Влияние хронического пиелонефрита на активность сукцинатдегидрогеназы лимфоцитов периферической крови у беременных женщин

Изменение энергетики является составной частью всех адаптационных процессов. Адаптивные реакции организма при воздействии неблагоприятных факторов изучались многими авторами [1, 2, 5, 9].

При возникновении инфекционно-воспалительного процесса в организме также происходит этапная перестройка системы адаптации по стадиям – тревоги, резистентности и истощения. В стадию тревоги возрастает интенсивность окисления всех доступных субстратов митохондрий (MX), которая может достигать величин, близких к максимальным. Пролонгация нагрузки вызывает формирование состояния резистентности, которое обеспечивается процессами кратковременной и долговременной адаптации. Первая характеризуется напряжением путей поставки субстратов и удалением продуктов реакций, участвующих в наработке макроэргов, вторая – синтезом новых ферментов и MX. Если компенсаторные механизмы не справляются с нарастающим расходом мак- роэргов, наступает стадия истощения адаптивной реакции системы энергопродукции – снижение скорости окисления субстратов (преимущественно сукцината), нарастанием торможения сукцинатдегидрогеназы, разобщением процесса окислительного фосфорилирования [4, 11–13].

Большое значение в возникновении осложнений беременности имеют экстрагенитальные заболевания, среди которых патология почек занимает второе место. Их частота, по данным разных авторов, колеблется от 0,1 до 10% [3, 7, 8, 10, 12, 14].

Цель: изучение энергетического статуса у беременных женщин с хроническим пиелонефритом.

Материал и методы

Для изучения энергетического обмена нами было обследовано 60 беременных женщин в сроке беременнос- ти от 10 до 38 недель гестации. Первую группу составили 30 здоровых беременных женщин, не страдающих патологией почек, вторую – 30 женщин с хроническим пиелонефритом в анамнезе. У всех пациенток было получено информированное согласие на использование данных обследования в научных целях и согласие этического комитета на проведение исследования.

Исследование состояния энергетического обмена оценивали с помощью количественного цитохимического метода определения активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ) в лимфоцитах периферической крови на основном субстрате (сукцинат натрия) и с включением в среду инкубации активаторов фермента: глютаминовой и изолимонной кислот. Добавление активаторов СДГ к среде инкубации значительно расширяет выявленный диапазон активности фермента. Важно, что лимфоциты, близкие по активности СДГ, определяемой в присутствии только ЯК, могут быть четко дифференцированы после добавления активатора по проявлению скрытого торможения или, напротив, релаксированного состояния. Значительные изменения при внесении активатора наблюдаются и в структуре популяции лимфоцитов. Это позволяет более глубоко оценивать процессы, лежащие в основе адаптивных сдвигов, происходящих в организме [6].

Об активности фермента в клетке судили по количеству темно-фиолетовых гранул формазана, образовавшихся в процессе ферментативного восстановления п-нитротетразолия фиолетового. Для определения активности фермента в популяции лимфоцитов подсчитывали количество гранул в 30 клетках, а затем проводили расчет параметров распределения популяции для оценки ферментного статуса.

В рамках цитохимического анализа крови ферментный статус популяции клеток характеризуется типичной активностью в изученной совокупности клеток, гетерогенностью популяции по активности фермента, сбалансированностью пулов клеток с низкой и высокой активностью фермента, резервом или недостатком клеток с типичной для данной популяции активностью фермента, энзиматическим разнообразием клеток. Все указанные параметры распределения получали, проводя статистическую обработку результатов: типичная ферментативная активность (Q), коэффициенты относительной энтропии информации (Н), вариации (V), асимметрии распределения (А) и эксцесса (Е).

Статистическая обработка полученных данных выполнялась с использованием лицензионного пакета SPSS v 14.0 (Providence Software Solutions, США). Учитывая нормальное распределение данных, достоверность различий оценивали с помощью парного t-критерия Стьюдента. Анализ корреляционных связей переменных проводился по методу Пирсона. Статистически значимыми считали различия при уровне р<0,05.

