Токсикологическая оценка нового импортозамещающего дезинфицирующего средства Рекодез

Автор: Угрюмова В.С., Хисамутдинов А.Г., Угрюмов О.В., Равилов Р.Х., Яруллин Р.С., Равилов А.З.

Журнал: Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана @uchenye-zapiski-ksavm

Статья в выпуске: 1 т.225, 2016 года.

Бесплатный доступ

Дезинфектант Рекодез относится к умеренно опасным веществам, не оказывает отрицательного влияния на клинические, гематологические и биохимические показатели животных.

Дезинфектант, токсикологические, гематологические, биохимические показатели

Короткий адрес: https://sciup.org/14288777

IDR: 14288777

Текст научной статьи Токсикологическая оценка нового импортозамещающего дезинфицирующего средства Рекодез

В настоящее время особое внимание уделяется разработке импортозамещающих дезинфицирующих средств на основе отечественного сырья. При этом особое место в рецептуре композиционных новых дезинфицирующих средств занимают четвертичные аммониевые соединения (ЧАС). Эти вещества составляют основу большей части новых разработок российского и зарубежного производства. Введение ЧАС в рецептуру дезинфицирующих средств обеспечивает снижение токсичности, приданию дезинфектантам антикоррозийных свойств и усилению биологической активности, обусловленной синергизмом [2].

Рекодез – принципиально новое импортозамещающее дезинфицирующее средство широкого спектра антимикробного действия, содержащее в своем составе ЧАС, разработанное ЗАО Научно-производственный центр «Химтехно» [8]. При разработке и внедрении новых дезинфицирующих средств наряду с изучением их биологической активности необходимым является изучение токсикологических свойств. Согласно Методическим указаниям «Оценка токсичности и опасности дезинфицирующих средств» (МУ 1.2.1105-02) [4], утвержденным Главным государственным санитарным врачом РФ 10.02.02г., изучение токсичности дезинфицирующих средств определяется видом дезинфекции с дифференцированным подходом к их изучению.

Исходя из вышеизложенного, целью данных исследований являлось изучение токсикологических показателей нового дезинфектанта Рекодез.

Материалы и методы. Исследования проводили в следующей последовательности: оценка параметров «острой» токсичности; изучение местнораздражающего действия и действия на слизистые оболочки глаз;

кожно-резорбтивное действие;

изучение влияния препарата Рекодез на клинический статус, гематологические и биохимические показатели крови сельскохозяйственных животных.

Исследование «острой» оральной токсичности дезинфицирующего средства Рекодез проводили общепринятыми методами согласно «Методическим указаниям по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве», «Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ [6]. Величину ЛД50 вычисляли по методу Кербера. Полученные величины ЛД50 при введении в желудок классифицировали по 4 классам опасности в соответствии с ГОСТ 12.1.00776.

Определение кожной резорбции проводили в подостром эксперименте на крысах (10-20 аппликаций) с ежедневной экспозицией 2-4 часа. Нанесение препарата осуществляли пробирочным методом на 2/3 хвоста животного, что составляет 5% поверхности тела. Обследование подопытных животных проводили через 510-20 аппликаций. Влияние препарата Рекодез на организм телят и крупного рогатого скота после проведения влажной дезинфекции изучали с применением клинических, гематологических и биохимических исследований общепринятыми методами [1]. Гематологические и биохимические исследования проводили общепринятым методом с использованием аппаратов-анализаторов Hema screm13 и screm master.

Исследования лейкоцитарной формулы крови проводили в окрашенных по Романовскому-Гимза мазках периферической крови. Подсчитывали не менее 200 клеток, а затем выводили процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Количество общего белка в сыворотке крови определяли с помощью рефрактометра ИРФ-22. Определение фракций белка сыворотки крови проводили методом Олла и Маккарда в модификации Карпюка А.С.

Оценку местно-раздражающего действия проводили согласно методическим указаниям «Оценка воздействия вредных химических соединений на кожные покровы и обоснование предельно-допустимых уровней загрязнения кожи» [5] в однократных и повторных (10-12 аппликаций) опытах. В экспериментах использовали 2 вида животных (кролики, белые крысы). Для изучения раздражающего действия на кожу животных отбирали со светлой кожей. Время экспозиции составляло 4 часа. Препарат наносили в нативном виде из расчета 20 мг/см площади выстриженного участка. Площадь участка аппликаций для кроликов составляла 8x9 см, для крыс - 3x4 см. Реакцию кожи регистрировали через 20 часов и затем в течение 14 дней после воздействия по сравнению с симметричными контрольными участками кожи того же животного. Отмечали функционально-морфологические изменения кожи (эритема, отек, трещины, изъязвления, сухость, шелушение и др.). Выраженность эритемы определяли визуально или с помощью колориметрической линейки.

