение. Растительное сырье, применяемое в пивоварении, включает в себя зерновое (соложеные и несоложеные злаки), сахаросодержащее (сахар, патоку, различные сиропы) сырье и хмелепродукты. Органические соединения, содержащиеся в сырье, формируют структуру пивоваренной продукции и напрямую влияют на ее показатели качества и стойкость. С точки зрения биохимических процессов технологии важными соединениями хмелепродук-тов являются горькие смолы (α- и β-кислоты), фенольные соединения, фракция эфирных масел и ферменты. Основными горькими соединениями хмеля, переходящими в пиво, являются изо-α-кислоты в виде цис- и транс-изомеров [1]. Известно, что готовое пиво содержит 30– 50 % горьких изомеризованных кислот в своем составе от первоначального уровня [2]. Суммарное содержание полифенолов в шишках хмеля находится в диапазоне от 3 до 8 % и определяется такими факторами, как тип и сорт хмеля, почвенно-климатические условия, генерация и пр. [3]. С помощью горьких и фенольных соединений происходит формирование структуры (пенообразование, стабилизация азотистых, лабильных и способных к окислению соединений) и органолептического профиля пива (совокупность ощущений горечи, полнота вкуса пива совместно с соединениями зернового сырья) [4]. Полифенольные соединения включают мультифидолы, флавонолгликозиды, флаван-3-олы, фенольные кислоты [3]. Каждая группа фенольных соединений характеризует качество как самого хмелепродукта, так и влияет на показатели пива [3]. Мультифидолы служат промежуточными продуктами биосинтеза горьких кислот хмеля из аминокислотных предшественников с разветвленной цепью, и поэтому ацильные боковые цепи мультифидол-глюко-пиранозидов идентичны боковым цепям альфа-кислот (ко-, ад- и н-гумулона), с одной стороны, и как горькие молекулы, осуществляющие вклад в суммарное ощущение горечи пива с пороговой концентрацией распознавания 1,8 мг/дм3 для ко-мультифидол-глюкозида и 3,7 мг/дм3 для ад-мультифидол-глюкозида [5]. Флавонолгликози-ды и их агликоны - подгруппа фенольных соединений, содержатся в хмеле в количестве до 1 % и зависят от сорта хмеля [3]. В их состав входят глюкозиды кверцетина и кемпферола, также влияющие на суммарное ощущение горечи пива [4]. Флаван-3-олы (мономерные катехины (до 0,2 %), эпикатехины, галлокатехины), мономерные антоцианогены (Bi, B2, B3 и B4) влияют на цвет пива и его стабильность [4]. Пренилфлавоноиды (ксантогумол, 6- и 8-пре-нилнарингенины) представляют еще один класс флавоноидов хмеля, предшественниками которых является десметилксантогумол [6], они также вносят вклад в образование горечи пива, особенно при «холодном» охмелении [1]. Фенольные кислоты как вторичные растительные метаболиты хмеля образуются путем синтеза из бензойной и коричной кислот и способствуют образованию соединений-предшественников, влияющих на вкус пива [1]. Содержание фенольных кислот не превышает 1 мг/100 г хмеле-продуктов [3]. Поскольку полифенольные соединения представляют собой вторичные метаболиты хмеля, они могут быть биохимически связаны с горькими кислотами, по строению представляющими собой мультифидольные глюкозиды [7]. Поэтому важными показателями для оценки качества хмелепродуктов служат содержание горьких смол (гумулонов и лупулонов), содержание фенольных соединений, а также индекс хранения.

Индекс хранения хмеля - международный общепринятый показатель, характеризующий состояние органических соединений хмелевой матрицы и оценивающий степень окисленности горьких соединений [8]. Преобразовываться соединения, особенно горькие смолы, могут при ненадлежащей температуре хранения [9]. Применение окисленных хмелепродуктов влечет за собой низкую стойкость пивоваренной продукции, нежелательные тона во вкусе и аромате, повы- шенную цветность готовой продукции [10]. Поэтому контроль его изменения очень важен с точки зрения производственного использования.