Результаты

Данные ферментного статуса лимфоцитов крови у беременных женщин сравниваемых групп представлены в таблице.

В результате проведенного исследования метаболи-

Таблица

Динамика показателей ферментного статуса лимфоцитов крови у беременных женщин сравниваемых групп

Показатели Первая группа, n=30 Вторая группа, n=30 Q Без активаторов Глутамат Изоцитрат 14,7±0,79 12,9±0,61 16,4±0,6 13,9±0,54 18,9*±1,70 19,6±0,53 A Без активаторов Глутамат Изоцитрат 0,5±0,06 0,4±0,05 0,5±0,08 0,4±0,25 0,5±0,34 0,7*±0,56 E Без активаторов Глутамат Изоцитрат 0,2±0,14 –0,2±0,12 0,3±0,19 0,5*±0,34 0,6*±0,45 0,7*±0,46 V Без активаторов Глутамат Изоцитрат 58,5±1,83 61,5±1,78 54,5±1,96 69,1±7,45 65,1±6,49 54,5±7,29 H Без активаторов Глутамат Изоцитрат –0,5±0,01 –0,5±0,01 –0,5±0,01 –0,6±0,12 –0,5±0,08 –0,6±0,12 примечание: * – достоверность различия показателей с первой группой.

ческого статуса лимфоцитов в первой и второй группах женщин были выявлены схожие показатели типичной ферментативной активности (Q). Однако при внесении в среду инкубации лимфоцитов глутамата и изоцитрата обнаружена скрытая активация СДГ, наиболее выраженная в группе беременных женщин с хроническим пиелонефритом, особенно после проведения курсов профилактики осложнений беременности. Так, к концу лечения типичная ферментативная активность СДГ в присутствии глутамата увеличилась на 35,9%, изоцитрата – на 14,1% по сравнению с аналогичными показателями группы сравнения, р<0,05.

Значения коэффициента асимметрии распределения (А) по группам в средах без активаторов СДГ не имели существенных различий, а на фоне изоцитрата и глутамата во второй группе женщин отмечено достоверное увеличение данных показателей на 33,8 и 46,9% соответственно (р<0,05). Реакция лимфоцитов на активаторы СДГ по коэффициенту эксцесса (Е) была различна. Под действием глутамата данный показатель принимал отрицательные значения, свидетельствующие об уменьшении резерва лимфоцитов с типичной активностью, что возможно при мобилизации резерва клеток для адекватного энергообеспечения. Увеличение величины коэффициента эксцесса под действием изоцитрата является в данном случае свидетельством адаптивного процесса активного формирования резервного пула лимфоцитов с типичной ферментативной активностью СДГ. Подобные изменения наблюдаются и в группе беременных с хроническим пиелонефритом, но с более высокими значениями коэффициента эксцесса, особенно до проведения курсов профилактического лечения. Данную динамику показателя можно рассматривать как признак угнетения энергопродуцирующих систем.

Значения относительной энтропии информации (Н) и вариации (V) во всех группах были идентичны. Актива- торы выявили тенденцию к снижению данного показателя в исследуемых группах, однако высокий уровень коэффициента вариации по-прежнему сохраняется в среде с глутаматом и изоцитратом. Высокие значения коэффициента вариации также являются свидетельством угнетения энергосистемы клеток в условиях тканевой гипоксии. В отношении коэффициента относительной энтропии информации также наблюдается тенденция к снижению его величины под влиянием активаторов СДГ.

Полученные данные позволяют сделать заключение о том, что при беременности на фоне хронического пиелонефрита выявляется угнетение процессов клеточной энергопродукции. Указанное подтверждается достоверным снижением средней активности сукцинатдегидрогеназы на 5,3%, увеличением количества лимфоцитов с типичной активностью в 3 раза, повышением их разнородности на 18,2% и увеличением числа незрелых клеток на 1,9%.