Классификацию эритемы проводили в баллах. Величину отека определяли путем изменения кожной складки (мм). Изучение местного действия препарата на слизистую оболочку глаза проводили однократно на кроликах. В один глаз вносили препарат в количестве 1-2 капли, другой глаз служил контролем. Регистрация изменений слизистой оболочки глаза, склеры, роговицы проводили визуально сразу после воздействия, через час и ежедневно в течение 14 дней. Отмечали выраженность гиперемии и отека слизистой оболочки, инъекцию сосудов клеры, состояние роговицы, количество и качество выделений из глаз.

Результаты исследований. При изучении острой оральной токсичности препарата Рекодез было установлено, что у мышей оральное введение раствора препарата в минимальных дозах (800-1000 мг) на кг живой массы вызывало возникновение симптомов легкого отравления, которые исчезали через 6-10 часов. Дача препарата в максимально переносимой дозе (1600 мг/кг) вызывала угнетение общего состояния, одышку и дрожь. По истечении 8-12 часов данные симптомы исчезали.

При введении препарата в смертельных дозах (5200 мг/кг) наблюдалось резкое ухудшение общего состояния через 2-3 минуты, а также хорошо выраженные признаки интоксикации, характеризовавшейся сильным беспокойством, выраженной одышкой, дрожью и ослаблением сердечнососудистой деятельности. Гибель мышей наступала в течение 3-6 часов. Картина патологоанатомических исследований характеризовалась общим венозным застоем, отеком легких, асфиксическим сердцем и катаральным гастроэнтеритом.

В результате исследований установлено, что максимально переносимая доза (МПД) Рекодеза для взрослых белых мышей составляет 1600 мг/кг; абсолютно смертельная доза - 5200 мг/кг; LD 5 о -4140 мг/кг. Исходя из этого, препарат Рекодез согласно ГОСТу 12.1.007-76 относится к умеренно опасным веществам (III класс опасности).

Таблица 1 - Влияние препарата Рекодез на клинический статус, гематологические и биохимические показатели крови КРС до и после проведения влажной дезинфекции

Показатели		До обработки (контроль)		После проведения дезинфекции через
		До обработки (контроль)		24 часа		72 часа		30 дн
		М	m	М 1	m 1	М 2	m 2	М 3	m 3
« у	температура, °С	38,7	0,21	38,9	0,19	39,0	0,19	38,9	0,17
	пульс, уд./мин	73,0	0,8	73,1	0,68	72,5	0,57	80,0	0,7
	дыхание, дых. дв ./мин	11,8	0,34	11,7	0,32	11,9	0,48	12,8	0,5
Q S о о у к о R О Й ftp	эритроциты, 10^\|2/л	6,8	0,09	6,38	0,07	6,95	0,07	6,81	0,05
	лейкоциты, 10^у/л	7,69	0,04	6,89	0,09	7,65	0,03	7,74	0,039
	базофилы, %	0,29	0,21	0,2	0,09	0,32	0,05	0,34	0,08
	зозинофилы, %	5,8	0,12	5,9	0,07	6,2	0,08	6,9	0,15
	нейтрофилы, %:
	палочкоядерные	5,5	0,14	6,2	0,17	5,93	0,12	5,0	0,22
	сегментоядерные	26,8	0,51	32,4	0,43	31,3	0,29	32,2	0,28
	лимфоциты, %	55,1	0,49	54,8	0,52	56,4	0,55	52,4	0,49
	моноциты, %	6,98	0,31	6,75	0,58	6,23	0,49	4,01	0,11
о К И о у к 2 X О и	гемоглобин, г/л	105,4	2,18	106,2	2,8	104,5	3,01	102,0	2,9
	общ.белок, г/л	7,2	0,07	7,1	0,09	7,5	0,06	7,4	0,09
	альбумины, г/л	2,49	0,05	2,8	0,023	25,1	0,04	2,41	0,02
	глобулины, г/л:
	α	1,09	0,007	1,05	0,03	1,08	0,02	1,09	0,008
	β	0,98	0,005	0,95	0,006	0,95	0,03	0,96	0,008
	γ	2,29	0,012	2,4	0,032	2,59	0,019	2,69	0,021

Примечание: Р >0,05

Таблица 2 - Влияние препарата Рекодез на клинический статус, гематологические и биохимические показатели крови телят до и после проведения влажной дезинфекции

