Т-лимфоциты крупного рогатого скота. Функции и маркерные молекулы (обзор)

Т-лимфоцитам принадлежит ведущая роль в регуляции клеточного и гуморального иммунитета; они также осуществляют элиминацию малигнизированных и инфицированных внутриклеточными патогенами аутологичных клеток. Вместе с тем Т-клетки как составная часть иммунной системы тесно взаимодействуют с другими жизненно важными функциями организма. Координация этого взаимодействия осуществляется нейроиммунно-эндокринной системой.

Последний и единственный обзор по маркерам и функциям Т -лимфоцитов крупного рогатого скота был опубликован в нашей стране в 1987 году (1). За истекшие более четверти века достигнут значительный прогресс в изучении роли Т-клеток в иммунных и других физиологических процессах, тесно взаимодействующих с иммунной системой. В настоящее время Т-лимфоциты млекопитающих по экспрессии антигенраспознающих Т-клеточных рецепторов (ТКР) (маркерная молекула) подразделяют на две субпопуляции — a / в и у / 8 . У человека обе эти субпопуляции экспрессируют CD2-молекулы (2). Однако у парнокопытных (в том числе и у крупного рогатого скота) обнаружена значительная уникальная субпопуляция Т-лимфоцитов — y / S -WC1 CD2^- (3, 4).

a / в -Т-л и м ф о ц и т ы. Процессинг, презентация антигенов, структура a / в -ТКР и специфическое связывание последними антигенов подробно описаны в отечественной и зарубежной литературе, поэтому мы лишь вкратце остановимся на этих вопросах.

У крупного рогатого скота a / в -ТКР представлены двумя полипептид-ными цепями — a и в , в клеточной мембране они тесно связаны с полипептид-ным комплексом — СD3-антигеном (2, 5). Распознают a / в -Т-лимфоциты не сам антиген, а его комплекс с аутологичными антигенами (I или II класса) главного локуса гистосовместимости (МНС), представленного на А-клетках (антигенпрезентирующих) (6).

В антигенспецифической активации Т-клеток, обусловленной взаимодействием их комплекса a/в-ТКР-СD3 с процессированным антигеном, встроенном в молекулу I или II класса МНС А-клеток, принимает участие ряд кости-мулирующих молекул лимфоцитов и А-клеток. В этом процессе костимули-рующая гликопротеиновая молекула CD2 связывается с антигеном CD58(LFA-3) А-клеток. В организме, кроме А-клеток, СD58-антиген представлен на многих других клетках. Помимо этого СD58-антиген экспрессирован на эритроцитах барана. До широкого использования моноклональных антител к CD-антигенам реакцию спонтанного розеткообразования (взаимодействие СD2-молекул лимфоцитов и СD58-молекул эритроцитов барана) применяли для выявления панпопуляции Т -клеток человека. У крупного рогатого скота в связи с экспрессией CD2-антигенов на ограниченном количестве Т-лимфоцитов ис- пользовали поликлональные антисыворотки к Thy-антигену (CD90) (1). Кости-муляция антигенспецифической активации Т-клеток осуществляется также посредством взаимодействия СD28-молекул гликопротеина Т-лимфоцитов с СD80- или СD86-молекулами А-клеток. При обратной регуляции (супрессии) этой активности Т-клеток СТLA-4 (СD152) связывается с СD80- или СD86-молекулами (7, 8).

Сама по себе связь комплекса α / β -ТКР-СD3 с антигеном, встроенным в молекулу МНС I или II класса, неустойчива. Этот процесс межклеточного взаимодействия усиливается корецепторными молекулами СD4 или СD8, которые имеют сродство к антигенам МНС I и II класса (2). α / β -СD2-Т-клетки крупного рогатого скота (как и других млекопитающих), экспрессирующие СD4- или СD8-антигены, осуществляют соответственно хелперную или цитотоксическую функции иммунитета (2, 9).