Для аналитических лабораторий, как независимых, так и производственных, в сложившихся условиях возникла необходимость разработки отечественной методики определения индекса хранения хмеля, поскольку общепринятая методика ЕВС не может использоваться в качестве аттестованного метода определения.

В качестве начального этапа исследования целесообразно провести поиск альтернативных экстрагентов метанолу и толуолу, поскольку их применение предусматривает особые условия хранения, высокую стоимость и ограниченность предложений соответствующих веществ по степени очистке, а также длительное время ожидания.

Цель исследования - провести сравнительный анализ экстрагентов для измерения показателей индекса хранения хмелепродуктов.

Задачи : получить показатели качества образцов гранулированного хмеля путем определения содержания горьких смол (а- и в-кислот), фракций полифенольных соединений, индекса хранения; провести математический анализ для исследования степени влияния органических соединений, типа экстрагента и типа гранулированного хмеля на изменение значения индекса хранения хмелепродуктов.

Объекты и методы. С целью проведения валидации пробоподготовки для метода определения индекса хранения хмелепродуктов на первом этапе осуществляли определение данного показателя и групп горьких смол в образцах гранулированного хмеля разных сортов с применением трех экстрагентов (смеси толуола и щелочного метанола по методу ЕВС, гексана и лигроина 70/120), далее на основании полученных результатов проводили многофункциональный корреляционно-регрессионный анализ для исследования влияния фенольных соединений на измерение показателя индекса хранения.

Объект исследования - образцы гранулированного хмеля типа 90, выращенного в Липецкой области в 2025 г., следующих сортов: Магнум (горький тип), Перле (горько-ароматный тип), Традиционный (ароматный тип). После получения гранул хмеля от производителя образцы сразу подверглись исследованию. В образцах определялись показатели как общепринятые в отрасли, так и дополнительные, для чего предварительно проводилась экстракция смесью толуола и щелочного метанола, а также гексаном. Получение экстракта по методу ASBC осуществляли следующим образом: навеску хмелепродуктов смешивали с толуолом при гидромодуле 1 : 10, выдерживали при температуре (25 ± 2) °С в течение 30–40 мин. Далее смесь фильтровали, а при необходимости центрифугировали в течение 20–30 мин для лучшего осветления экстракта (общее время контакта навески образца хмеля и экстрагента составила 60 мин). 2 см3 толуолового экстракта доводили до 50 см3 щелочным раствором метанола. Получение экстракта по экспериментальному методу осуществляли следующим образом: навеска хмелепродуктов смешивалась с гексаном и выдерживалась при температуре (25 ± 2) °С в течение 50–60 мин. Далее смесь также фильтровали, а при необходимости дополнительно центрифугировали в течение 5–10 мин для лучшего осветления (общее время контакта навески хмеля и экстрагента составила 60– 65 мин). Аналогичным образом проводилось получение экстракта с лигроином. Экстракты хранились в течение 4–6 ч при комнатной температуре герметично закрытые. Экстракция каждого образца выполнялась в 5 повторностях.

В экстрактах определяли содержание α- и β-горьких смол [11], индекс хранения – по методу ASBC 2634 [12], содержание полифенолов – по ГОСТ 34798-2021 «Продукция пивоваренная. Идентификация. Фотоэлектроколориметриче-ский метод определения массовой концентрации полифенолов», антоцианогенов [11], катехинов [13] и суммы фенольных кислот [14], в гранулах – влажность по ГОСТ 21948-76 «Хмель-сырец и хмель прессованный. Методы испытаний».

Индекс хранения в гексановом и лигроиновом экстрактах определяли в следующей модификации – 0,1 см3 экстракта вносили в мерную колбу на 20 см3, туда же прибавляли 0,2 см3 0,2 моль/дм3 раствора NaOH и доводили раствор до метки ацетоном, закрывали притертой пробкой, перемешивали содержимое колбы. Выдерживали пробу в течение 10 мин во избежание помутнения и проводили измерение оптической плотности при 275 и 325 нм, проводили расчет [11] – опытная проба. В качестве раствора сравнения (контрольной пробы) для минимизации влияния оптических свойств ацетона 0,1 см3 гексана или лигроина смешивали с 0,2 см3 0,2 моль/дм3 раствором NaOH и дово- дили ацетоном до метки в мерной колбе на 20 см3. Далее поступали как в опытной пробе.

