Стабильность свойств штамма B. abortus 82-TR при пассажах через организм морских свинок
Автор: Косарев М.А., Сафина Г.М., Богова Я.А., Тухватуллина Л.А.
Статья в выпуске: 1 т.253, 2023 года.
Бесплатный доступ
Целью наших исследований было изучение стабильности штамма 82-Tr (тетрациклинрезистентного варианта штамма B. abortus-82) при его последовательных пассажах через организм морских свинок. Получены идентичные результаты в процессе изучения исходного и 10-кратно пассированных через организм морских свинок культуры и штамма B. abortus 82-Tr. Отмечалась строгая закономерность в качественных показателях, а в количественном выражении показатели серологических реакций у штамма 82-Tr отличались в различные периоды их убоя. Положительные показатели в реакции агглютинации на стекле с S- и R-антисыворотками наблюдались у культур всех пассажей. Основание считать штамм 82-Tr стабильным дают проведенные опыты и их результаты.
Бруцеллез, антибиотики, тетрациклин, вакцинация, иммунитет
Короткий адрес: https://sciup.org/142237097
IDR: 142237097 | DOI: 10.31588/2413_4201_1883_1_253_130
Текст научной статьи Стабильность свойств штамма B. abortus 82-TR при пассажах через организм морских свинок
Актуальнейшей проблемой ветеринарной науки и практики является бруцеллез крупного рогатого скота. Это одна из наиболее опасных и широко распространенных инфекций, которая наносит огромные потери экономике сельского хозяйства [4, 5].
Усугубить течение заболевания способно введение в инфицированный организм бруцеллезной вакцины с профилактической целью. По этой причине рационально назначать курс лечения антибиотиками при подозрении на заражение этой инфекцией. Формирования полноценного иммунитета, особенно не в стерильной фазе, результат применения антибиотиков [1]. Отсутствие избирательного действия является основным недостатком применения этих средств. Они действуют губительно или подавляют рост микроорганизмов [2]. Для лечения бруцеллеза очевидна необходимость наличие вакцинного штамма устойчивого к антимикробным препаратам [3]. Не стоит на месте научноисследовательская работа по усовершенствованию существующих методов диагностики, средств специфической профилактики и методов оздоровления неблагополучных по бруцеллезу хозяйств, а также поиск новых и действенных методов [6].
В связи с этим целью наших исследований было изучение стабильности штамма 82-Tr (тетрациклинрезистентного варианта штамма B. abortus-82) при его последовательных пассажах через организм морских свинок.
Материал и методы исследований. Взвесь культуры штамма 82-Tr в дозе 1,7 млрд м.к. в объеме 1 мл вводили подкожно в области паха 2 морским свинкам. Морских свинок после вакцинации, спустя 3 недели, умерщвляли для контроля опыта исследований с проведением бактериологического и серологического исследований. Культуру, которую удалось выделить от морских свинок, снова вводили последующим, и так проделывали десять раз. Типизацию культуры, которую получилось выделить от опытного животного, производили в реакции агглютинации (РА) на стекле с R- и S-бруцеллезными антисыворотками. В соответствии с ГОСТом 33675-2015 и МУК 3.1.7.3402-16 культуральноморфологические свойства изучаемой культуры в сравнительном аспекте проводили по общепринятой методологии, после проведенных пассажей и культуры десятого пассажа. Вакцинные штаммы B. abortus R-1096 (R-форма), 82 (SR-форма), 19 (S-форма), и вирулентные референтные штаммы, B. abortus 544 , B. suis 1330 и B. melitensis 16M использовались для контроля проводимого опыта.
Результат исследований. Отмечалась строгая закономерность в качественных показателях, а в количественном выражении показатели серологических реакций у штамма 82-Tr отличались в различные периоды их убоя. С единым бруцеллезным антигеном культуры от 1 до 10 пассажей и исходная культура бруцелл штамма 82-Tr синтеза антител, улавливаемого в розбенгал пробе (РБП), реакции агглютинации (РА) и реакции связывания комплемента (РСК) не вызывали. В реакции связывания комплемента с R-антигеном все животные реагировали положительно. Титры антител примерно составили 1:120. Постепенное снижение титров антител от 1:80 до 1:30 отмечалось у животных с 1 по 9 пассаж. Титр антител составили в среднем 1:45 у животных, которых вакцинировали культурой 10 пассажа. Опираясь на результаты бактериологического контроля, культуры выделялись в основном из костного мозга и лимфатических узлов. После иммунизации через 21 день и после эвтаназии ИИ был от 20 до 65 %. Отмечалось постепенное снижение ИИ до 20 %, начиная с культуры 4 пассажа ИВС остался практически неизмененным. В реакции агглютинации на стекле с S- и R-антисыворотками положительные показатели сохранили культуры всех пересевов. (Таблица 1).
