Стандартизация нового средства растительного происхождения и его антикоагулянтная активность

Во всем мире уделяется большое внимание созданию, изучению и внедрению в клиническую практику препаратов для лечения воспалительных заболеваний женской половой сферы. Несмотря на то, что имеется широкий арсенал противовоспалительных препаратов, проблема изыскания новых высокоэффективных средств, обладающих данным видом действия, остается весьма актуальной.

Применение лекарственных растений и препаратов из них для лечения и профилактики различных заболеваний с каждым годом занимает все большее место в клинической медицине. Сведения об использовании растений в народной и традиционной медицине являются ориентиром для выбора направления поиска новых видов лекарственного сырья. В качестве объекта исследования выбрана композиция из 3 лекарственных растений: надземной части панцерины шерстистой ( Pаnzerina lanata (L). Sojak , семейства Lamiaceae ), побегов курильского чая кустарникового ( Pentaphylloides fruticosa (L.) O.Schwarz семейства Rosaceae ) и корней сабельника болотного ( Comarum palustre L., семейства. Rosaceae ) под условным названием «Профем». Препараты из этих растений, по данным научной и народной медицины обладают выраженным противовоспалительным и кровоостанавливающим действием [5, 6, 7, 8, 9], что указывает на целесообразность применения данной композиции в качестве средства для фитотерапии гинекологических заболеваний.

Цель работы – стандартизация полиэкстракта «Профем» по действующим веществам, а также оценка его влияния на коагуляционное звено гемостаза.

Материалы и методы

Растительный материал собран в Баргузинском районе Республики Бурятия в 2007 г. Методом мацерации с учетом оптимальных параметров экстракции получена субстанция экстракт сухой. Наличие основных биологически активных веществ определяли по общепринятым методикам [3, 4]. Определение потери в массе при высушивании проводили на дериватографе Netzsch STA 449 C (Германия). Спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре Agilent-8453Е (США) в кварцевых кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм. Для исследования влияния «Профема» на коагуляционное звено гемостаза использовали аутокоагуляционный тест (АКТ), дающий представление о

Т.В. Корнопольцева, А.Г. Мондодоев, Т.А. Асеева, В.К. Кашин. Стандартизация нового средства растительного происхождения и его антикоагулянтная активность состоянии про- и антикоагулянтного звеньев системы свертывания крови [1, 2]. Исследование проводили на белых крысах с исходной массой 160-170 гр. Состояние коагуляционного гемостаза оценивали через 30 и 60 минут после однократного введения peros «Профема» в экспериментальнотерапевтической дозе 75 мг/кг массы животного. Статистическую обработку результатов проводили с помощью стандартного пакета статистических программ. Значимость различий между изучаемыми величинами определяли по критерию Стьюдента.

Результаты и обсуждение

Методом мацерации с учетом оптимальных параметров экстракции получена субстанция – полиэкстракт сухой, представляющий собой аморфный порошок коричневого цвета с приятным запахом и горьковатым вяжущим вкусом. Гигроскопичен, комкуется. Полиэкстракт растворим в 50% этаноле, хорошо растворим в воде. Потеря в массе при высушивании соответствует ГФ XI и не превышает 5%. На пяти опытных образцах потеря в массе при высушивании варьирует от 2.05 до 4.23%. Определение потери в массе при высушивании проводили на дериватографе Netzsch STA 449 C (Германия). Установлено, что основное удаление влаги начинается при температуре 50 ° С, а при температуре 150 ° С происходит разложение экстракта.

На основании качественного фитохимического анализа в полученном экстракте сухом установлено наличие дубильных веществ, фенолкарбоновых кислот (кофейная и хлорогеновая кислоты), иридоидов (гарпагид), флавоноидов (доказано наличие рутина, кверцетина, изорамнетина, кемпферола и их гликозидов). Идентификацию проводили со стандартными образцами.

При исследовании УФ-спектров спиртовых извлечений из данного сырья было обнаружено, что максимумы УФ-спектров спиртовых извлечений полиэкстракта «Профем» близки к максимумам УФ-спектров поглощения ГСО цинарозида. Далее, при добавлении к спиртовому извлечению полиэкстракта раствора алюминия хлорида, II максимум поглощения УФ-спектра смещался к 405 нм и совпадал с максимумами поглощения стандартного образца цинарозида, снятого в аналогичных условиях.

Количественная оценка проводилась по выходу экстрактивных веществ [1, 2] и суммы флавоноидов. Метрологические характеристики представлены в таблице 1. Количество флавоноидов в полиэкстракте сухом «Профем» составило 10,7%, экстрактивных веществ – 28 %.

Таблица 1

Метрологические характеристики определения экстрактивных веществ и суммы флавоноидов в полиэкстракте сухом «Профем»

Фармакологическими исследованиями установлено (таблица 2), что «Профем» повышает активность свертывания крови и активность фибринолиза. Так, через 30 минут после введения возросла скорость образования тромбопластин – тромбина (А) в 17 раз по отношению к контролю, сократилось вдвое время достижения максимальной свертывающей активности (Т 2 ), повысилась активность механизмов противосвертывающей системы (Ф укоротилась на 24%), увеличился индекс инактивации тромбина (ИИТ) в 7,8 раза, а следовательно, возросла активность фибринолиза [2].

Через 60 минут снизилась относительно данных через 30 минут активность механизмов свертывания крови и фибринолиза, ИИТ уменьшился в 5,5 раза и возросла активность противосвертывающей системы (Ф укорачивается на 31%).

Таблица 2

Примечание: * – различия достоверны по отношению к контролю при Р≤ 0,05.

Влияние «Профема» на параметры АКТ у белых крыс

Таким образом, разработана методика количественного определения флавоноидов в пересчете на цинарозид-стандарт в полиэкстракте сухом «Профем», которая может использоваться при определении его подлинности. Установлено, что «Профем» в указанной дозе повышает коагуляционный потенциал крови, сохраняя сопряженность реакции между различными системами коагуляционного звена и фибринолизом, что очень важно для обеспечения физиологического кровоснабжения органов.