α / β -СD4-Т-лимфоциты по хелперной активности относят либо к субпопуляции Тh1 — стимуляция цитотоксической функции Т-киллеров, либо Тh2 — усиление синтеза В-лимфоцитами высокоаффинных антигенспецифических антител (10). Антигенспецифическое распознавание обеспечивает первый активационный сигнал для СD4-клеток, который индуцирует экспрессию на них СD40-L (L-лиганд); последние связываются с СD40-молекулой А-клеток, стимулируя в них синтез интерлейкинов (ИЛ-1 и ИЛ-6), которые способствуют пролиферации и предупреждают апoптоз «naive» Т-хелперов (11). Ко-стимулирующие молекулы CD80 и CD86 дендритных клеток, взаимодействуя с антигеном CD28 на поверхности Т-хелперов, стимулируют экспрессию ИЛ-2R, а также секрецию этого лимфокина; ИЛ-2 (как и ИЛ-1) обеспечивает пролиферацию СD4-клеток и их апоптогенную защиту.

Взаимодействие молекул CD40-L субпопуляции α / β -ТКР-CD3-, СD4-Т-лимфоцитов с CD40-антигеном дендритных клеток активирует также синтез ИЛ-12, который регулирует дифференцировку субпопуляций Тh0 в Тh1 и индуцирует синтез последними провоспалительных цитокинов — γ -интерферона ( γ -ИФ) и α -фактора некроза опухолей ( α -ФНО) (11). Эти цитокины обеспечивают формирование антигенспецифических цитотоксических СD8-Т-лимфоцитов (9).

Субпопуляция Тh2 секретирует ряд цитокинов — ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-10 и ИЛ-13, оказывающих противовоспалительное действие, стимулируя антигенспецифическую дифференцировку клонов В-клеток в плазматические клетки. Эти цитокины индуцируют также синтез антител различных классов и изотипов, в частности IgE (9).

Между субпопуляциями Тh1 и Тh2 существует антагонистическое взаимодействие, которое определяется количеством ИЛ-10 и ИЛ-12 в микроокружении; ИЛ-4 и γ -ИФ также участвуют в этом процессе. Выявлена реверсия между субпопуляциями Тh1 и Тh2 (12). Помимо количественного соотношения про- и противовоспалительных цитокинов в микроокружении направленность иммунного ответа по клеточному или гуморальному пути определяется также дозой антигенов, местом проникновения последних в организм, фенотипом А-клеток (9).

В середине 90-х годов прошлого столетия было установлено, что деление на субпопуляции Тh1 и Тh2 носит условный характер; в наибольшей степени оно присуще иммунной системе мышей. Так, по данным Brown с соавт., у крупного рогатого скота из 60 клонов антигенспецифических СD4-Т-клеток большинство продуцировало одновременно ИЛ-4 и γ -ИФ, полярная секреция этих цитокинов наблюдалась в меньшей степени (9).

Несмотря на то, что СD4-Т-лимфоциты относят к популяции Тh, часть из них обладает прямой цитолитической активностью (функцией Т-киллеров). Считают, что функция СD4-T-клеток осуществляется посредством мембранного а -ФНО.

а / в -CDS-Т-лимфоциты обеспечивают главным образом иммунитет к внутриклеточным патогенам и малигнизированным клеткам. Известно три типа цитолитической функции СDS-Т-лимфоцитов: апоптоз клеток-мишеней посредством взаимодействия а -ФНО рецептора (или CD95) с мембранным а -ФНО; нарушение мембран клеток-мишеней порообразующими молекулами, синтезируемыми CD8-T-клетками. В этих двух случаях Т-киллеры вызывают гибель только самих инфицированных аутологичных клеток, но не патогенов. На живые патогены, вышедшие в межклеточное пространство, оказывают влияние противоинфекционные агенты широкого спектра действия (комплемент, фагоцитоз и др.). В третьем случае эффект цитолитической функции CD8-T-лимфоцитов обусловлен образованием пор и прохождением через них пептида гранзима, способного вызывать гибель патогенов широкого спектра действия.

У крупного рогатого скота, как и у других видов млекопитающих, выявлено также прямое бактерицидное действие (киллинг) Т-лимфоцитов по отношению к внеклеточным патогенам. Для проявления этой функции, как и для индукции классических а / в -СD8-Т-клеток, необходима специфическая сенсибилизация. В то же время эффекторное звено этого вида иммунитета неспецифично. В присутствии ресенсибилизирующего антигена Т-клетки секретируют бактерицидные факторы, вызывающие гибель внеклеточных патогенов широкого спектра действия (13, 14).

