Связь полиморфизма генов AGT, ACE, NOS3 с субклиническими изменениями артериальной стенки и факторами риска сердечно-cосудистых заболеваний

Автор: Акопян Анна Александровна, Кириллова Карина Игоревна, Стражеско Ирина Дмитриевна, Самоходская Лариса Михайловна, Леонов Сергей Леонидович, Гельфанд Елена Михайловна, Сорокина Анна Григорьевна, Орлова Яна Артуровна

Журнал: Клиническая практика @clinpractice

Рубрика: Фундаментальная медицина

Статья в выпуске: 1 т.11, 2020 года.

Бесплатный доступ

Актуальность. Активация ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и снижение продукции оксида азота (NO) приводят к изменениям артериальной стенки, которые создают метаболически и ферментативно благоприятную среду для развития сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ). Влияние полиморфизма генов, кодирующих белки, которые участвуют в активации ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и обеспечении биодоступности NO, на параметры состояния артериальной стенки (скорость пульсовой волны, толщину комплекса интима-медиа, эндотелийзависимую вазодилатацию, наличие атеросклеротических бляшек) и факторы риска ССЗ изучено недостаточно. Цель - изучение связи полиморфизма генов AGT, ACE, NOS3 с параметрами артериальной стенки: скоростью пульсовой волны, толщиной комплекса интима-медиа, эндотелийзависимой вазодилатацией, наличием атеросклеротических бляшек и факторами риска ССЗ у относительно здоровых людей. Методы. С помощью межгруппового анализа и построения моделей множественной логистической регрессии мы изучили связь полиморфизма с.521С>Т гена AGT, Ins>Del гена AСE, с.894G>T гена NOS3 с параметрами изменения артериальной стенки и факторами риска ССЗ у 160 относительно здоровых человек разного возраста...

Еще

Артериальная жесткость, эндотелиальная дисфункция, полиморфизм гена agt, полиморфизм гена ace, полиморфизм гена nos3

Короткий адрес: https://sciup.org/143170830

IDR: 143170830 | DOI: 10.17816/clinpract18572

Текст научной статьи Связь полиморфизма генов AGT, ACE, NOS3 с субклиническими изменениями артериальной стенки и факторами риска сердечно-cосудистых заболеваний

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются ведущей причиной заболеваемости и смертности во всем мире, в том числе и в Российской Федерации [1]. Важными факторами риска ССЗ являются субклинические изменения артериальной стенки, к которым относятся повышение артериальной жесткости, утолщение комплекса интима-медиа, появление атеросклеротических бляшек, эндотелиальная дисфункция [2]. Изменения артериальной стенки создают метаболически и ферментативно благоприятную среду для развития ССЗ. Так, повышение скорости пульсовой волны на 1 м/с увеличивает риск сердечно-сосудистой смертности на 15% [3]. Связь субклинических изменений артериальной стенки с факторами риска CCЗ, в первую очередь с артериальной гипертензией (АГ), параметрами углеводного и липидного обмена, маркерами воспаления, изучена достаточно хорошо [4]. При этом ассоциация состояния артериальной стенки с генетическими особенностями изучена недостаточно. Известно, что ведущую роль в развитии изменений артериальной стенки играет активация ренин-ангиотен-зин-альдостероновой системы, снижение активности NO-синтазы (NOS), ведущее к снижению биодоступности оксида азота (NO). Активация ренин-ангиотензин-альдостероновой системы

происходит вследствие повышения уровня ангиотензина II. Ангиотензин II образуется в ходе цепи реакций из ангиотензиногена при участии ангио-тензинпревращающего фермента. Связь полиморфизма генов ангиотензиногена ( AGT ), ангиотен-зинпревращающего фермента ( AСE ), NO-синтазы 3-го типа ( NOS3 ) с ССЗ, такими как ишемическая болезнь сердца, АГ, ишемический инсульт, доказана в ряде клинических работ [5–8].

Целью нашей работы было изучение связи полиморфизма генов AGT, ACE, NOS3 с параметрами артериальной стенки: скоростью пульсовой волны, толщиной комплекса интима-медиа (ТКИМ), эндо-телийзависимой вазодилатацией (ЭЗВД), наличием атеросклеротических бляшек и факторами риска ССЗ у относительно здоровых людей.

МЕТОДЫ

Характеристика пациентов

В исследование были включены 160 человек (55 мужчин и 105 женщин) в возрасте от 25 до 82 лет, обратившихся в МНОЦ МГУ имени М.В. Ломоносова для профилактического осмотра в 2018–2019 гг.

Критерии соответствия

Критериями исключения были любые известные хронические неинфекционные заболевания, в том числе ССЗ, АГ 3-й степени, онкологические забо-

левания, а также регулярный прием антигипертензивных, гиполипидемических, сахароснижающих и любых других препаратов, беременность, период лактации, отказ от участия в исследовании.

Всеми пациентами было подписано информированное согласие на участие в исследовании. Протокол исследования был одобрен локальным Этическим комитетом МНОЦ МГУ.

Описание медицинского вмешательства

У всех пациентов измерялись антропометрические показатели: окружность талии и окружность бедер, их соотношение, вес, рост.

Уровень систолического (САД) и диастолического (ДАД) артериального давления измерялся на калиброванном приборе с использованием плечевой манжеты (HEM-7200 M3, Omron Healthcare, Kyoto, Япония). АГ диагностировали при значении САД ≥140 мм рт.ст. и/или ДАД ≥90 мм рт.ст.

