Видовой состав и антимикотикорезистентность грибов рода Candida, выделенных от цыплят-бройлеров

В настоящее время наблюдается распространение условно патогенных дрожжеподобных грибков рода Candida среди больных и здоровых людей и животных, а также рост заболеваемости кандидозом [1]. Candida spp ., являясь оппортунистическим патогеном, может вызывать поражение слизистых оболочек разной степени тяжести, вплоть до развития системных микозов [2].

Данные о чувствительности грибов рода Candida к противогрибковым препаратам имеют региональные особенности и носят разрозненный характер [3]. Для эффективной терапии инфекционно-воспалительных заболеваний, вызванных Candida spp. , необходимо учитывать результаты регионального мониторинга распространения антимикоти-корезистентности грибов рода Candida .

Цель исследования – изучить видовое разнообразие и антимикотикорезистент-ность дрожжеподобных грибов рода Candida, выделенных из помета цыплят-бройлеров.

Материалы и методы

В работе использовано 38 штаммов грибов рода Candida , изолированных из помета цыплят-бройлеров. Выделение и идентификацию грибов рода Candida проводили по Р.Н. Ребровой (1989) [4]. Восприимчивость к антимикотическим препаратам определяли с помощью расширенного набора дисков (нистатин – 80 мкг/диск, итраконазол – 10 мкг/диск, флуконазол – 40 мкг/диск, клотримазол – 10 мкг/диск, кетоконазол – 20 мкг/диск, амфотерицин В – 40 мкг/диск) для оценки чувствительности к противогрибковым препаратам диско-диффузионным методом (ФБУН «НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера», Санкт-Петербург).

Статистически полученные результаты обработаны с помощью параметрических методов [5].

Результаты исследований

Показано, что из 40 обследованных цыплят-бройлеров у 38 (95%) из фекалий изолированы Candida spp . с показателем микробной обсемененности от 1 ∙ 10³ до 1 ∙ 10⁴ КОЕ/г.

Проведена идентификация выделенных грибов Candida . Установлено видовое разнообразие: C. intermedia, C. glabrata, C. utilis, C. albicans. Доминировал вид C. Intermedia : в 36,8% случаев. 26,3% фекальных изолятов отнесены к виду C. glabrata , 21,1% штаммов дрожжеподобных грибов идентифицированы как C. utilis и 15,8% – как C. albicans .

На следующем этапе исследования была изучена резистентность выделенных грибов рода Candida к противогрибковым препаратам.

Показана максимальная чувствительность грибов рода Candida к клотримазолу (79% изолятов) и нистатину (60,5% штаммов). Отмечена минимальная чувствительность (2,6% изолятов) к итраконазолу.

Вместе с тем выявлен высокий процент резистентности выделенных грибов к противомикробным препаратам: к итраконазолу резистентны 50% изолятов, к нистатину – 39,5% штаммов, к кетоконазолу – 34,2%.

Установлены и межвидовые различия антимикотикочувствительности выделен-

Антимикочувствительность разных видов грибов рода Candida , выделенных из помета цыплят-бройлеров: «*» – достоверность различий частоты встречаемости штаммов, резистентных / чувствительных / умеренно резистентных к одному препарату по сравнению с другим (p < 0,05)

Показано, что кишечные изоляты C. albicans максимально чувствительны к клот-римазолу – 83,3%. 50% выделенных штаммов продемонстрировали чувствительность к нистатину, флуко- и кетоконазолу.

Отмечено, что для половины штаммов C. albicans характерна резистентность к нистатину, 33,3% культур – к флуко-, итрако- и кетоконазолу.

Показано, что достоверно чаще встречались штаммы, умеренно устойчивые к итраконазолу (66,7%), чем к флуко- и кетоконазолу (16,7%) (p < 0,05).

Изоляты C. glabrata значимо чаще проявляли чувствительность к нистатину (80%), чем к клотримазолу (50%), флуко- и кетоконазолу (30%) (р < 0,05). Не выявлены штаммы, чувствительные к итраконазолу.

Для 50% изолятов C. glabrata характерна устойчивость к действию клотримазола, итрако- и кетоконазола, 40% - флуконазола и 20% - нистатина.

Выявлена умеренная устойчивость 50% кишечных штаммов C. glabrata к итраконазолу, 30% - к флуконазолу, 20% - к кетоконазолу.

Установлено, что гораздо чаще штаммы C. intermedia проявляли чувствительность к клотримазолу - 85,7%, чем к нистатину (35,7%), кетоконазолу (28,5%) и флуконазолу (7,1%) (p < 0,05). К итраконазолу выделенные штаммы чувствительности не проявляли.

