Влияние антиоксидантных препаратов разных механизмов действия на уровень продуктов перекисного окисления липидов в организме суягных овцематок

Овцеводство в настоящее время одно из самых активно развивающихся направлений в животноводстве Рязанской области. Романовская порода овец самая востребованная и экономически выгодная. Являясь полиэстричными животными, романовские овцематки не имеют сезонности в размножении и могут иметь два окота в год. Длительность суягности у них составляет 145-155 суток. Мясо, полученное от овец, имеет хорошие пищевые качества, обладает высокой калорийностью, в нем много витаминов, а содержание жира ниже, чем в других видах мяса.

Продукцию хорошего качества можно получать только от здоровых животных. Изучение антиоксидантной системы в организме суягных овцематок актуально, поскольку в периоды стрессовых ситуаций, которыми являются сезонность, изменение кормления, роды и т.д. количество конъюгатов в крови увеличивается, что может негативно отразится на родовом процессе и в последующем на здоровье потомства.

Липиды, которые входят в состав мембраны клетки, подвергаются окислению свободными радикалами. В результате данного процесса происходит их разрушение с образованием продуктов распада. Этот процесс называется перекисным окислением липидов (ПОЛ).

Изначально, происходит образование диеновых конъюгатов жирных кислот (ДКЖК). При дальнейшем воздействии на ДКЖК гидроксильных радикалов, образуются гидроперекиси липидов. Образовавшиеся продукты перекисного окисления воздействуют на фосфолипидные составляющие мембран и структур клеток, нарушая работу органоидов и организма в целом. Под воздействием свободных радикалов, жирные кислоты распадаются до конечных продуктов окисления: альдегидов, перекисей, диеновых конъюгатов (ДК), малоновых диальдегидов (МДА), шиффовых оснований.

Таким образом, оксигенный стресс оказывает негативное влияние на метаболизм клеток и мембранных образований, изменяя их физикохимические свойства и проницаемость [1].

Антиоксиданты – это естественные или синтетические вещества, снижающие или нейтрализующие окислительное действие свободных радикалов.

Ранее проводились исследования по влиянию антиоксидантных препаратов на процессы перекисное окисление липидов (ПОЛ) у крупного рогатого скота в разные физиологические периоды состояния животных (сухостойный и стельный периоды, лактация). Опытным путем выявлено положительное влияние препаратов «Бутофан» и «Е-селен» на состояние собственной антиоксидантной системы организма, снижение оксидативного стресса за счет связывания количества свободных радикалов в крови [2, 3, 4, 6].

Целью наших исследований являлось выявление механизмов действия препаратов «Катозал» и «Е-селен» на интенсивность процессов перекисного окисления липидов в организме суягных овцематок с 3-го по 5-й месяц суягности.

В задачи исследования входило:

– изучение интенсивности работы антиоксидантной системы организма, путем подсчета и оценки уровня продуктов ПОЛ в крови: первичных - диеновых конъюгатов (ДК) и вторичных – малонового диальдегида (МДА) в разные периоды суягности;

– установление уровня продуктов перекисного окисления липидов в организме животных при физиологическом стрессе;

– определение закономерностей между уровнем продуктов перекисного окисления липидов и работой собственной антиоксидантой системы (АОС) организма.

Материал и методы исследований.

Исследования проводились в условиях АО «Московское», Рязанского района, Рязанской области на 9 суягных овцематках – аналогах романовской породы, сформированных в три группы: контрольную и две опытные по 3 головы в каждой. Для исследований были отобраны овцематки в возрасте 2-х лет, 2018 года рождения, живой массой 54±1,5 кг. Эксперимент продолжался на протяжении 155 суток, животные подвергались ежедневному осмотру ветеринарным специалистом хозяйства и были клинически здоровы.

Животные получали корм три раза в день, рационы соответствовали нормам РАСХН [5]. Овцематки контрольной группы были интактными.