Определение скорости пульсовой волны и параметров центрального АД (центральное САД, центральное ДАД, центральное пульсовое АД, центральное среднее АД) осуществлялось с использованием метода аппланационной тонометрии прибором SphygmoCor 9.0 hardware (AtCor, Сидней, Австралия). Повышенной скоростью пульсовой волны считалось значение >10 м/с. Ультразвуковое исследование каротидных артерий проводили с использованием системы PHILIPS EPIQ 5 (Нидерланды). Атеросклеротические бляшки определяли как фокальное утолщение стенки сосуда более чем на 50% по сравнению с окружающими участками стенки сосуда или как фокальное утолщение комплекса интима-медиа более чем на 1,5 мм, выступающее в просвет сосуда. Значение ТКИМ ≥0,9 мм считалось повышенным. ЭЗВД определяли с помощью пробы с реактивной гиперемией с использованием системы PHILIPS EPIQ 5 (Нидерланды). Эндотелиальной дисфункцией считалось ЭЗВД <10%.

Определение биохимических параметров крови (общий холестерин, ОХ; холестерин липопротеидов высокой плотности, ХС ЛПВП; триглицериды, ТГ; глюкоза натощак, ГН; креатинин, гликированный гемоглобин, HbА1с) и альбумина мочи (АМ) осуществлялось рутинными методами. Значение липопротеидов низкой плотности (ХС ЛПНП) вычислялось по формуле:

ХС ЛПНП = ОХ - (ТГ / 2,2 + ХС ЛПВП).

Альбуминурией считали АМ >30 мг/л. Сахарный диабет 2-го типа (СД2) диагностировался при зна-

чении ГН ≥7,0 ммоль/л или НbA1c ≥6,5%. Определение иммунореактивного инсулина (ИРИ) крови осуществлялось методом хемилюминесценции. Расчет индекса инсулинорезистентности (ИР) HOMA проводился по формуле:

ИР = Концентрация ГН (ммоль/л) х х ИРИ натощак (мкЕД/л)/22,5 .

Индекс инсулинорезистентности диагностировался при HOMA ≥2,5. Инсулиноподобный фактор роста (ИПРФ-1) определялся с помощью твердофазного хемилюминесцентного иммунофермент-ного анализа. Альдостерон крови определялся им-муноферментным методом.

Определение длины теломер лейкоцитов на геномной ДНК было проведено методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени [9]. Определение аллельных вариантов генов AGT , AСE , NOS3 было проведено методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием наборов компании «ДНК-Технология» (Россия). ДНК была выделена из цельной крови с использованием набора Qiagen DNA blood mini kit (Германия) согласно инструкции.

В данной статье для полиморфизма генов AСE , NOS3 использовалась нуклеотидная запись генотипов, для полиморфизма гена AGT использовалась как нуклеотидная, так и аминокислотная запись генотипов.

Методы статистического анализа

Статистическая обработка результатов проводилась с использованием пакета статистических программ SPSS version 11.0 for Windows (SPSS, Inc., Chicago, IL, США). Для нормально распределенных параметров приведены среднее (M) и стандартное отклонение (SD), а для ненормально распределенных — медиана (Мед), нижний (Нкв) и верхний (Вкв) квартили. Проверка распределений на нормальность проверялась по критерию χ ²Пирсона. При сравнении двух групп с различными генотипами различия оценивались с помощью критерия χ ² Пирсона, при сравнении трех групп с различными генотипами использовался метод дисперсионного анализа и критерий Краскела– Уоллиса. Для оценки влияния исследуемого показателя с учетом вклада остальных влияющих переменных применяли метод построения модели многофакторной логистической регрессии. Логистическая регрессионная модель строилась с принудительным включением основных факторов риска ССЗ и полиморфных вариантов изуча-

клиническая; 20

Том 121 №01

емых генов. Затем методом исключения Вальда строилась урезанная модель с уменьшенным количеством факторов.

В таблицах представлены факторы риска и полиморфизм генов AGT , AСE , NOS3 , продемонстрировавшие достоверную связь с изучаемыми параметрами артериальной стенки.

Статистическая значимость выявлялась на уровне p< 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Клиническая характеристика 160 пациентов, включенных в исследование, представлена в табл. 1.

Результаты сравнения групп с полиморфизмами изучаемых генов приведены в табл. 2–4. Крайне малочисленные группы с определенными генотипами были исключены из анализа.

Генотип CT был связан с меньшими значениями САД и центрального САД, а также с большим показателем ИПФР-1.

У пациентов с генотипом DD отмечалось более высокое отношение объема талии/бедер, были ниже показатели ЭЗВД, ЛПВП, чаще встречалась эндотелиальная дисфункция.

Сравнение количественных параметров проводилось между генотипами GG, GT и ТТ. У пациентов с генотипом GG отмечались более высокие уровни