Для проведения исследований применяли спектрофотометр Shimadzu UV-1900 i (Япония) с диапазоном измерения 190–1100 нм и программным обеспечением LabSolutions UV-Vis.

Методы математического анализа осуществлялись посредством применения программы R version 4.5.2 (2025-10-31 ucrt). Для оценки влияния экстрагента и сорта хмеля на показатель индекс хранения использовался двухфакторный дисперсионный анализ (two-way ANOVA), для попарных сравнений – post-hoc критерий Тьюки, для оценки силы эффекта – критерий partial eta-squared. Для оценки связи индекса хранения с количественными показателями изучаемых органических соединений применялась множественная линейная регрессия с учетом экстрагента и сорта хмеля.

Результаты и их обсуждение

Определение показателей хмелепродуктов . Известно, что для эффективной экстракции горьких смол применяются органические экстрагенты, традиционным из которых считается гексан, обладающий избирательными свойствами по отношению к горьким смолам, и петролейный эфир [15,16]. Применение смеси толуола и щелочного метанола в качестве экстрагентов для определения значения индекса хранения характерно только для исследовательского метода ASBC. В России метрологически аттестованный и зарегистрированный метод определения индекса хранения отсутствует. В данном исследовании изучался также лигроин 70/120 в качестве неполярного экстрагента для всех органических соединений гранулированного хмеля. Согласно ГОСТ 8863-76 «Лигроин технический приборный. Технические условия», в его составе содержатся парафины, изопарафины, олефины, нафтены и ароматические вещества, т. е. он включает несколько соединений. Лигроин имеет различный состав соединений, характеризующийся различной температурой кипения, но в исследовании применялся лигроин на основании углеводородов с диапазоном температур кипения 70–120 °С. Как неполярный экстрагент лигроин показал эффективность в исследовании показателей качества хмелепродуктов [17].

Необходимо отметить, что температура экстракции не менялась по отношению к заявленным показателям в методе ASBC.

На первом этапе исследования изучалось влияние гидромодуля на значение индекса хра- нения гранулированного хмеля сорта Магнум  тировании в среде ацетона, результаты пред- при экстракции гексаном и лигроином и детек-  ставлены в таблице 1.

Влияние гидромодуля на значение индекса хранения хмеля

The influence of the ratio raw material : water on the hop’s storage index value

Таблица 1

Повторность	Значение индекса хранения (при уровне значимости р ≤ 0,05) в случае гидромодуля и экстрагента
	1 : 10	1 : 15	1 : 25
	Гексан
1	0,27	0,30	0,28
2	0,36	0,35	0,29
3	0,34	0,29	0,28
4	0,34	0,29	0,28
5	0,31	0,31	0,29
	Лигроин
1	0,40	0,32	0,30
2	0,37	0,34	0,29
3	0,35	0,32	0,30
4	0,38	0,35	0,29
5	0,32	0,29	0,31

По результатам данных таблицы 1, отражающим определение индекса хранения хмеля гранулированного Магнум в повторностях, видно, что близкими друг к другу значениями обладают образцы, приготовленные при гидромодуле 1 : 25. Расхождения в повторностях между результатами индекса хранения при гидромодуле 1 : 10 и 1 : 15, на наш взгляд, обуславливаются влиянием высокого содержания органических соединений образца хмеля, завышаю-

На втором этапе на основании выбранного гидромодуля 1 : 25 была проведена экстракция и в полученных образцах проведено определение индекса хранения, содержания гумулона и лупулона, извлекаемых толуолом по методу ASBC 2634 в присутствии щелочного метанола как среды для форм горьких кислот [12]. Результаты испытаний экстрактов представлены в таблице 2.

щих результат.

