Влияние экзогенного донора оксида азота хлофузана на ионоуретическую функцию почек

Открытие физиологической роли оксида азота в организме послужило толчком для выявления новых соединений, стимулирующих его образование. Известно, что некоторые фуроксаны являются донорами оксида азота (NO) [2, 3] и активаторами растворимой гуанилатциклазы. Остается неизученным вопрос влияния экзогенных доноров оксида азота на процессы фильтрации, реабсорбции, секреции и синтеза в почках.

В связи с этим целью наших исследований явилось определение половой специфичности изменения системы NO белых крыс при поступлении в организм 4-хлор-6,7-фуроксанобензофуразана (хлофузана), а также изучение влияния экзогенного донора оксида азота на ионоуретическую функцию почек.

Материалы и методы. Эксперименты проведены на 20 белых беспородных крысах обоего пола массой тела 230-260 г. Для этого были созданы 3 группы крыс, состоявшие из половозрелых самок и самцов. Крысам вводили экзогенный донор NO – хлофузан в дозе 2 мг/кг внутрижелудочно в виде 0,1 % водной суспензии (n=5). Контролем служила группа крыс, получавшая 3 мл воды внутрижелудочно. Кровь брали из хвостовой вены до введения и через 2 часа после введения хлофузана. Крыс помещали в обменные клетки с проволочным полом для сбора суточной мочи. Об уровне содержания оксида азота в крови судили по суммарной концентрации нитрат- и нитрит-анионов (NOx) в плазме крови и моче, которую определяли путём восстановления нитратов до нитритов однократной навеской цинковой пыли, обработанной аммиачным комплексом сульфата меди, с последующим фотометрическим определением нитритов с помощью реактива Грисса при длине волны 520,0 нм на КФК-3-01.

Концентрацию общего кальция определяли колориметрическим методом, количество неорганического фосфора спектрофотометрическим методом, количество общего натрия и хлора колориметрическим методом и общий калий турбидиметрическим методом на "Анализаторе биохимическом фотометрическом кинетическом Би-Ан" (Россия) с использованием диагностических наборов «Ольвекс».

Ионоуретическую функцию почек крыс оценивали по концентрации общего натрия, хлора, калия, кальция и неорганического фосфора в сыворотке крови и моче.

Статистическую обработку результатов исследования провели методом биометрической обработки с программным обеспечением Excel и определением достоверности полученных результатов с помощью критерия Стьюдента.

Результаты исследований . Установлено, что повышение продукции оксида азота в организме за счет введения экзогенного донора оксида азота – хлофузана приводит к увеличению суточного диуреза, к изменению количества натрия, калия и других ионов в крови и моче.

После введения хлофузана содержание нитрит- и нитрат- анионов в плазме крови самок увеличивается в 1,98 раза (р<0,002) по сравнению с интактной группой, что не наблюдается у самцов (табл. 1.).

Таблица 1 – Содержание метаболитов NO в плазме крови и моче крыс (n=5)

Группа	Содержание метаболитов NO в плазме крови, мкмоль/л		Содержание метаболитов NO в моче, мкмоль/л
	самки	самцы	самки	самцы
интактные	35,57±2,58	32,19±2,53	67,19±5,70	67,43±1,98
контроль	39,92±6,82	46,68±2,582	93,99±1,54 2	73,71±6,56
после введения хлофузана	70,57±4,361 2	32,43±3,31 1	166,16±7,36 1 2	120,54±18,981 2

Уровень концентрации нитрат- и нитрит- анионов в моче после введения донора NO достоверно увеличился у самок в 2,47 раза (p<0,001), у самцов в 1,79 раза (p<0,02).

Нагрузка соединением фуроксанового ряда (хлофузаном), сопровождалась дозозависимым изменением функциональной активности системы оксида азота в организме белых крыс.

Увеличение образования оксида азота путем введения экзогенного донора хлофузана сопровождается тенденцией к увеличению суточного диуреза у крыс.

Установлено увеличение концентрации натрия в сыворотке крови после введения хлорфуроксана у самцов в 1,25 раза (р<0,05). У самок этот показатель имеет лишь тенденцию к увеличению по сравнению с исходным уровнем. Экскреция натрия с мочой закономерно снижается у самок в 1,93 раза (р<0,03), а у самцов остается на том же уровне.

Таблица 2 – Ионоуретическая функция почек самок крыс (n=5)

Показатель	До введения	После введения
диурез в сутки, мл/сут	6,54±0,88	7,50±2,15
натрий в крови, ммоль/л	105,67±14,15	112,33±5,49
натрий в моче, ммоль/100г/24 часа	0,27±0,01	0,14±0,04*
калий в крови, ммоль/л	4,59±0,34	5,17±0,53
калий в моче, ммоль/100г/24 часа	0,05±0,01	0,07±0,01
хлор в крови, ммоль/л	92,82±3,10	88,67±2,27
хлор в моче, ммоль/100г/24 часа	0,16±0,05	0,03±0,01*
кальций в крови, ммоль/л	1,82±0,12	2,47±0,06*
кальций в моче, ммоль/100г/24 часа	0,0029±0,0011	0,0039±0,0008
фосфор в крови , ммоль/л	1,47±0,12	0,83±0,14*
фосфор в моче, ммоль/100г/24 часа	0,05±0,002	0,069±0,015
канальцевая реабсорбция воды, %	99,39±0,03	98,51±0,61

* - достоверно по сравнению с исходным уровнем (р<0,05)

При поступлении хлорфуроксана в организм у самцов крыс концентрации калия в сыворотке крови снижается 1,13 раза (р<0,04). Экскреция калия с мочой имеет лишь тенденцию к увеличению.