Таблица 1

Клиническая характеристика пациентов, включенных в исследование

Показатель	Общая группа ( n =160)
Возраст (лет), M±SD	50,42±13,34
Мужчины ( n , %)	55 (34,4)
ОТ/ОБ, M±SD	0,86±0,1
Ожирение ( n , %)	41 (25,63)
САД (мм рт.ст.), M±SD	126,26±17,11
ДАД (мм рт.ст.), M±SD	79,28±10,65
Центральное САД (мм рт.ст.) М±SD	116,95±18,11
Центральное ДАД (мм рт.ст.) М±SD	79,86 ±11,32
Центральное пульсовое АД (мм рт.ст.), Meд.(Нкв-Вкв)	34,0 (28,0–42,0)
Центральное среднее АД (мм рт.ст.), М±SD	95,44±13,11
АГ ( n , %)	44 (27,5)
ОХ (ммоль/л), M±SD	3,85±1,02
ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD	3,85±1,02
ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD	1,20±0,32
ТГ (ммоль/л), Meд. (Нкв-Вкв)	0,97 (0,71–1,39)
ГН (ммоль/л), Мед. (Нкв-Вкв)	5,30 (4,90–5,80)
НвА1с (%), Meд. (Нкв-Вкв)	5,20 (5,00–5,55)
ИРИ (мкЕД/л), Мед. (Нкв-Вкв)	7,40 (5,60–10,70)
НОМА, Мед. (Нкв-Вкв)	1,80 (1,34–2,57)
ИР ( n , %)	44 (28,2)
СД2 ( n , %)	21(13,13)
Креатинин (мкмоль/л), М±SD	84,11±15,59
ИПФР-1 (нг/мл), Mед. (Нкв-Вкв)	143,50 (112,00–190,25)
Альдостерон (пг/мл), Mед. (Нкв-Вкв)	72,00 (39,75–117,25)
АМ (мг/л), Мед. (Нкв-Вкв)	8,15 (5,00–14,00)
АУ ( n , %)	7 (5,5)
ДТЛ, M±SD	9,82±0,44

Таблица 1. Окончание

Показатель	Общая группа ( n =160)
СПВ (м/с), M±SD	10,74±2,58
СПВ >10 м/с ( n , %)	58,75
ТКИМ (мм), Мед. (Нкв-Вкв)	0,7 (0,58–0,80)
ТКИМ ≥0,9 мм ( n , %)	22 (14,8)
АСБ ( n , %)	67 (45)
ЭЗВД (%), M±SD	10,76±3,55
ЭД ( n , %)	58 (39,7)
Полиморфизм с.521C>T гена AGT , генотипы CC/CT/TT ( n , %)	116 (72,5) / 41 (25,63) / 3 (1,88)
Полиморфизм Ins>Del гена ACE , генотипы II/ID/DD ( n , %)	47 (29,38) / 69 (43,13) / 44 (27,7)
Полиморфизм c.894G>T гена NOS3 , генотипы GG/GТ/ТТ ( n , %)	87 (54,38) / 65 (40,63) / 8 (5)

Примечание. Здесь и в табл. 2–4: ОТ/ОБ — окружность талии/бедер, САД/ДАД — систолическое/диастолическое артериальное давление, АГ — артериальная гипертензия, ОХ — общий холестерин, ХС ЛПНП/ЛПВП — холестерин липопротеидов низкой/высокой плотности, ТГ — триглицериды, ГН — глюкоза натощак, ИРИ — иммунореактивный инсулин, ИР НОМА — индекс инсулинорезистентности, СД — сахарный диабет, ИПФР-1 — инсулиноподобный фактор роста 1, АМ — альбумин мочи, АУ — альбуминурия, ДТЛ — длина теломер лейкоцитов, СПВ — скорость пульсовой волны, ТКИМ — толщина комплекса интима-медиа, АСБ — атеросклеротическая бляшка, ЭЗВД — эндотелийзависимая вазодилатация, ЭД — эндотелиальная дисфункция.

Таблица 2

Клиническая характеристика групп с СС- и СТ-генотипами полиморфизма с.521C>T (p.T174M) гена AGT

Показатель	CC (ТТ) ( n =116)	CT (ТМ) ( n =41)	^p
Возраст (лет), M±SD	51,18±2,45	48,46±3,84	0,249
Мужчины ( n , %)	41 (35,34)	13 (31,71)	0,673
ОТ/ОБ, M±SD	0,86±0,02	0,85±0,03	0,332
Ожирение ( n , %)	30 (25,86)	11 (26,83)	0,903
САД (мм рт.ст.), M±SD	127,621±3,225	122,21±4,59	0,013
ДАД (мм рт.ст.), M±SD	79,91±1,96	77,39±3,11	0,337
Центральное САД (мм рт.ст.), М±SD	119,018±3,475	110,947±4,64	0,029
Центральное ДАД (мм рт.ст.), М±SD	80,30±2,13	78,79±3,45	0,102
Центральное пульсовое АД (мм рт.ст.), M±SD	38,72±2,55	32,16±2,58	0,154
Центральное среднее АД (мм рт.ст.), М±SD	96,56±2,46	92,30±3,79	0,463
АГ ( n , %)	34 (29,31)	9 (21,95)	0,364
ОХ (ммоль/л), M±SD	5,65±0,21	5,45±0.34	0.318
ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD	3,9±0,19	3,77±0,31	0,592
ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD	1,19±0,06	1,19±0,1	0,896
ТГ (ммоль/л), Meд. (Нкв-Вкв)	0,98 (0,66–1,4)	0,89 (0,76–1,36)	0,983
ГН (ммоль/л), Мед. (Нкв-Вкв)	5,35 (4,9–5,9)	5,3 (5–5,6)	0,237
НвА1с (%), Meд. (Нкв-Вкв)	5,2 (5–5,6)	5,2 (4,9–5,5)	0,496
ИРИ (мкЕД/л), Мед. (Нкв-Вкв)	7,4 (5,6–10,5)	7,6 (5,6–11,95)	0,777
НОМА, Мед. (Нкв-Вкв)	1,83 (1,34–2,56)	1,78 (1,35–2,87)	0,863
ИР ( n , %)	32 (28,32)	12 (30)	0,839