В настоящее время признано некорректным определение С DS-Т-лимфоцитов в качестве киллеров/супрессоров, так как показано, что супрессия как CD4-, так и СD8-антигенов осуществляется их собственными CD158-молекулами. К тому же клетки, которые ранее относили к Т-супрессорам, как сейчас установлено, в действительности являются регуляторными Т-лимфоцитами, не угнетающими иммунный ответ, а изменяющими его направленность (клеточный и гуморальный пути).

у / 8 -Т-л и м ф о ц и т ы — субпопуляция Т-клеток, которая экспрессирует y / 8 -ТКР, образующие мембранный комплекс с CD3 -антигеном. В то же время в отличие от а / в -Т-лимфоцитов распознавание антигенов Y / 8 -Т-клетками не ре-стриктировано по антигенам МНС. Считается, что это распознавание может быть рестриктировано по неклассическим молекулам МНС I класса и J-подобным молекулам (CD1 + ), также связанным с в ₂-микроглобулином, но не входящим в этот локус. Показано, что у / 8 -Т-лимфоциты способны распознавать бактериальные антигены и белки теплового шока (HSP60), что имеет важное значение для противоинфекционного иммунитета, так как эти белки являются молекулами адгезии и факторами патогенности инфекционного агента.

Большинство Y / 8 -Т-клеток млекопитающих имеет внетимусное происхождение и так же, как а / в -Т-клетки, экспрессирует CD2-, CD40-L-, CD5-, CD6-и СD90-молекулы, но не экспрессирует CD4-молекулы; незначительное количество этих клеток (за исключением внутриэпителиальных) содержит CD8 -молекулы (7, 15). Эти клетки синтезируют те же цитокины, что CD4- и CD8- а / в -Т-лимфоциты (16, 17). Так, цитотоксические по отношению к аутологичным эндотелиальным клеткам, инфицированным риккетсиями ( Cowdria ruminantium ), Y / 8 -CD2⁺-Т-лимфоциты продуцировали про - и противовоспалительные цитокины — ИЛ-2, ИЛ-4, y -ИФ, а -ФНО и экспрессировали ИЛ-2К (18).

Как и a / в -CD8-, Y / 8 -CD8-Т-лимфоциты обладают способностью лизировать малигнизированные и инфицированные внутриклеточными патогенами клетки, но в отличие от первых у них эта функция осуществляется без предварительной сенсибилизации (19, 20). Цитотоксическое действие y / 8 -CD2⁺- и a / в -CD2⁺-Т-клеток на моноциты, инфицированные Mycobacterium tuberculosis , было практически одинаковым, хотя в первой субпопуляции киллеров синтезировалось больше у -ИФ, нежели во второй (20).

Внутриэпителиальным Y / 8 -Т-лимфоцитам принадлежит важная роль в защите от респираторных заболеваний. В тканях органов дыхания количество лимфоцитов этой субпопуляции значительно превосходит таковое a / в -CD8-Т-клеток (15). Защита от респираторных заболеваний осуществляется посредством интенсивного синтеза Y / 8 -Т-клетками a -ФНО и y -ИФ (21, 22). Обработка телят моноклональными антителами к CD8-антигену усиливала клинические признаки инфекции, вызванной синтициальным респираторным вирусом (23).

У коров в период лактации в эпителии и секрете молочной железы преобладали Y / 8 -CD8-Т-клетки, продуцирующие Y -ИФ. Субпопуляция a / в -Т-клеток, присутствующая в молочной железе в меньшем количестве, экспрессировала CD8-антигены, но по сравнению с аналогичными клетками периферической крови экспрессировала в 2 раза больше CD2 -антигенов. В сухостойный период в молочной железе, наоборот, преобладали CD4-Т-лимфоциты (24).