В сыворотке крови содержание хлоридов имеет тенденцию к снижению у самок и достоверно снижается у самцов в 1,08 раза (р<0,006) по сравнению с исходным значением. Экскреция хлоридов с мочой после повышения активности системы оксида азота экзогенным донором снижается в 5,33 раза (р<0,04) и в 9,33 раза у самок и самцов соответственно.

Введение хлорфуроксана в организм белых крыс сопровождается увеличением кальция в сыворотке крови у самок в 1,36 раза (р<0,001), у самцов в 1,87 раза (р<0,0006) по сравнению с исходным значением.

Экскреция кальция достоверно не изменяется, имеется лишь тенденция к увеличению у крыс обоего пола.

Таблица 3 – Ионоуретическая функция почек самцов крыс (n=10)

Показатель	До введения	После введения
диурез в сутки, мл/сут	6,38±0,70	6,53±4,45
натрий в крови, ммоль/л	91,60±6,30	114,33±6,87*
натрий в моче, ммоль/100г/24 часа	0,16±0,01	0,15±0,16
калий в крови, ммоль/л	5,68±0,22	5,03±0,11*
калий в моче, ммоль/100г/24 часа	0,05±0,01	0,06±0,03
хлор в крови, ммоль/л	98,00±2,23	90,67±2,16*
хлор в моче, ммоль/100г/24 часа	0,34±0,12	0,03±0,01*
кальций в крови, ммоль/л	1,33±0,14	2,49±0,10*
кальций в моче, ммоль/100г/24 часа	0,0012±0,0003	0,0044±0,0035
фосфор в крови , ммоль/л	1,41±0,09	0,74±0,04*
фосфор в моче, ммоль/100г/24 часа	0,15±0,047	0,034±0,0095*
канальцевая реабсорбция воды, %	99,32±0,04	99,00±0,63

* - достоверно по сравнению с исходным уровнем (р<0,05 )

Установлено снижение фосфора в сыворотке крови в 1,77 раза (р<0,01) и в 1,92 раза (р<0,002) у самок и самцов соответственно. Выявлено достоверное снижение экскреции фосфора с мочой у самцов в 5 раз, а у самок отмечена тенденция к увеличению.

Реабсорбция воды после введения экзогенного донора оксида азота имеет лишь тенденцию к снижению у самок и самцов.

Увеличение в организме NO без участия синтаз оксида азота сопровождается изменением ионоуретической функции почек, но отличается от действия эндогенного донора оксида азота – L-аргинина [1].

Заключение. 1. При введении экзогенного донора – хлофузана, ответная реакция сопровождалась половой специфичностью: у самок ярче проявлялся NO донорский эффект, чем у самцов.

• 2.    При введении хлофузана увеличение концентрации нитрат- и нитрит-анионов в крови сопровождается увеличением объема выделяемой мочи и снижением экскреции натрия, хлоридов и фосфора с мочой.

• 3.    Физиологический эффект NO на ионоуретическую функцию почек более выражен у самцов, чем у самок.

ЛИТЕРАТУРА:1. Билалов И.Н. Ионоуретическая функция почек при повышении продукции оксида азота / И.Н. Билалов, Р.Г. Каримова, А.Г. Мухамеджанова // Ученые записки Казан. гос. акад. ветеринар. мед. им. Н.Э. Баумана. – Казань: КГАВМ. – 2014. –Т. 217. – С. 164-169. 2. Каримова, Р.Г. Полезный приспособительный эффект нитроксидергической системы под влиянием фуроксанов/ Р.Г. Каримова,

Т.В. Гарипов // Известия Самарской сельскохозяйственной академии. – 2011. – № 1. – С. 42 – 46. 3. Ferioli, R. A new class of furoxan derivatives as NO donors: mechanism of action and biological activity / R. Ferioli, G.C. Folco et al. // Brit. J. Pharmacol. – 1995. – Vol. 114. – P. 816-820.

ВЛИЯНИЕ ЭКЗОГЕННОГО ДОНОРА ОКСИДА АЗОТА ХЛОФУЗАНА НА ИОНОУРЕТИЧЕСКУЮ ФУНКЦИЮ ПОЧЕК

Билалов И.Н., Каримова Р.Г.

Резюме

Изучена ионоуретическая функция почек у нелинейных крыс при повышении продукции оксида азота экзогенным донором – хлофузаном.

Выявлена половая специфичность физиологического эффекта хлофузана на ионоуретическую функцию почек. Увеличение концентрации нитрат- и нитрит-анионов в крови сопровождается увеличением объема выделяемой мочи и снижением экскреции натрия, хлоридов и фосфора с мочой.

EFFECT OF EXOGENOUS NITRIC OXIDE DONOR OF KHLOFUZAN FOR THE IONOURETIC RENAL FUNCTION

Bilalov I.N., Karimova R.G.