<линическая’2п20

п эакти ка Том 11 №1

Таблица 2. Окончание

Показатель	CC (ТТ) ( n =116)	CT (ТМ) ( n =41)	^p
СД2 ( n , %)	18 (15,52)	3 (7,32)	0,185
Креатинин (мкмоль/л), М±SD	85,03±2,99	82,05±4,03	0,243
ИПФР-1 (нг/мл), Mед. (Нкв-Вкв)	132,5 (108–172)	176,1 (124,5–215,9)	0,027
Альдостерон (пг/мл), М±SD	89,51±13,61	99,66±25,5	0,386
АМ (мг/л), Мед. (Нкв-Вкв)	8,15 (5–16)	8 (4,26–12)	0,282
АУ ( n , %)	5 (5,43)	2 (6,06)	0,893
ДТЛ, M±SD	9,79±0,07	9,92±0,18	0,836
СПВ (м/с), M±SD	8,61±0,37	8,60±0,65	0,553
СПВ >10 м/с ( n , %)	24 (20,69)	10 (24,39)	0,621
ТКИМ (мм), Мед. (Нкв-Вкв)	0,7 (0,59–0,86)	0,7 (0,55–0,76)	0,242
ТКИМ ≥0,9 мм ( n , %)	19 (17,59)	3 (7,69)	0,137
АСБ ( n , %)	54 (50)	13 (33,3)	0,073
ЭЗВД (%), M±SD	10,57±0,66	11,0±0,74	0,326
ЭД ( n , %)	46 (42,99)	11 (29,73)	0,155

Таблица 3

Клиническая характеристика групп с II-, ID- и DD-генотипами полиморфизма Ins>Del гена ACE

Показатель	II ( n =47)	ID ( n =69)	DD ( n =44)	^p
Возраст (лет), M±SD	49,72±3,66	49,83±3,21	52,09±4,03	0,623
Мужчин ( n , %)	13 (27,66)	23 (33,33)	19 (43,18)	0,115
ОТ/ОБ, M±SD	0,83±0,02	0,86±0,02	0,88±0,03	0,044
Ожирение ( n , %)	8 (17,02)	18 (26,08)	15 (34,09)	0,062
САД (мм рт.ст.), M±SD	127,40±5,61	124,99±4,02	127,05±4,26	0,713
ДАД (мм рт.ст.), M±SD	79,28±3,45	78,38±2,35	80,70±2,95	0,529
Центральное САД (мм рт.ст.), М±SD	115,84±6,12	116,99±4,25	118,12±4,74	0,846
Центральное ДАД (мм рт.ст.), М±SD	78,36±3,18	79,85±2,84	81,51±3,33	0,437
Центральное пульсовое АД (мм рт.ст.), M±SD	37,49±4,36	37,13±2,96	36,61±3,49	0,951
Центральное среднее АД (мм рт.ст.), М±SD	94,10±4,12	95,45±3,18	96,89±3,59	0,619
АГ ( n , %)	16 (34,04)	14 (20,29)	14 (31,82)	0,070
ОХ (ммоль/л), M±SD	5,54±0,31	5,60±0,29	5,65±0,30	0,890
ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD	3,76±0,29	3,85±0,25	3,94±0,28	0,697
ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD	1,29±0,09	1,20±0,08	1,09±0,08	0,010
ТГ (ммоль/л), M±SD	1,08±0,21	1,21±0,22	1,37±0,25	0,259
ГН (ммоль/л), Мед. (Нкв-Вкв)	5,4 (5,0-5,9)	5,2 (4,8-5,7)	5,4 (5,5-5,75)	0,470
НвА1с (%), Meд. (Нкв-Вкв)	5,1 (4,7–5,5)	5,2 (5,0–5,7)	5,3 (5,1–5,4)	0,115
ИРИ (мкЕД/л), Мед. (Нкв-Вкв)	8,25±1,32	9,27±2,12	10,06±1,55	0,461
НОМА, Мед. (Нкв-Вкв)	2,09±0,37	2,38±0,59	2,57±0,45	0,495
ИР ( n , %)	12 (26,09)	17 (25,37)	15 (34,88)	0,252
СД2 ( n , %)	5 (10,64)	10 (14,49)	6 (13,64)	0,539
Креатинин (мкмоль/л), М±SD	81,23±4,03	84,10±4,02	87,20±4,34	0,189

Таблица 3. Окончание

Показатель	II ( n =47)	ID ( n =69)	DD ( n =44)	^p
ИПФР-1 (нг/мл), М±SD	169,51±25,21	147,48±14,62	150,24±20,85	0,244
Альдостерон (пг/мл), М±SD	94,63±21,20	84,17±15,36	101,19±29,78	0,511
АМ (мг/л), Мед. (Нкв-Вкв)	9 (6–12,5)	7 (5–14,5)	9 (5–16)	0,921
АУ ( n , %)	2 (5,13)	2 (3,64)	3 (8,82)	0,293
ДТЛ, M±SD	9,85±0,12	9,86±0,12	9,73±0,09	0,272
СПВ (м/с), M±SD	8,41±0,62	8,55±0,52	8,89±0,55	0,541
СПВ >10 м/с ( n , %)	4 (9,09)	9 (14,06)	9 (21,95)	0,092
ТКИМ (мм), M±SD	0,68±0,05	0,71±0,04	0,76±0,06	0,125
ТКИМ ≥0,9 мм ( n , %)	4 (9,09)	9 (14,06)	9 (21,95)	0,092
АСБ ( n , %)	18 (40,91)	30 (46,88)	19 (46,34)	0,518
ЭЗВД (%), M±SD	11,44±1,34	11,06±0,79	9,61±0,86	0,042
ЭД ( n , %)	13 (30,95)	23 (36,51)	22 (53,66)	0,026