Y / 8 -WC1 CD2^--Т - л и м ф о ц и т ы. В начале 90-х годов прошлого века было обнаружено, что значительная часть Y / 8 -Т-лимфоцитов крупного рогатого скота не экспрессирует CD2-антиген, но обладает уникальным трансмембранным гликопротеином, имеющим высокую степень сходства с костимулирую-щими молекулами CD5 и CD6 (25). Эта молекула получила название Workshop Clauster 1 (WC1) (4); она была выявлена у свиней и овец (26, 27). Однако не обнаружено экспрессии WC1 на Т-лимфоцитах человека и грызунов, хотя методом гибридизации ДНК ген, кодирующий этот гликопротеин, был идентифицирован в геноме человека и лошади (28).

Обработка WCl-Т-клеток моноклональными антителами к CD3-антигену стимулировала их пролиферацию, которая останавливалась под влиянием моноклональных антител к WC1 -антигену. WC1 -Т-лимфоциты не экспрессируют CD4-, CD6- и CD8-антигены, но на них, как и на двух других субпопуляциях Т-клеток ТКР ( a / в -CD2⁺ и y / 8 -CD2^-), был представлен CD90-антиген (25).

Функции WC1 -Т-лимфоцитов до сих пор мало изучены. В покоящихся (неактивированных) WC1 -Т-клетках обнаружена экспрессия мРНК a -ФНО, a -ИЛ-2, костимулирующих молекул CD28 и CTLA-4 (CD152); не выявлена экспрессия мРНК ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-10 и y -ИФ (8). Добавление к этим клеткам ИЛ-2 стимулировало их пролиферацию (21), которая блокировалась антителами к WC1-антигену (28). При стимуляции Кон-А все клоны CD4⁺-Т-клеток экспрессировали FASL (молекулы, сходные по структуре и функциям с a -ФНО), но крайне малое число WC1 -Т-клонов экспрессировало эту молекулу (29). У коров, экспериментально инфицированных Mycobacterium bovis , установлено увеличение в периферической крови числа WC1 -клеток уже на ранних стадиях заболевания. Эти клетки наряду с CD4- и CD8-Т-лимфоцитами обнаружены в клеточных гранулемах животных, больных туберкулезом (30). В то же время in vitro в присутствии антигенов M. bovis WC1-клетки, полученные как от больных, так и от здоровых животных, одинаково пролиферировали, но в отличие от CD8-Т-лимфоцитов не продуцировали y -ИФ (20).

У овец, обработанных моноклональными антителами к WC1 -антигену, снижался протективный иммунитет при экспериментальном заражении Tricho-strongylus colibryformis , хотя и в меньшей степени, чем под влиянием антител к CS-антигенам или y -ИФ (31). Об участии WC1 -клеток в иммунобиологическом контроле свидетельствует и тот факт, что у 6-месячных телят, пасущихся в стаде, по сравнению со сверстниками, содержащимися в стойлах, количество в периферической крови WC1-T-лимфоцитов было существенно выше и их пролиферация в аутологичной смешанной культуре лимфоцитов проходила значительно интенсивнее (32).

У новорожденных телят в периферической крови преобладают WC1 -Т-клетки, доля которых достигает 45 %. С возрастом количество этих клеток снижается и составляет по достижении 1 года около 30 %, а у взрослых животных — не более 10 %. Численность CD2-Т-лимфоцитов с возрастом практически не меняется: при рождении — около 25 %, у взрослых — не более 30 % (4). По данным других авторов, количество этих клеток с возрастом снижается (33). В этой же работе отмечена тенденция снижения с возрастом количества CD4 - и CDS-Т-лимфоцитов: после рождения соответственно 30 и 20 %, у взрослых животных — 20 и 10 %. По другим данным, этот показатель практически не меняется (4).

Противоположная тенденция наблюдается по количеству В -лимфоцитов. Так, в 1 -е сут после рождения у телят доля В-клеток в периферической крови составляет не более 15 %, тогда как у взрослых животных — 32 % (4, 33). Численность y / 8 -CD2⁺-T -лимфоцитов у молодняка и взрослых животных была практически одинаковой и не превышала 5-10 % (4). На 12-е сут первичной инвазии Eimeria bovis в периферической крови животных (крупный рогатый скот) было отмечено значительное увеличение CD2-, CD4- и CD8-лимфоцитов, к 25-м сут — снижение числа CD4- и CD8-клеток, тогда как количество CD2-лимфоцитов оставалось высоким длительное время (34).