Витаминсодержащие препараты «E-селен» и «Катозал» производятся фармакологическими предприятиями России. «E-селен» оказывает сильно выраженное антиоксидантное действие, является иммуностимулятором, кроме того способствует снижению стрессовых факторов и уменьшению токсических веществ в организме, также оказывает затормаживающее и нейтрализующее действие на окислительные реакции, протекающие в клетках. «Катозал» – один из наиболее эффективных ветеринарных препаратов, стимулирующих обменные процессы в организме. Улучшает рост молодняка, состояние костносоединительной ткани, кожи и шерсти, активизирует функцию печени, способствует подготовке к родам, участвует в восстановлении клеточных мембран, относится к комплексным препаратам общеукрепляющего действия.

Таблица 1 – Схема опыта (n=9)

Группа	Применение препарата
Контрольная	Дистиллят Н 2 О плацебо 1 мл / голову раз в месяц с третьего месяца суягности в течение 2-х месяцев
Опытная 1	«Е-селен» внутримышечно 1 мл / голову раз в месяц с третьего месяца суягности в течение 2-х месяцев
Опытная 2	«Катозал» внутримышечно 4 мл на голову раз в месяц с третьего месяца суягности в течение 2-х месяцев

В составе «Катозала» основными действующими веществами являются бутафосфан – 10 гр., цианкобаламин – 0,005 гр, в качестве вспомогательных веществ используется бутанол, гидроокись натрия и вода для инъекций. Схема применения препаратов опытным овцематкам приведена в таблице 1.

Пробы крови отбирали, в утренние часы до кормления, из ярёмной вены раз в месяц на протяжении 5 месяцев суягности. Кровь стабилизировали 10 % раствором этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) в количестве 0,1 мл раствора на 10 мл исследуемой крови. Затем кровь центрифугировали и проводили спектрофотометрическое исследование выделенной сыворотки на анализаторе ApelPD-303UV в лаборатории факультета ветеринарной медицины и биотехнологии РГАТУ. Полученные результаты подвергались статистической обработке с помощью специализированных компьютерных программ «Statistica» и

«Excel».

Результат исследований. На 3-м месяце суягности в крови всех групп овцематок отмечалось повышение продукции ДК. В контрольной группе по сравнению с показателями животных в опытных группах, они были выше (Таблица 2).

Таблица 2 – Показатели продукции ДК и МДА в плазме крови овцематок по месяцам суягности (n=9)

Группы	ДК, мкмоль/л	МДА, усл.ед.
1-й месяц суягности
Контрольная	48±2,93	8,07±0,78
Опытная № 1	51±3,27	8,02±0,73
Опытная № 2	52±4,14	8,09±0,89
2-й месяц суягности
Контрольная	51±3,86	9,13±0,72
Опытная № 1	54±5,24	8,62±0,81
Опытная № 2	54±4,44	9,03±0,84
3-й месяц суягности
Контрольная	59±5,63	9,62±0,83
Опытная № 1	56±5,17	9,1±0,89
Опытная № 2	57±5,25	9,21±0,91
4-й месяц суягности
Контрольная	58±5,24	8,9±90,6
Опытная № 1	46±4,85	7,63±0,62
Опытная № 2	30±3,28	7,52±0,61
5-й месяц суягности
Контрольная	56±5,29	8,54±0,79
Опытная № 1	45±4,74	6,87±0,62
Опытная № 2	26±3,17	6,46±0,56

По сравнению с 1-м месяцем суягности, в контроле этот показатель увеличился на 18,75 %, в опытной группе 1 на 9,8 % и в опытной группе 2 на 9,71 %. На 4-м месяце суягности, под влиянием антиоксидантных препаратов, образование ДК в опытных группах овцематок по сравнению с 3-м месяцем снизилось: в опытной группе 1 на 17,86 %, в опытной группе 2 на 47,37 %. На пятом месяце в опытной группе 1 данный показатель остался практически на том же уровне, в то время как в опытной группе 2 он снизился еще на 13,34 %, что наглядно характеризует положительную работу препарата «Катозал».