Таблица 2

Значения индекса хранения и содержания горьких смол образцов гранулированного хмеля The HIS and bitter resins content indicators of hop pellet samples

Показатель	Экстрагент	Содержание в сортах (уровень значимости р ≤ 0,05)
		Магнум	Перле	Традиционный
Индекс хранения	Гексан	0,28	0,26	0,29
	Лигроин	0,36	0,46	0,45
	Толуол и метанол	0,29	0,26	0,26
Гумулон (α-кислота), %	Гексан	14,6±1,5	6,3±0,6	5,1±0,5
	Лигроин	16,7±1,5	7,7±0,8	6,3±0,6
	Толуол и метанол	14,3±1,5	6,8±0,6	6,5±1,0
Лупулон (β-кислота), %	Гексан	5,7±0,5	2,5±0,2	3,4±0,3
	Лигроин	5,7±0,5	2,2±0,2	3,9±0,4
	Толуол и метанол	9,7±1,0	5,2±0,5	7,1±0,7

Результаты, представленные в таблице 2, показывают, что применение в совокупности смеси спиртов по методу ASBC, а также гексана по исследуемому методу позволяют извлечь α-кислот равноценное количество не зависимо от сорта и типа хмелепродукта и расхождения между результатами с данными экстрагентами лежат в пределах погрешности метода определения. В отношении β-кислот гексан способствует получению близких значений содержания, а смесь спиртов – завышает значения лупулонов на 41–58 % по сравнению с литературными данными. Известно, что сорт хмеля Магнум содержит около 12,5 % α-горькой кислоты и около 6,5 % горькой β-кислоты [18], сорт Перле – 4,0–9,0 % α-кислоты и 2,5–4,5 % β-горькой кислоты, сорт Традиционный – 4,0–7,0 % α-кислоты и 3,0–6,0 % β-смолы соответственно [3]. Очевидно, что представленные результаты в таблице 1 очень близки к литературным по содержанию горьких смол в экстрактах с углеводородами.

Также результаты таблицы 2 показывают, что лигроин и гексан позволяют извлечь α-и β-кислот равноценное количество независимо от сорта и типа хмелепродукта, и расхождения между результатами с разными экстрагентами лежат в пределах погрешности метода определения.

Значения индекса хранения, определенные в спиртовых экстрактах по методу ASBC, близки к значениям в образцах, полученных с гексановым экстрагентом, и их колебания незначительны.

В отношении показателя индекса хранения результаты показывают большую на 74 % экстракцию лигроином для Перле и на 48 % для Традиционного гранулированного хмеля. Результаты по показателю индекса хранения у горького типа гранулированного хмеля сорта Магнум в двух экстрактах отличаются незначительно.

Отметим, что при определении значения индекса хранения хмелепродуктов измерение оптических плотностей растворов проводят при длине волны 275 и 325 нм. Поэтому присутствие в экстрактах других органических соединений (фенольных) может приводить к изменению величин оптических плотностей растворов и соответственно к изменению вычисляемого на их основании значения индекса хранения.

Действительно, по мнению авторов, в диапазоне 270–275 нм в ультрафиолетовом спектре детектируются, кроме горьких кислот, пренил-флавоноиды. Это связано с наличием в их структурах ароматических колец, связи в которых поглощают свет при 270–280 нм. Рутин поглощает свет при 236 нм, 257 и 358 нм [19].

Представители катехинов в ультрафиолетовом спектре имеют характерные максимумы поглощения в области 260–280 нм, с общим пиком около 270–275 нм, и пик около 370 нм для эпикатехина галлата [20]. Также отмечаем, что свойства экстрагента могут приводить к высвобождению иных фракций горьких смол, связанных с продуктами их окисления [21] или первородных соединений, из которых образуются горькие смолы (флороглюцинолы в форме ацил-флороглюцинол-монотерпенов или ацил-флороглюцинол-сесквитерпенов) [22].