В отличие от периферической крови в селезенке преобладали y / 8 -CD2⁺- Т-лимфоциты: у телят их количество составляло около 36 %, у взрослых животных — 27 %. В то же время общая численность CD2-Т-клеток ( а / в + у / 8 ) с возрастом не менялась и составляла около 55 %. Количество WC1 - и CD8-T-лимфоцитов как у телят, так и у взрослых животных составляло соответственно 5 и 30 %. Доля CD4-Т-клеток у телят не превышала 5 %, но по достижении взрослого возраста увеличивалась до 12 %. В отличие от периферической крови в селезенке содержание В-клеток с возрастом снижалось — у телят и взрослых особей соответственно 27 и 18 % (4).

Отмечена зависимость функционирования иммунной системы (в том числе и Т -лимфоцитов) от других физиологических функций, обеспечивающих поддержание нормального процесса воспроизводства. Так, установлена взаимосвязь между концентрацией в крови лептина (гормон, регулирующий аппетит), провоспалительных цитокинов и системой нейроэндокринной регуляции овариальной функции (35), хотя у жвачных этот процесс имеет свои особенности (36).

У крупного рогатого скота, как и у других видов млекопитающих, у/8-Т-лимфоциты осуществляют важную иммунотрофическую функцию при нормальном пренатальном развитии. Эти клетки, мигрирующие в предплацентационный период из селезенки к месту прикрепления зародыша, секретируют противовоспалительные цитокины (ИЛ-4, ИЛ-10), трансформирующий фактор роста (в-ТФР) и гранулоцит-макрофаг-колониестимулирующий фактор (ГМ-КСФ), повышающие антиапоптогенную защиту клеток зародыша. Нарушение этого фи- зиологического процесса вызывает снижение эмбриональной выживаемости (37, 38).

Непосредственно перед отелом и во время отела в периферической крови значительно снижается общее содержание популяции лимфоцитов (CD3 и sIg), а также их отдельных субпопуляций — CD2, CD3, CD4, CD8, WC1 и sIg (39, 40). В то же время в других исследованиях отмечено в 1 -ю нед после отела увеличение в периферической крови количества CD4-Т-клеток, которое снижалось к 16-м сут после отела; динамика CD8- и Wd-Т-лимфоцитов была противоположной (41). По данным Shafer-Weaver с соавт., в 1 -е сут после отела в периферической крови количество у / 8 - и sIg-экспрессирующих клеток было почти в 1,5 раза ниже, чем в середине периода лактации, а число моноцитов — в 2 раза выше (42). При этом CD4-Т-лимфоциты продуцировали ИЛ-4 и ИЛ-10, тогда как в середине периода лактации — y -ИФ и ИЛ-2. После отела снижается митоген-индуцированная активность лимфоцитов и синтез y -ИФ, интенсивность синтеза В-клетками Ig практически не меняется (39). У коров непосредственно перед отелом, во время отела и в течение 2-3 нед после отела в периферической крови увеличивается количество и фагоцитарная активность нейтрофилов, возрастает хемотаксис, но уменьшается образование супероксидного радикала, оксида азота и антителзависимая цитотоксичность, что отчасти связано со снижением активности субпопуляции Тhl.

Имеются данные о том, что в поддержании необходимого иммунного гомеостаза принимают участие липополисахариды (ЛПС) клеточной стенки микроорганизмов желудочно-кишечного тракта (43). Считается, что симпатоадреналовая система регулирует количество ЛПС, поступающих в кровь, минуя печень.

Иммунный гомеостаз, процессы роста животных и их продуктивность тесно взаимосвязаны. Провоспалительные цитокины оказывают апоптогенное действие, угнетают аппетит и стимулируют катаболитические процессы. Противовоспалительные цитокины, напротив, обладают антиапоптогенным действием, способствуют усилению аппетита и активируют анаболитические процессы.