Показатели		До обработки (контроль)		После проведения дезинфекции через
		До обработки (контроль)		24 часа		72 часа		10 дней		30 дн
		М	m	М 1	m 1	М 2	m 2	М 3	m 3	М 4	m 4
к ^и S о у	температура, °С	39,0	0,21	39,5	0,21	39,4	0,17	39,2	0,15	39,3	0,15
	пульс, уд./мин	74,5	0,87	73,2	0,61	71,9	0,59	72,9	0,61	73,1	0,61
	дыхание, дых. дв./мин	12,5	0,35	12,4	0,39	12,5	0,45	13,2	0,41	12,9	0,44
S о У S ^ о о н л 5 ftp	эритроциты, 10¹²/л	6,39	0,05	6,39	0,04	6,31	0,07	6,31	0,04	6,6	0,08
	лейкоциты, 10⁹/л	8,81	0,07	7,80	0,03	7,91	0,045	7,77	0,09	7,85	0,03
	базофилы, %	0,28	0,14	0,25	0,08	0,29	0,05	0,34	0,08	0,25	0,069
	зозинофилы, %	6,3	0,14	6,8	0,07	6,69	0,08	6,41	0,21	6,9	0,17
	нейтрофилы, %:
	палочкоядерные	6,2	0,18	6,01	0,2	5,94	0,25	6,3	0,18	6,8	0,15
	сегментоядерные	29,0	0,47	29,5	0,31	3,0	0,41	29,1	0,38	30,1	0,32
	лимфоциты, %	52,91	0,43	53,9	0,62	53,1	0,58	53,9	0,51	53,9	0,39
	моноциты, %	4,71	0,22	3,75	0,08	4,71	0,09	4,72	0,07	3,51	0,05
V к S S о S и	гемоглобин, г/л	102,1	2,13	103,2	2,19	98,9	2,3	108,4	2,9	103,2	2,4
	общ.белок, г/л	7,4	0,03	7,1	0,05	7,1	0,081	7,21	0,05	7,09	0,09
	альбумины, г/л	2,71	0,08	2,72	0,021	2,61	0,03	2,62	0,01	2,74	0,05
	глобулины, г/л:
	α	1,2	0,007	1,04	0,01	1,2	0,02	1,11	0,007	1,09	0,06
	β	0,98	0,006	0,96	0,005	0,92	0,01	0,99	0,09	0,99	0,009
	γ	2,53	0,013	2,54	0,025	2,47	0,031	2,51	0,02	2,49	0,03

Примечание: Р >0,05

Оценка раздражающего действия препарата Рекодез производилась визуально на основе наблюдений за изменениями слизистой оболочки глаза, склеры и роговицы после воздействия, через час и ежедневно в течение 14 дней. При введении препарата в конъюнктивальный мешок глаз кроликов и морских свинок в 2%-ой концентрации наблюдались гиперемия, отек конъюнктивы и окружающих тканей, а также слезотечение и светобоязнь, которые исчезали на 4-5 сутки наблюдений.

Изучение местно-раздражающего действия препарата Рекодез показало, что ежедневные аппликации раствора на кожу кроликов и белых крыс в течение 14 дней в 2%-ной концентрации вызывают развитие дерматита без образования корки и трещин; при этом имели место гиперемия и шелушение кожи, которые исчезали на 5-6 сутки наблюдений. При однократном нанесении на чистую кожу препарат в нативном виде не вызывает изменений. Необходимо отметить, что при внутрикожном введении препарата «Рекодез» морским свинкам в ухо по методу Алексеевой-Петкевич сенсибилизирующее действие не выявлено.

При исследовании клинического статуса, гематологических и биохимических показателей крови крупного рогатого скота и телят, содержащихся в клетках и помещениях после проведения влажной дезинфекции, не выявлено закономерных изменений (Р>0,05) (таблицы 1-2).

Таким образом, анализ данных токсикологических исследований показывает, что дезинфицирующее средство Рекодез относится к III классу опасности (ГОСТ 12.1.007-76), обладает умеренно раздражающим действием на конъюнктиву глаз, слабым местнораздражающим и кожно-резорбтивным действиями, не обладает сенсибилизирующим действием.

Резюме

Ygryumova V.S., Khisamutdinov A.G., Ygryumov O.V., Ravilov R.Kh., Yarullin R.S., Ravilov A.Z. Summary

Recodez disinfectant is related to moderately hazardous substances. It does not have negative influence on clinical, hematologic, biochemical variables of animals.

Список литературы Токсикологическая оценка нового импортозамещающего дезинфицирующего средства Рекодез

Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики/Справочник//Под. Ред. И.П. Кондрахина -М.: Колос., 2004. -520 с.
Краснобаев Ю.В., Краснобаева О.А. Вироцид в присутствии животных -новые аспекты безопасности//Ветеринария. 2011. №3. С.15-17.
Методические указания по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве, Ветеринарные препараты, Справочник -М., 1988.
Методические указания МУ 1.2.1105-02 «Оценка токсичности и опасности дезинфицирующих средств» утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 10 февраля 2002г.
Методические указания 2196-80. К постановке исследований по изучению раздражающих свойств и обоснованию предельно допустимых концентраций избирательно действующих раздражающих веществ в воздухе рабочей зоны, Минздрав СССР, М., 1980.
Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Фисенко В.П., Арзамасцев Е.В., Багали Э.А. и др., М, 2000. -С.247-248.
Угрюмова В.С., Равилов А.З., Фахретдинов П.С. и др. Четвертичные аммониевые соединения -перспективное направление в ветеринарной дезинфектологии//Ветеринарный врач. 2005.№1. С. 59-63.
Угрюмов О.В., Яруллин Р.С., Хисамутдинов А.Г. и др. Новые импортозамещающие дезинфицирующие препараты для животноводства и птицеводства//Межрегиональное издание «Аграрная тема» 8 (73) 2015. С. 17-19.

Еще

Статья научная