Таблица 4

Клиническая характеристика групп с GG-, GT- и TT-генотипами полиморфизма c.894G>T гена NOS3

Показатель	GG ( n =87)	GТ ( n =65)	TT ( n =8)	^p
Возраст (лет), M±SD	51,87±2,83	48,74±3,20	48,25±9,17	0,32
ОТ/ОБ, M±SD	0,87±0,02	0,85±0,02	0,83±0,04	0,253
САД (мм рт.ст.), M±SD	127,45±3,48	125,27±4,28	121,38±13,81	0,528
ДАД (мм рт.ст.), M±SD	79,83±2,26	78,48±2,47	79,88±9,59	0,734
Центральное САД (мм рт.ст.), М±SD	120,60±3,92	113,24±4,32	108,88±11,02	0,022
Центральное ДАД (мм рт.ст.), М±SD	81,30±2,54	78,76±2,61	73,63±7,64	0,113
Центральное пульсовое АД (мм рт.ст.), M±SD	39,29±2,91	34,48±2,97	36,25±6,96	0,074
Центральное среднее АД (мм рт.ст.), М±SD	97,81±2,85	93,24±3,11	88,43±8,55	0,033
ОХ (ммоль/л), M±SD	5,65±0,23	5,65±0,29	4,54±0,36	0,025
ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD	3,91±0,21	3,89±0,26	2,83±0,21	0,014
ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD	1,16±0,06	1,24±0,08	1,27±0,19	0,232
ТГ (ммоль/л), M±SD	5,65±0,23	5,65±0,29	4,54±0,36	0,025
ГН (ммоль/л), Мед. (Нкв-Вкв)	5,3 (5,0–5,9)	5,2 (4,8–5,7)	5,2 (4,85–6,2)	0,684
НвА1с (%), Meд. (Нкв-Вкв)	5,2 (5–5,6)	5,1 (4,7–5,4)	5,35 (5,05–5,6)	0,091
ИРИ (мкЕД/л), Мед. (Нкв-Вкв)	7,38 (5,6–12,2)	7,3 (5,55–9,0)	8,45 (5,45–10,4)	0,532
НОМА, Мед. (Нкв-Вкв)	1,81 (1,34–3,17)	1,74 (1,33–2,27)	1,92 (1,46–2,66)	0,429
Креатинин (мкмоль/л), М±SD	83,06±3,16	86,27±4,05	78,38±8,35	0,26
ИПФР-1 (нг/мл), Mед. (Нкв-Вкв)	131 (105–173)	151 (131–205)	116 (112–0)	0,042
Альдостерон (пг/мл), М±SD	97,24±15,58	81,57±18,32	103,33±77,89	0,420
АМ (мг/л), Мед. (Нкв-Вкв)	9,66 (5–16)	8 (5–12)	5 (3–0)	0,032
ДТЛ, M±SD	9,82±0,09	9,82±0,11	9,86±0,29	0,97
СПВ (м/с), M±SD	8,75±0,47	8,35±0,42	8,99±2,26	0,436
ТКИМ (мм), Мед. (Нкв-Вкв)	0,74±0,04	0,69±0,04	0,61±0,15	0,088
ЭЗВД (%), M±SD	10,19±0,69	11,61±1,02	10,14±1,84	0,06

<линическая’₂п20 п эакти ка Том 11 № 1

центрального САД и центрального среднего АД, выше уровни ОХ и ОХ ЛПНП, более высокий показатель АМ и ИПФР-1 (см. табл. 4).

Сравнение неколичественных параметров проводилось между генотипами GG и GT. Генотип ТТ исключен из анализа в связи с малочисленной группой. Различия были выявлены для частоты эндотелиальной дисфункции: GG — 50%, GT — 27,12% ( p =0,007); альбуминурии: GG — 10%, GT — 0% ( p =0,032), индекса резистентности: GG — 35,29%, GT — 19,05% ( p =0,03). Между АГ, ожирением, СД 2-го типа, повышением скорости пульсовой волны и ТКИМ, наличием атеросклеротических бляшек достоверных различий выявлено не было.

Для оценки связи параметров изменения артериальной стенки (атеросклеротические бляшки,

ТКИМ > 0,9 мм, ЭЗВД <10%, скорость пульсовой волны >10 м/с) с полиморфизмом генов с поправкой на факторы риска ССЗ были построены модели множественной логистической регрессии. Результаты приведены в табл. 5–8.

По данным множественной логистической регрессии выявлена положительная связь наличия атеросклеротических бляшек с возрастом и наличием АГ (см. табл. 5).

Выявлена положительная связь утолщения комплекса интима-медиа с возрастом и мужским полом (см. табл. 6).

Выявлена положительная связь артериальной жесткости с возрастом (см. табл. 7).

Выявлена положительная связь эндотелиальной дисфункции с возрастом и наличием АГ (см. табл. 8).

Таблица 5

Связь наличия атеросклеротических бляшек с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и изучаемыми генотипами

Параметры	β	SE	χ ²статистики Вальда	^p	ОШ	95% ДИ
Параметры	β	SE	χ ²статистики Вальда	^p	ОШ	Нижняя	Верхняя
Мужской пол	0,731	0,500	2,138	0,144	2,078	0,780	5,537
Возраст	0,132	0,025	28,656	0,000	1,141	1,087	1,198
АГ	1,571	0,516	9,282	0,002	4,811	1,751	13,216
СС-генотип AGT	-0,920	0,494	3,465	0,063	0,399	0,151	1,050

Примечание. ОШ — отношение шансов, ДИ — доверительный интервал, АГ — артериальная гипертензия.