Таким образом, функции и маркеры Т -лимфоцитов крупного рогатого скота, несмотря на существенное сходство с таковыми других видов млекопитающих, имеют и значительные видовые отличия. Во -первых, у крупного рогатого скота (как и у других парнокопытных) Т-лимфоциты представлены тремя субпопуляциями, две из которых — a / e -CD2⁺ и y / 8 -CD2⁺ — характерны и для других видов млекопитающих, тогда как третья — y / 8 -CD2^- — уникальна и присуща только парнокопытным. Функции a / в -CD2⁺- и Y / 8 -CD2⁺-Т-клеток сходны у крупного рогатого скота и других видов млекопитающих. Однако в отличие от наиболее изученных a / в -CD2⁺-Т-лимфоцитов человека (85-90 % популяции Т-клеток) у крупного рогатого скота эта субпопуляция составляет менее 1/3 всех Т-клеток периферической крови. Во-вторых, y / 8 -CD2^--T- лимфоциты, экспрессирующие уникальную молекулу WC1, составляют большинство Т -клеток пер иферической крови крупного рогатого скота. В то же время о функциях этих лимфоцитов мало что известно. В-третьих, все три субпопуляции Т -лимфоцитов крупного рогатого скота, несмотря на существенную разницу в экспрессии ими CD4- и CD8-молекул, продуцируют схожие про- и противовоспалительные цитокины. В-четвертых, у крупного рогатого скота соотношение Т-лимфоцитов, имеющих CD4- и CD8-молекулы, практически не зависит от возраста животных.

Л И Т Е Р А Т У Р А

• 1.    Р а д ч е н к о в В.П., Л и т в и н о в И.С. Маркеры и функции Т-лимфоцитов крупного рогатого скота. С.-х. биол., 1987, 12: 115-123.

• 2.    D a v i s W.C., H a m i l t o n M.J. Comparison of unique characteristics of immune system in different species of mammals. Vet. Immunol., Immunopath., 1998, 63, 1-2: 7-13.

• 3.    V i l l a r d – R a m o s B., A n l a y M., C h a n c e V. e.a. Investigation the role of CD8 T-cell in bovine tuberculosis in vivo. i nf . i mmunol ., 2003, 71, 8: 4297-4303.

• 4.    W a t t C.R., M a d r u g a C., C l u f f C. e. a. Differential distribution of T-cell receptor lymphocyte subpopulations in blood and spleen of young and adult cattle. Vet. Immunol., Immunopapth., 1994, 40: 3 187-199.

• 5.    Q u a d e M.J., R o t h J.A. Dual-color flow cytometric analysis of phenotype activation marker expression and proliferation of mitogen-stimulated bovine lymphocyte subpopulation. Vet. Immunol., Immunopath., 1999, 67, 1: 33-45.

• 6.    H o w a r d C.J., H o p e J.C. Dendritic cells implication on function from of afferent lymph veiled cell. Vet. Immunol., Immunopath., 2000, 77, 1-2: 11-13.

• 7.    C o l l i n s R.A., S o p p P., G e l d e r K.J. e.a. Bovine γδ TCR ⁺ lymphocytes are stimulated to proliferate by autologus Thileria annulata infected cell in the presence of interleukin-2. Scand. J. Immunol., 1996, 44:8 444-452.

• 8.    F i k r i Y., N y a b e n d J., D e n i s M. e.a. Purification and characterization of bovine WC1 ⁺ γδ T-lymphocytes from peripheral blood. Vet. Res., 2000, 31: 2 229-239.

• 9.    B r o w n W.C., A l l i s o n C. R-F., E s t e r D.M. Bovine type 1 and types 2 responses. Vet. Immunol., Immunopath., 1998, 63, 1-2: 45-65.

• 10.    L o n d o n C.A., A b b a s A.K., K e l s o A. Helper T-cell subsets: heterogeneity function and development. Vet. Immunol., Immunopath., 1998, 63, 1-2: 37-42.

• 11.    H i r a n o A., W e n d y C., T r i g o n a W. e.a. Kinetics of expression and subset distribution of TNF superfamily member CD40 ligand and FAS ligand on T-lymphocytes in cattle. Vet. Immunol., Immunopath., 1998, 61, 2/4: 251-263.

• 12.    S t a b o D.J., D i g h e A.S., L u b l e r N. Regulation of interleukin (IL)-12 beta2 subunit expression in developing T-helper 1 and T-helper 2. J. Exp. Med., 1997, 185, 1: 817-824.