На третьем этапе было необходимо сопоставить содержание фенольных соединений в гексановом и лигроиновом экстрактах с литературными данными, а также провести статистический анализ для выявления влияния фенольных соединений на результат измерения оптических плотностей, что может приводить к искажению значения индекса хранения. В таблице 3 представлены среднестатистические результаты содержания полифенолов в гексановом и лигроиновом экстрактах хмелепродуктов. В результате определения фенольных соединений в экстрактах, полученных с толуолом и щелочным метанолом, были получены низкие значения, которые не входили в диапазон чувствительности метода. По-видимому, это связано с окислением фенольных соединений вследствие присутствия высокой концентрации щелочи в экстрактах.

Исследование фенольного профиля, состоящего из перечисленных в таблице 3 показателей, не случайно. С технологической точки зрения, данные соединения формируют коллоидную структуру и оказывают влияние на стойкость пива, т. е. ассоциированы различными типами связей с горькими кислотами и прочими соединениями пива, и, как следствие, обуславливают качество готового напитка. Так, мономеры, ди- и тримеры катехинов и эпикатехинов вступают в реакции с чувствительными пролиновыми азотистыми соединениями гордеиновой фракции белка солода, образуя обратимое или постоянное помутнение, а также осуществляют вклад в цвет пива [23, 24]. По причине межмолекулярных взаимодействий, фенольные соединения могут влиять на результат измерения индекса хранения.

Согласно данным таблиц 2 и 3, прослеживается закономерность обратной зависимости содержания мономерных и полимерных катехинов и горьких кислот: чем ниже уровень α-кис- лот, тем выше общее содержание суммы анто-цианогенов и катехинов, что соответствует литературным данным [25, 26].

Таблица 3

Показатели содержания фенольных соединений образцов экстрактов гранулированного хмеля The extracts phenolic substances content indicators of hop pellet samples

Показатель, %	Содержание в сортах (уровень значимости р ≤ 0,05)
	Магнум	Перле	Традиционный
	Гексан
Влажность, %	8,4±0,3	13,0±0,3	7,5±0,3
Общие полифенолы, %	4,1±0,4	6,1±0,5	6,2±0,5
Антоцианогены, мг/100 г	64,6±6,5	174,2±15,0	170,5±15,0
Катехины, мг/100 г	3,7±0,2	1,8±0,1	8,7±0,4
Сумма антоцианогенов и катехинов, мг/100 г	68,3	176,0	179,2
Фенольные кислоты, сумма, мг/100 г	0,6±0,06	0,3±0,03	1,4±0,10
	Лигроин
Общие полифенолы, %	5,3±0,4	7,4±0,6	7,4±0,6
Антоцианогены, мг/100 г	278,3±25,0	475,5±45,0	460,5±45,0
Катехины, мг/100 г	123,7±6,0	92,8±4,6	304,6±15,0
Сумма антоцианогенов и катехинов, мг/100 г	402,0	568,3	765,1
Фенольные кислоты, сумма, мг/100 г	0,7±0,07	0,6±0,06	2,4±0,20

Горькие сорта хмеля содержат 3 % полифенолов, 1500 мг/100 г антоцианогенов и 3500 мг/100 г суммарно флаваноидов, в то время как ароматные сорта содержат около 5 % фенольных соединений, 2300 мг/100 г антоцианогенов и 7500 мг/100 г суммарно флаваноидов [13].

Показано, что сумма свободных фенольных соединений, групп флаванолов (катехинов) и рутина, а также производных бензойной кислоты и коричной кислоты была самой высокой в ароматных сортах хмеля [13]. (+)-Катехин, про-цианидин B3 и процианидин C2 соответственно содержатся в ароматичных сортах в количестве до 250, 140 и 80 мг/100 г [25]. По другим исследованиям, в горьких сортах хмеля содержание мономерных катехинов находится в пределах 100 мг/100 г, в горько-ароматных – около 50 мг/100 г, в ароматных – около 180 мг/100 г [13, 25]. Показано, что суммарное количество фенольных кислот в ароматных сортах колеблется около 148 мг/100 г, в горько-ароматных сортах – около 56 мг/100 г и в горьких – около 50 мг/100 г [13].