Таблица 6

Связь толщины комплекса интима-медиа ≥0,9 мм с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и изучаемыми генотипами

Параметры	β	SE	χ ²статистики Вальда	^p	ОШ	95% ДИ
Параметры	β	SE	χ ²статистики Вальда	^p	ОШ	Нижняя	Верхняя
Мужской пол	1,564	0,681	5,273	0,022	4,776	1,257	18,145
Возраст	0,153	0,037	17,476	0,000	1,165	1,084	1,251
GG-генотип NOS3	-0,550	0,511	1,160	0,281	0,577	0,212	1,570
DD-генотип ACE	-0,443	0,388	1,304	0,254	0,642	0,300	1,373

Примечание. ОШ — отношение шансов, ДИ — доверительный интервал.

Таблица 7

Связь скорости пульсовой волны >10 м/с с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и изучаемыми генотипами

Параметры	β	SE	χ ²статистики Вальда	^p	ОШ	95% ДИ
Параметры	β	SE	χ ²статистики Вальда	^p	ОШ	Нижняя	Верхняя
Возраст	0,173	0,061	8,173	0,004	1,189	1,056	1,339
СС-генотип AGT	-0,822	1,064	0,597	0,440	0,440	0,055	3,537

Примечание. ОШ — отношение шансов, ДИ — доверительный интервал.

Таблица 8

Связь эндотелийзависимой вазодилатации <10% с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и изучаемыми генотипами

Параметры	β	SE	χ ²статистики Вальда	^p	ОШ	95% ДИ
Параметры	β	SE	χ ²статистики Вальда	^p	ОШ	Нижняя	Верхняя
Возраст	0,057	0,019	9,114	0,003	1,058	1,020	1,098
АГ	1,550	0,441	12,329	0,000	4,710	1,983	11,185
GG-генотип NOS3	-0,590	0,357	2,726	0,099	0,554	0,275	1,117
DD-генотип ACE	-0,476	0,280	2,888	0,089	0,621	0,359	1,076

Примечание. ОШ — отношение шансов, ДИ — доверительный интервал, АГ — артериальная гипертензия.

ОБСУЖДЕНИЕ

Связь полиморфизма с.521C>T гена ангиотензиногена ( AGT ) c состоянием артериальной стенки и факторами риска ССЗ

Ген AGT расположен на длинном плече 1-й хромосомы в локусе 1q42.2. Однонуклеотидный полиморфизм с.521C>T (p.T174M) представляет собой замену цитозина на тимин в позиции 521, в результате чего происходит замещение треонина на метионин в 174-й позиции. В нашей работе приведена нуклеотидная запись генотипов данного полиморфизма (CC, CT, TT), которая аналогична аминокислотной записи (ТТ, ТМ, ММ), используемой в литературе [5, 8, 10]. По данным межгруппового сравнения полиморфизма с.521C>T, генотип СТ был связан с более низким САД и центральным САД, а также большим показателем ИПФР-1. Ввиду малочисленности группы генотип ТТ не был включен в статистический анализ.

Ангиотензиноген — предшественник ангиотензина II. Ангиотензин II — ключевой компонент ре-нин-ангиотензин-альдостероновой системы, который играет существенную роль в эндотелиальной дисфункции и пролиферации гладкомышечных клеток, а также вазоконстрикции и фиброзе миокарда, участвует в патогенезе развития АГ [10]. Ангиотензин II способствует выработке NADPH-оксидазы и уменьшает биодоступность NO, запуская каскад образования активных форм кислорода и повреждения артериальной стенки, активирует матрикс-ные металлопротеиназы [2]. Активация ренин-ан-гиотензин-альдостероновой системы играет одну из ключевых ролей в развитии окислительного стресса и хронического вялотекущего воспаления, что в свою очередь приводит к повышению артериальной жесткости и ускоряет процесс сосудистого старения [11].

ИПФР-1 — анаболический гормон, участвующий в росте, репарации и дифференциации клеток. Известно, что высокие нормальные уровни ИПФР-1 играют протективную роль в процессе сосудистого старения [12] и снижают системное воспаление и окислительный стресс [13]. У пациентов с метаболическим синдромом и циррозом печени уровни циркулирующего ИПРФ-1 снижаются с возрастом [14]. Результаты нашего исследования согласуются с данными литературы, где именно Т-аллель полиморфизма p.T174M ассоциирован с развитием ССЗ. Показано, что наличие T-аллеля повышает риск АГ в 1,6 раза [15]. По данным метаанализа W. Wang, Т-аллель связан с риском развития стеноза коронарных артерий [5]. В исследовании I. Isordia-Salas с соавт. была выявлена взаимосвязь полиморфизма p.Т174М с повышенным риском развития инсульта [8].