Отмечено, что 64,3% изолятов C. intermedia обладали резистентностью к нистатину, 57,2% - к итраконазолу, 35,7% - к кетоконазолу, 21,5% - к флуконазолу и 14,3% - к клотримазолу.

Обнаружено, что больше всего штаммов C. intermedia (71,4%) проявляло умеренную устойчивость к флуконазолу, к итраконазолу - 42,8% кишечных изолята, к кетоконазолу - 35,8% штаммов.

Достоверно чаще кишечные изоляты C. utilis были чувствительны к клотримазолу (100%) и нистатину (87,5%), чем к кетоконазолу (50%), флуконазолу (37,5%) и итраконазолу (12,5%) (р < 0,05).

Половина выделенных штаммов C. utilis продемонстрировала резистентность к итраконазолу, 12,5% изолятов - к нистатину, флуко- и кетоконазолу, при этом штаммов, резистентных к клотримазолу, не обнаружено.

Выявлена умеренная устойчивость к флуконазолу у 50% кишечных штаммов C. utilis и у 37,5% изолятов - к итрако- и кетоконазолу.

В отношении нистатина и клотримазола умеренная устойчивость у кишечных изолятов Candida spp . не отмечена.

Заключение

Для количественной характеристики антимикотикорезистентности изученных штаммов дрожжеподобных грибов рода Candida использован показатель «маркер резистентности» - МР [6].

При анализе чувствительности Candida spp . к противогрибковым препаратам МР равен 0,21 ± 0,02.

Что касается межвидовых различий, максимальный уровень антимикотикорези-стентности установлен у C. glabrata (МР 0,4 ± 0,05), минимальный - у C. albicans (МР 0,12 ± 0,03). У C. intermedia МР - 0,21 ± 0,04.

Таким образом, в результате проведенных исследований изучены региональные особенности видового состава и антимикотикорезистентности дрожжеподобных грибов, выделенных из помета цыплят-бройлеров. Показана максимальная чувствительность грибов рода Candida к клотримазолу и нистатину.

Выводы

Доминирующее положение в видовом составе кишечного биотопа цыплят-бройлеров занимали культуры дрожжеподобных грибов non-albicans видов C. intermedia (36,8%), C. glabrata (26,3%), C. utilis (21,1%). Доля C. albicans - 15,8% изолятов.

Выявлен высокий процент резистентности C. glabrata (40-50% штаммов) к клот-римазолу, флуко-, итрако- и кетоконазолу, штаммов C. intermedia (55-65%) - к нистатину и итраконазолу, изолятов C. albicans (50%) - к нистатину.

Показано, что максимально чувствительны грибы рода Candida к клотримазолу и нистатину.

Рекомендации

Препаратами выбора для терапии инфекционно-воспалительных заболеваний, вызванных Candida spp. , могут быть клотримазол и нистатин.

Так как противогрибковая терапия должна проводиться с учетом региональных особенностей антимикотикорезистентности Candida spp., полученные нами данные будут способствовать выбору препаратов для эффективной терапии животных с факторными инфекционно-воспалительными заболеваниями, вызванными дрожжеподобными грибами.

Т.М. Pashkova ^{1, 2} , M.V. Sycheva ^{1, 2}, O.L. Kartashovа ^{1, 2}

1Institute of Cellular and Intracellular Symbiosis, Ural Branch of the Russian Academy of Sciences, Orenburg

2Orenburg State Agrarian University, Orenburg

Species composition and antimico-resistance of fungi of the genus Candida allocated from chicken-broilers

The article presents the species composition and the register of antimycotic resistance of fungi of the genus Candida isolated from the chicken-broilers brood. Species C. intermedia (36.8%) dominated in species diversity, C. glabrata (26.3%), C. utilis (21.1%) and C. albicans (15.8%) were less common.

To quantify the antimycotic resistance of Candida spp . the indicator “resistance marker” – MR was used. It was shown that MR isolated Candida spp . to antifungal agents is 0.21 ± 0.02. As for interspecific differences, the maximum level of MR was established in C. glabrata (0.4 ± 0.05), the minimum level in C. albicans (0.12 ± 0.03). In C. intermedia , MR was 0.21 ± 0.04.

The maximum sensitivity of fungi of the genus Candida to clotrimazole and nystatin was shown in the result of this study. The data obtained by us will contribute to the selection of drugs for effective therapy of animals with factor infectious-inflammatory diseases caused by fungi of the genus Candida .