Таблица 1 – Результаты стабильности свойств штамма 82-Tr при пассаже через организм морских свинок
|
Номер пассажа |
Результат исследований |
||||||||||
|
Серологический |
Бактериологический |
||||||||||
|
РБП |
РА |
РСК |
ИИ |
ИВС |
РА на стекле |
||||||
|
S- |
R- |
среднее значение |
% |
среднее значение |
среднее значение |
S- |
R- |
||||
|
Исходная культура |
отр. |
отр. |
отр. |
80 |
120 |
20 |
40 |
1,64 |
1,71 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
160 |
60 |
1,79 |
||||||
|
1 |
отр. |
отр. |
отр. |
80 |
80 |
70 |
65 |
0,84 |
1,16 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
80 |
60 |
1,48 |
||||||
|
2 |
отр. |
отр. |
отр. |
40 |
80 |
30 |
35 |
2,42 |
1,93 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
120 |
40 |
1,45 |
||||||
|
3 |
отр. |
отр. |
отр. |
20 |
20 |
80 |
65 |
1,16 |
1,12 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
20 |
50 |
1,09 |
||||||
|
4 |
отр. |
отр. |
отр. |
40 |
40 |
20 |
20 |
1,40 |
1,62 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
40 |
20 |
1,83 |
||||||
|
5 |
отр. |
отр. |
отр. |
80 |
60 |
20 |
20 |
1,41 |
1,55 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
40 |
20 |
1,69 |
||||||
|
6 |
отр. |
отр. |
отр. |
20 |
30 |
60 |
40 |
2,25 |
2,68 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
40 |
20 |
3,12 |
||||||
|
7 |
отр. |
отр. |
отр. |
40 |
40 |
20 |
45 |
2,08 |
2,09 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
40 |
70 |
2,11 |
||||||
|
8 |
отр. |
отр. |
отр. |
20 |
30 |
20 |
15 |
1,29 |
1,54 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
40 |
10 |
1,80 |
||||||
|
9 |
отр. |
отр. |
отр. |
20 |
30 |
20 |
25 |
0,78 |
1,04 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
40 |
30 |
1,30 |
||||||
|
10 |
отр. |
отр. |
отр. |
80 |
45 |
20 |
20 |
1,25 |
1,70 |
# |
# |
|
отр. |
отр. |
отр. |
10 |
20 |
2,16 |
||||||
Примечание – отр. – отрицательный
Согласно Е. В. Козловскому, коккобактерии красятся в красный цвет, отрицательный результат был в окрашивании по Грамму. Основная культура и культура 10 пассажа ведут себя одинаково. Штамм образует сероводород, частично лизируется фагом «Тб», в повышенном содержании углекислого газа не нуждается, растет хорошо на среде с тетрациклином, а также во всех разведениях фуксина и тионина. Стоит заметить, что штамм показывает отрицательный результат в пластинчатой реакции агглютинации на стекле с монорецепторной «M» сывороткой, но положительный результат с монорецепторной «A» сывороткой и бруцеллезными гипериммунными S- и R-сыворотками. Результат в реакции термоагглютинации – отрицательный, но положительная проба на диссоциацию с акрифлавином. По окрашиванию по методике Уайт-Вилсона колонии имеют полосы желтого цвета, радиально отходящие от центра, мазок окрашен в фиолетовый.
Заключение. Получены идентичные результаты в процессе изучения исходного и 10-кратно пассированных через организм морских свинок культуры и штамма B. abortus 82-Tr. Отмечалась строгая закономерность в качественных показателях, а в количественном выражении показатели серологических реакций у штамма 82-Tr отличались в различные периоды их убоя. Положительные показатели в реакции агглютинации на стекле с S- и R-aнтисыворотками наблюдались у культур всех пассажей. Основание считать штамм 82-Tr стабильным дают проведенные опыты и их результаты.
Резюме
Список литературы Стабильность свойств штамма B. abortus 82-TR при пассажах через организм морских свинок
- Воробьев, А. В. Использование комплексного пробиотического препарата в профилактике и лечении болезней желудочно-кишечного тракта телят / А. В. Воробьев, А. И. Фадеев, А. В. Савинков, Н. С. Титов, О.О. Датченко // http://nsau.edu.ru/images/vetfac/images/ebooks/pages2004/121.htm.
- Горелов, В. Н. О возможности создания вакцинного штамма Brucella abortus 19-BA с множественной устойчивостью к антибиотикам / B. Н. Горелов, Е. А. Губина, Н. А. Грекова, А. Г. Скавронская // ЖМЭИ. -1991. - № 9. - С. 2-4.
- Гордиенко, Л. Н. Эффективность дифференциального теста при диагностике бруцеллеза северных оленей / Л. Н. Гордиенко, А. Н. Новиков, Е. В. Куликова // Ветеринария. - 2020. - № 11. - С. 7-10.
- Новикова, Н. Н. Изучение диагностической ценности R - бруцеллезного диагностикума в условиях производства/ Н. Н. Новикова, Т. А. Янченко, А. А. Кожахметова, C. А. Имерякова // Электронный научнометодический журнал Омского ГАУ. - 2019. - № 1 (16). - С. 3.
- Сафина, Г. М. Иммунитет к бруцеллезу у морских свинок, привитых вакциной из антибиотикорезистентного штамма B. abortus 82 Tr / Г. М. Сафина, Н. М. Федорова, А. М Фомин // Ветеринарный врач. - 2008. - № 2. - С. 19-21.
- Тухватуллина, Л. А. Сравнительная эффективность противобруцеллезных вакцин и активность системы оксида азота (II) при формировании иммунного ответа у морских свинок / Л. А. Тухватуллина, Я. А. Богова, Г. М. Сафина, Р. Г. Каримова, М. А. Косарев // Современные проблемы экспериментальной и клинической токсикологии, фармакологии и экологии: сборник тезисов докладов Международной научно-практической конференции. - 2021. - С. 66-70.
- Schurig, G. G. Brucellosis vaccines: past, present and future/ G. G Schurig, N. Sriranganathan, M. J. Corbel // Vet. Microbiol. - 2002. - V. 90. - № 4. - P. 479-496.