Связь полиморфизма Ins>Del гена ангиотензинпревращающего фермента ( ACE ) c состоянием артериальной стенки и факторами риска ССЗ

Ген ACE расположен на длинном плече 17-й хромосомы в локусе 17q23.3. Полиморфизм In-s>Del гена ACE представляет собой наличие или отсутствие Alu-повтора размером в 287 пар оснований в интроне 16. Ангиотензинпревращающий фермент участвует в реакции превращения ангиотензина I в ангиотензин II. Ангиотензин II снижает биодоступность NO и активирует воспалительные цитокины, что приводит к развитию эндотелиальной дисфункции [2]. Известно, что активные формы кислорода и окислительного стресса могут вызвать развитие ожирения путем влияния на пролиферацию, дифференцировку и рост адипоцитов, а также влияя на гипоталамические центры, участвующие в контроле потребления пищи

<линическая’2п20

п эакти ка Том 11 №1

[16]. Также активные формы кислорода приводят к окислению ЛПВП, что снижает их антиате-рогенный эффект [17]. По данным результатов межгруппового сравнения генотипов II, ID и DD, у пациентов с генотипами ID и DD чаще выявлялась эндотелиальная дисфункция и отмечалось уменьшение ХС ЛПВП, повышение соотношения объема талии/бедер. Наши данные согласуются с результатами других авторов. По данным литературы, D-аллель ассоциирован с развитием АГ. Так, например, наличие D-аллеля полиморфизма Ins>Del ассоциировано с риском развития АГ в африканской популяции [18]. Генотип DD данного полиморфизма ассоциирован с резистентной АГ в популяции Морокко [7] и АГ в популяции шорцев в Западной Сибири [19]. D-аллель связан с худшим функциональным исходом при перенесенном ишемическом инсульте [20].

Связь полиморфизма c.894G>T гена

NO-синтазы 3-го типа ( NOS3 ) c состоянием артериальной стенки и факторами риска ССЗ

Ген NOS3 расположен на длинном локусе 7-й хромосомы в локусе 7q36.1. Полиморфизм c.894G>T (p.E298D) характеризуется заменой гуанина на тимин в 894-й позиции, что вызывает замену глутаминовой кислоты на аспарагиновую кислоту в 298-й позиции. Полиморфизм c.894G>T обеспечивает регуляцию NO [6]. NO является одной из важнейших молекул-вазодилататоров, снижающих окислительный стресс и участвующих в подавлении агрегации и адгезии тромбоцитов, а также пролиферации гладкомышечных клеток. Нарушение регуляции продукции NO тесно связано с патогенезом ССЗ, включая АГ и ишемическую болезнь сердца [21]. Известно, что нарушение биодоступности NO приводит к усугублению хронического вялотекущего воспаления и окислительного стресса и развитию эндотелиальной дисфункции [22], которая вызывает развитие хронической болезни почек и связанную с ней альбуминурию [23]. Окислительный стресс приводит к повышению уровня окисленных ЛПНП, что способствует усугублению развития атеросклероза. В межгрупповом сравнении полиморфизма c.894G>T у пациентов с генотипом GG отмечались более выраженные изменения артериальной стенки (более низкие значения ЭЗВД и чаще встречающаяся эндотелиальная дисфункция), липидного обмена (повышение ОХ и ОХ ЛПНП), а также чаще встречающиеся аль- буминурия и инсулинорезистентность. Таким образом, G-аллель может быть связан со снижением биодоступности NO, что вызывает эндотелиальную дисфункцию. Данные настоящего исследования не в полной мере согласуются с данными литературы. К примеру, в популяции Пакистана было отмечено, что наличие TT-генотипа данного полиморфизма в 5,7 раза чаще приводит к повышению риска развития ишемической болезни сердца [24]. В исследовании I. Lambrinoudaki и соавт. была обнаружена положительная связь между Т-аллелем данного полиморфизма с повышением артериальной жесткости у молодых женщин [21].

По данным множественной логистической регрессии была выявлена положительная связь изменений артериальной стенки с такими известными факторами риска, как возраст, мужской пол и АГ, что согласуется с результатами других работ [2, 25].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В нашей работе впервые комплексно изучалась связь полиморфных вариантов генов, связанных с развитием ССЗ, факторами риска и параметрами артериальной стенки. Нам удалось выявить связь полиморфных вариантов генов AСE и NOS3 с нарушением эндотелиальной функции. Можно сделать вывод, что носители генотипов ID и DD полиморфизма Ins>Del гена ACE и генотипа GG полиморфизма c.894G>T гена NOS3 могут находиться в группе риска развития изменений артериальной стенки и нуждаться в более агрессивной профилактике эндотелиальной дисфункции и коррекции факторов риска.

ИСТОЧНИК ФИНАНСИРОВАНИЯ

Работа выполнена в рамках государственного задания МГУ имени М.В. Ломоносова с использованием оборудования, закупленного по Программе развития МГУ.

Список литературы Связь полиморфизма генов AGT, ACE, NOS3 с субклиническими изменениями артериальной стенки и факторами риска сердечно-cосудистых заболеваний