Функцию собственной антиоксидантной системы в организме суягных овцематок можно проследить по результатам образования ДК у животных контрольной группы, в которой он занимал максимальную позицию во все периоды отбора проб, что свидетельствует о недостаточной активности ее по периодам суягности.

Малоновый диальдегид является вторичным продуктом окисления и часто образуется из диеновых конъюгатов. Начиная с 1-го месяца суягности, уровень МДА в крови суягных овцематок увеличивался и к 3-му месяцу достиг максимальных значений во всех группах. В контрольной группе животных он увеличился на 19,2 %, в опытной 1 - 7,48 %, в опытной 2 - 13,84 %. На 4-м месяце суягности в опытных группах этот показатель снижался под влиянием антиоксидантных препаратов, и разница по сравнению с 3-м месяцем составила в опытной группе 1 - 16,6 % и в опытной группе 2 - 18,35 %. В то время, как в контроле разница составила 6,55 %. На последнем, 5-м месяце суягности показатель малонового диальдегида по сравнению с 4-м месяцем, значительно уменьшился в (%): в опытной группе 2 на 14,1 %, в опытной 1 на 9,97 %, что наглядно характеризует работу применяемых препаратов. В контрольной группе снижение было не столь значительным, разница составила 5,01 %.

К периоду окота на 5-м месяце суягности, по сравнению с 3-м месяцем, продукция МДА в крови животных опытной группы 2 уменьшилась на 29,86 %, в опытной 1 на 24,51 %, в контроле на 11,23 %.

Уменьшение образования продуктов ПОЛ во всех группах к 4-му и 5-му месяцам суягности, по нашему мнению, можно объяснить увеличением количества гормонов к периоду родов. О чем свидетельствуют данные литературных источников, констатирующие, что концентрации экстрадиола и пролактина в крови животных, начиная с третьего месяца беременности и перед родами, существенно увеличивается, достигая максимальных значений [7]. В опытных группах это достигалось так же дополнительным действием антиоксидантных препаратов «Е-селен» и «Катозал», о чем наглядно свидетельствуют показатели продукции ДК и МДА, которые в опытных группах были значительно ниже по сравнению с контролем (Таблица 2).

Известно, что при недостатке селена, постоянных стрессовых факторах и недостаточности питательных элементов, количество продуктов перекисного окисления становится выше и в организме может быть вызван, так называемый, оксигенный стресс, в ходе которого наблюдается недостаток собственных антиоксидантов [3].

Полученные результаты позволили установить, что, несмотря на естественную антиоксидантную защиту, в организме овцематок в период суягности наилучшие результаты отмечались при применении препарата «Катозал», который был применен овцематкам опытной группы 2.

Заключение . Таким образом, применяемые витаминсодержащие препараты «Е-селен» и «Катозал», усиливали действие собственной антиоксидантной системы организма суягных овцематок, повышая её резистентность к воздействию окислительных стресс-факторов. Антиоксидантные препараты снижали количество образующихся свободных радикалов, способствуя разложению и выведению их из организма, тем самым оказывая тормозящее влияние на процессы перекисного окисления липидов на разных стадиях суягности.

Повышение продукции ДК на 3-м месяце суягности овцематок, в так называемый ее «пик», по сравнению с 1-м месяцем, в опытной группе 1 на 9,8 %, с опытной группой 2 на 9,71 %, в контроле на 18,75%. В этот ответственный период, происходит закладка плодов в организме овцематок, что отражается на уровне собственной антиоксидантной системы. Подобное увеличение прослеживается и в случае с МДА, который является вторичным продуктом окисления и образуется зачастую из диеновых конъюгатов. Разница в контрольной группе по сравнению с опытной группой 1 составила 7,48 % и опытной группой 2 – 13,84 %.

На 4-м и 5-м месяцах суягности, по мере снижения интенсивности процессов ПОЛ в крови опытных овцематок, под влиянием антиоксидантных препаратов, концентрация продукции ДК и МДА уменьшилось. Особенно значительными эти показатели были в опытной группе 2, где применялся препарат «Катозал».