• 13.    Р а д ч е н к о в В.П., Х л о п о н и н В.С., М о р о з А.Ф. Антибактериальная активность Т-лимфоцитов крупного рогатого скота по отношению к Pseudomonas aeruginosa . Докл. РАСХН, 2003, 4: 44-47.

• 14.    Р а д ч е н к о в В.П., Х л о п о н и н В.С., М о р о з А.Ф. Участие макрофагов в прямом антибактериальном иммунитете Т-лимфоцитов крупного рогатого скота к условно-патогенным бактериям. Вест. РАСХН, 2004, 4: 80-82.

• 15.    E s t e s D.M., B r o w n W.C., H i r a n o A. e.a. CD40 Ligand-dependent signaling of bovine β -lymphocyte development and differentiation. Vet. Immunol., Immunopath., 1998, 68, 1-2: 15-20.

• 16.    M a t h y N.L., W o l k e r J., L e e R.P. e.a. Characterization of cytokine profiles and double-positive lymphocytes subpopulation in normal bovine lungs. Amer. J. Vet. Res., 1997, 58, 9: 969-979.

• 17.    M c B i d e J.W., C o v s t v e t R.F., D i e t r i c h M.F. e. a. Memory and CD8⁺ are the predominant bovine bronchoalveolar lymphocyte phenotypes. Vet. Immunol., Immunopath., 1997, 58, 1 : 55-62.

• 18.    M w a n g i D.M., M a h a n S.M., N y a n j u i J.K. e.a. Immunization of cattle by infection with Cow-dria ruminantium elicits T-lymphocytes that recognize authologus infected endothelial cells and monocytes. Inf. Immunol., 1998, 66, 5: 1856-1860.

• 19.    R e n j i t o X., L e t e l l i e r C., K i e l L.M. e.a. Susceptibility of bovine antigen-presenting cells to infection by bovine herpesvirus 1 and in vitro presentation to T-cell-two independent events. J. Virol., 1999, 73, 6: 4840-4846.

• 20.    V a n K a m p e n C., M a l l a r d B.A. Effect peripartum stress and health circulating bovine lymphocyte subset. Vet. Immunol., Immunopath., 1997, 59, 1/2: 79-91.

• 21.    C o l l i n s R.A., C a m o n E.B., C h a p l i n P.J. e.a. Influence of IL-12 on interferon- γ production by bovine respiratory syncytial virus. Vet. Immunol., Immunopath., 1998, 63, 1-2: 69-72.

• 22.    R o n t v e d C.M., T j o r u c h o j R., V i u l f f B. e.a. Increased pulmonary secretion of tumor necrosis factor- α in calves experimentally infected with bovine respiratory syncytial virus. Vet. Immunol., Immunopath., 2000, 76, 3-4: 199-204.

• 23.    T a y l o r G., T h o m a s L.H., W y l d S.G. e.a. Role of lymphocyte subsets in recovery from respiratory syncytial virus infection in calves. J. Virol., 1995, 69, 3: 6658-6664.

• 24.    A s a i K., K o m i n e Y., K o z u t s u m i T. Predominant subpopulation of T-lymphocytes in mammary gland secretions during lactation. Vet. Immunol., Immunopath., 2000, 73, 3-4: 232-240.

• 25.    C l e v e r s H., M a c H u g N.D., B e n s a i d A. e.a. Identification of bovine surface antigen expressed in CD8^– T-cell receptor γδ T-lymphocytes. Eur. J. Immunol., 1990, 20, 6: 809-817.

• 26.    L i c e n c e S.T., D a v i s W.C., C a r r M.M. e.a. The behavior of monoclonal antibodies in First International Pig Workship reacting with γδ /null T-lymphocytes in the blood of SLAB/b line pigs. Vet. Immunol., Immunopath., 1995, 47, 3: 253-271.

• 27.    M c C l u r e S.J., H e i n W.R., Y a m a g u c h I W.R. e.a. Ontogenety, morphology and tissue distribution of a unique subset CD4^– CD8^– sheep T-lymphocytes. Immunol. Cell. Boil., 1991, 67, 2: 215-221.