Необходимо отметить, что результаты, представленные в таблице 3, показывают идентич- ную динамику относительно количественных показателей фракций фенольных соединений в гексановых экстрактах, за исключением содержания фенольных кислот. Содержание общих полифенольных соединений коррелирует с литературными данными, а антоцианогенов, катехинов и фенольных кислот – занижено в 10–20, 30 и 50–100 раз соответственно. Таким образом, не происходит значимого влияния на измеряемый показатель индекса хранения, поскольку антоцианогены, катехины и мономерные фенольные соединения экстрагируются гексаном не в полной мере.

Изменение содержания соединений по сортам сохраняется в лигроиновых экстрактах. Так, содержание общих полифенолов и катехинов коррелирует с литературными данными, а анто-цианогенов и фенольных кислот – ниже в 5 и 5– 100 раз соответственно заявляемых уровней [3, 12, 26]. При сравнении результатов гексановых и лигроиновых экстрактов видно, что лигроин экстрагирует большее количество фенольных соединений (за исключением фенольных кислот) по сравнению с гексаном, что объясняется большим проникновением молекул экст- рагента со смешанным составом в растительную матрицу хмеля.

На основании результатов, представленных в таблицах 2 и 3, был проведен статистический анализ для исследования влияния фенольных соединений на изменение значения индекса хранения при применении гексана и лигроина.

Статистический анализ результатов исследования . Известно, что проведение много-

Таблица 4

Описательные статистические данные по полученным значениям индекса хранения Descriptive statistics for the obtained storage index values

мерного корреляционно-регрессионного анализа способствует выявлению, измерению и описанию сложных зависимостей между множеством переменных для выявления факторов, влияющих на зависимую переменную, и степени их влияния [27].

В таблице 4 приведена описательная статистика по результатам, приведенным в таблице 1.

Экстрагент	Сорт хмеля	Количество повторностей	Среднее значение индекса хранения	SD	min	max
Гексан	Магнум	5	0,276	0,005	0,27	0,28
	Перле	5	0,262	0,008	0,25	0,27
	Традиционный	5	0,294	0,005	0,29	0,30
Лигроин	Магнум	5	0,356	0,028	0,31	0,38
	Перле	5	0,462	0,022	0,43	0,48
	Традиционный	5	0,452	0,018	0,43	0,47

По результатам, представленным в таблице 4, видно, что средние вычисленные значения индекса хранения находятся в зависимости как от применяемого экстрагента, так и от сорта хмеля. Также применение лигроина характеризуется завышенными значениями индекса хранения относительно аналогичных показателей, определенных в гексановой пробе.

Для оценки влияния экстрагента и сорта хмеля на значение вычисляемого показателя индекса хранения был применен двухфакторный дисперсионный анализ ANOVA с вычислением критерия Фишера – Снедекора (F), позволяющего оценить, насколько велики различия между показателями сравниваемых групп по отношению к случайным разбросам значений внутри групп. В таблице 5 представлены статистические результаты применения ANOVA.

Таблица 5

ANOVA характеристики при сравнении влияния типа экстрагента и типа хмеля на индекс хранения ANOVA characteristics comparing the influence of the extractant and the hop’s type on the storage index

Фактор	Суммарно SQ	Значение SQ	F-критерий	p-критерий
Тип экстрагента	0,1598700	0,1598700	564,247	< 0,0001
Тип сорта	0,0182867	0,0091433	32,271
Экстрагент и сорт	0,0185400	0,0092700	32,718

По результатам, представленным в таблице 5, можно сделать вывод, что согласно критерию Фишера – Стендекора (F фактор), тип экстрагента статистически значим (F = 564,25), сорт хмеля также статистически значим (F = 32,27) и взаимодействие двух факторов оказывает зна- чимое влияние (F = 32,72), т. е. влияние экстрагента неодинаково в разных сортах.

С целью проведения количественной оценки силы влияния факторов, приведенных в таблице 5, использовали показатель partial eta-squared (partial η2), отражающий долю вариации отклика индекса хранения с конкретным фактором после учета остальных факторов модели. Были получены следующие результаты: для фактора тип экстрагента partial η2 соответствовал 0,96, для фактора тип сорта – 0,73, при взаимодействии обоих факторов – 0,73. Иначе говоря, влияние этих факторов на показатель индекса хранения является не только статисти- чески значимым, но и практически выраженным, особенно для экстрагента.