World Health Organization. Cardiovascular diseases (heart attack, stroke) [Internet]. WHO; 2019 [accessed 2019 September 26]. Available from: https://www.who.int/westernpacific/health-topics/cardiovascular-diseases.
Стражеско И.Д., Акашева Д.У., Дудинская Е.Н., Ткачева О.Н. Старение сосудов: основные признаки и механизмы // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2012. - Т.11. - №4. - С. 93-100.
Vlachopoulos C, Aznaouridis K, Stefanadis C., Prediction of cardiovascular events and all-cause mortality with arterial stiffness: a systematic review and meta-analysis. J Am Coll Cardiol. 2010;55(13):1318-1327. DOI: 10.1016/j.jacc.2009.10.061
Mozos I, Malainer C, Horbańczuk J, et al. Inflammatory markers for arterial stiffness in cardiovascular diseases. Front Immunol. 2017;8:1058. DOI: 10.3389/fimmu.2017.01058
Wang WZ. Association between T174M polymorphism in the angiotensinogen gene and risk of coronary artery disease: a meta-analysis. J Geriatr Cardiol. 2013;10(1):59-65. DOI: 10.3969/j.issn.1671-5411.2013.01.010
Luo JQ, Wen JG, Zhou HH, et al. Endothelial nitric oxide synthase gene G894T polymorphism and myocardial infarction: a meta-analysis of 34 studies involving 21,068 subjects. PLoS One. 2014;9(1):e87196.
DOI: 10.1371/journal.pone.0087196
Abouelfath R, Habbal R, Laaraj A, et al. ACE insertion/deletion polymorphism is positively associated with resistant hypertension in Morocco. Gene. 2018;658:178-183.
DOI: 10.1016/j.gene.2018.03.028
Isordia-Salas I, Santiago-Germán D, Cerda-Mancillas MC, et al. Gene polymorphisms of angiotensin-converting enzyme and angiotensinogen and risk of idiopathic ischemic stroke. Gene. 2019;688:163-170.
DOI: 10.1016/j.gene.2018.11.080
Cawthon RM. Telomere measurement by quantitative PCR. Nucleic Acids Res. 2002;30(10):e47.
DOI: 10.1093/nar/30.10.e47
Young CN, Davisson RL. Angiotensin-II, the brain, and hypertension: an update. hypertension. 2015;66(5):920-926.
DOI: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.03624
Neves MF, Cunha AR, Cunha MR, et al. The role of renin-angiotensin-aldosterone system and its new components in arterial stiffness and vascular aging. High Blood Press Cardiovasc Prev. 2018;25(2):137-145.
DOI: 10.1007/s40292-018-0252-5
Strazhesko ID, Tkacheva ON, Akasheva DU, et al. Growth hormone, insulin-like growth factor-1, insulin resistance, and leukocyte telomere length as determinants of arterial aging in subjects free of cardiovascular diseases. Front Genet. 2017;8:198.
DOI: 10.3389/fgene.2017.00198
Higashi Y, Sukhanov S, Anwar A, et al. Delafontaine, aging, atherosclerosis, and IGF-1. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2012;67(6):626-639.
DOI: 10.1093/gerona/gls102
González-Guerra JL, Castilla-Cortazar I, Aguirre GA, et al. Partial IGF-1 deficiency is sufficient to reduce heart contractibility, angiotensin II sensibility, and alter gene expression of structural and functional cardiac proteins. PLoS One. 2017;12(8):e0181760.
DOI: 10.1371/journal.pone.0181760
Purkait P, Halder K, Thakur S, et al. Association of angiotensinogen gene SNPs and haplotypes with risk of hypertension in eastern Indian population. Clin hypertens. 2017;23:12.
DOI: 10.1186/s40885-017-0069-x
Manna P, Jain SK. Obesity, oxidative stress, adipose tissue dysfunction, and the associated health risks: causes and therapeutic strategies. Metab Syndr Relat Disord. 2015;13(10):423-444.
DOI: 10.1089/met.2015.0095
Ito F, Sono Y, Ito T. Measurement and clinical significance of lipid peroxidation as a biomarker of oxidative stress: oxidative stress in diabetes, atherosclerosis, and chronic inflammation. Antioxidants (Basel). 2019;8(3). pii: E72.
DOI: 10.3390/antiox8030072
Yuan H, Wang X, Xia Q, et al. Angiotensin converting enzyme (I/D) gene polymorphism contributes to ischemic stroke risk in Caucasian individuals: a meta-analysis based on 22 case-control studies. Int J Neurosci. 2016;126(6):488-498.
DOI: 10.3109/00207454.2015.1036421
Mulerova T, Ogarkov M, Uchasova E, et al. A comparison of the genetic and clinical risk factors for arterial hypertension between indigenous and non-indigenous people of the Shoria Mountain Region. Clin Exp Hypertens. 2018;40(4):324-331.
DOI: 10.1080/10641963.2017.1377215
Malueka RG, Dwianingsih EK, Sutarni S, et al. The D allele of the angiotensin-converting enzyme (ACE) insertion/deletion (I/D) polymorphism is associated with worse functional outcome of ischaemic stroke. Int J Neurosci. 2018;128(8):697-704.
DOI: 10.1080/00207454.2017.1412962
Lambrinoudaki I, Chatzivasileiou P, Stergiotis S, et al. Subclinical atherosclerosis and vascular stiffness in premenopausal women: association with NOS3 and CYBA polymorphisms. Heart Vessels. 2018;33(12):1434-1444.
DOI: 10.1007/s00380-018-1198-1
Incalza MA, D'Oria R, Natalicchio A, et al. Oxidative stress and reactive oxygen species in endothelial dysfunction associated with cardiovascular and metabolic diseases. Vascul Pharmacol. 2018;100:1-19.
DOI: 10.1016/j.vph.2017.05.005
Huang MJ, Wei RB, Zhao J, et al. Albuminuria and endothelial dysfunction in patients with non-diabetic chronic kidney disease. Med Sci Monit. 2017;23:4447-4453.
DOI: 10.12659/msm.903660
Nawaz SK, Rani A, Yousaf M, et al. Genetic etiology of coronary artery disease considering NOS 3 gene variant rs1799983. Vascular. 2015;23(3):270-276.
DOI: 10.1177/1708538114544783
Cheng HM, Park S, Huang Q, et al.; Characteristics on the management of hypertension in Asia-Morning Hypertension Discussion Group (COME Asia MHDG). Vascular aging and hypertension: Implications for the clinical application of central blood pressure. Int J Cardiol. 2017;230:209-213.
DOI: 10.1016/j.ijcard.2016.12.170

Еще

Статья научная