• 28.    K i r k h a m P.A., T a k a m a t s u H., P a r k h o u s e R.M. e.a. Growth arrest of γ γδ T-cell induced by monoclonal antibody against WC1 correlate with activation of multiple tyrosin posphatasesa and dephospho-rilation of MAP erk2. Eur. J. Immunol., 1997, 27, 8: 717-725.

• 29.    J e n s e n E.R., L l a s s A.A., C l a r k W.R. e.a. Fas (CD95)-dependent cell-mediated immunity to Listeria monocytogenes . Inf. Immunol., 1998, 66, 9: 4143-4150.

• 30.    S m y t h A.J., W e l s e n M.D., G i r v i n R.M. e.a. In vitro responsiveness of γδ T-cell from Mycobac-teruim bovis infected cattle to mycobacterium antigens: predominant involvement of WC1⁺ cell. Inf. Immunol., 2001, 69, 1: 89-96.

• 31.    M c C l u r e I.J., G a v l y R.L., E m e r y D.L. e.a. In vivo depletion of T-cells and cytokines during primary exposure of sheep to parasites. Vet. Immunol., Immunopath., 1996, 54, 1-4: 83-90.

• 32.    B a l d w i n C.L., S a t h i y a s e e l a n T., R o c c i M. e. a. Rapid changes occur in the percentage of circulating bovine γδ WC1⁺ Th1-cells. Res. Vet. Sci., 2000, 69, 2: 175-180.

• 33.    I n o k u m a H. Changes of peripheral blood lymphocyte subclasses of Japanese Black newborn calves. Anim. Sci. Technol., 1997, 68, 1: 84-87.

• 34.    H e r m o s i l l a C., C u r g e r H.J., Z a h n e r H. e.a. T-cell responses in calves to primary Eimeria bovis infection: phenotypical and functional changes. Vet. Parasitol., 1999, 84, 1-2: 49-64.

• 35.    B o i s c l a i r Y.R., E h r h a r d t R.A., B l o c k S.S. e. a. What is leptin and what role might it play in ruminant metabolism? Proc. Nutrition Confer. for Feed Manufacture, 2000: 72-80.

• 36.    S o l i m a n M., I s h i o k a K., K i m u r a K. e.a. Plasma leptin responses to lipopolysaccharide and tumor necrosis factor- α in cows. Jap. J. Vet. Res., 2002, 50, 2-3: 107-114.

• 37.    Р а д ч е н к о в В.П., М и х а й л е н к о Е.В., Б о г д а н о в а Н.В. и др. Повышение эмбриональной выживаемости у коров, иммунизированных спермиями быков. Докл. РАСХН, 2000, 1: 35-37.

• 38.    H e y b o r n e K., F u Y-X., N e l s o n A. e.a. Recognition of trophoblasts by γδ T-cells. J. Immunol., 1994, 153, 2: 2918-2928.

• 39.    S h a f e r - W e a v e r K.A., S o r d i l l o L.M. Bovino CD8⁺ suppressor lymphocytes after immune responsiveness during postpartum period. Vet. Immunol., Immunopath., 1997, 56, 1-2: 53-64.

• 40.    K i m u r a K., G o f f J.P., K e h r i M.E. e.a. Phenotype analysis peripheral blood mononuclear cells in periparturient dairy cows. J. Dairy. Sci., 1999, 82, 6: 3315-319.

• 41.    W a l v a v e n s K., W e l l e m a n s V., W e y n a n t V. Analysis of the antigen — specific IFN- γ γ producing T-cell subset in cattle experimentally infected with Mycobacterium bovis . Vet. Immunol., Immunopath., 2002, 84, 1: 29-41.

• 42.    S h a f e r - W e a v e r K.A., C o r l C.M., S o r d i l l o L.M. e.a. Shifts in bovine CD4⁺ subpopulations increase T-helper 2 compared with T-helper 1 effector cells postpartum period. J. Dairy. Sci., 1999, 82, 2: 1696-1706.

• 43.    Я к о в л е в М.Ю. «Эндотоксиновая агрессия» как предболезнь или универсальный фактор патогенеза заболеваний человека и животных. Усп. совр. биол., 2003, 123, 1: 31-40.

Российская академия менеджмента в животноводстве , 142143, Московская обл., Подольский р-н, пос. Быково