Далее использовали post-hoc метод множественных попарных сравнений на основе оценки критерия Тьюки (t-критерия) для установления различий между установленными группами. В таблице 6 приведены результаты попарного сравнения влияния экстрагента на изменение индекса хранения.

Таблица 6

Тип хмеля	Сравниваемые экстрагенты	Критерий Тьюки, t	SE	df	t ratio	Значение р критерия
Горький	Гексан – лигроин	–0,080	0,0106	24	–7,5147	< 0,0001
Горькоароматный		–0,200	0,0106	24	–18,7867	< 0,0001
Ароматный		–0,158	0,0106	24	–14,8415	< 0,0001

Значения критерия Тьюки (t-фактора) для типов хмеля

Tukey's t-factor values for hop types

Результаты, представленные в таблице 6, показали существующие статистически значимые различия между гексаном и лигроином для трех типов хмеля. Лигроин дает более высокие значения индекса хранения по сравнению с гексаном, и наиболее выражено это для горькоароматного сорта.

При определении статистически значимых различий между типами хмеля при рассмотрении конкретного экстрагента было показано, что для гексана различия между тремя типами статистически незначимы (0,2293 ≤ p ≤ 0,4008), а для лигроина те же различия статистически значимы (p < 0,0001).

С целью выявления взаимосвязи органических соединений с индексом хранения исследовалась множественная линейная регрессия, включающая показатели таблиц 1 и 2. Было показано, что рассматриваемая модель в целом статистически значима (F = 31,28, p < 0,0001, коэффициент детерминации составил R² = = 0,934) и обладает высокой объясняющей способностью. В таблице 7 представлены характеристики множественной линейной корреляции.

Таблица 7

Соединения	Коэффициент регрессии b	t значение	р значение	Значимость по критерию р
α-горькая кислота	–0,02755	–3,714	0,0014	Значимо (р ≤ 0,05)
β-горькая кислота	–0,00544	–0,762	0,4550	Не значимо (р ≤ 0,05)
Полифенолы в сумме	–0,02555	–0,884	0,3874
Антоцианогены	0,00042	1,558	0,1349
Катехины	0,00000	–0,002	0,9985
Монофенольные соединения	–0,01216	–0,233	0,8184

Параметры множественной линейной корреляции

Parameters of multiple linear correlation

Судя по результатам, представленным в таблице 6, была доказана наиболее уверенная независимая связь индекса хранения и содержания α-горькой кислоты.

Оценка полученных результатов относительно содержания соединений и корреляционных влияний показывает преимущество применения гексана в качестве альтернативы спиртовым экстрагентам, поскольку лигроин привел к завышению результатов измерения индекса хранения, что недопустимо с точки зрения точности метода определения.

Заключение. Проведено исследование влияния экстрагента при пробоподготовке в рамках метода определения индекса хранения. Способ экстрагирования гексаном позволил получить сходимые с методом ЕВС результаты значений индекса хранения. Кроме этого, были исследованы образцы отечественного гранулированного хмеля Липецкой области разных типов и сортов, в которых были определены: содержание горьких смол (α- и β-кислот), полифенольных соединений, индекса хранения. Показаны зави- симости изменения содержания соединений от типа хмелепродукта. Статистически оценена корреляция горьких смол и фенольных соединений и показателя индекса хранения путем статистического анализа. Показано, что тип экстрагента оказывает наибольшее влияние на изменение индекса хранения, а применение гексана способствует получению адекватных результатов во всех трех типах хмеля, в отличие от лигроина. Выявлена статистическая зависимость между изменением индекса хранения и содержанием горькой α-кислоты. Практическая значимость полученных результатов будет способствовать использованию экономически выгодного, менее токсичного реагента с точки зрения влияния на здоровье человека для совершенствования метода определения индекса хранения хмеля. Дальнейшие исследования будут направлены на получение массива результатов, их метрологической оценки с целью расширения методологической базы оценки качества хмелепродуктов и готового пива.