Влияние клевера лупинового на желчевыделительную функцию печени у белых крыс
Автор: Самбуева Зинаида Гомбожаповна, Занданов Александр Октябрьевич, Лемза Сергей Васильевич, Ажунова Татьяна Александровна, Николаев Сергей Матвеевич
Журнал: Вестник Бурятского государственного университета. Философия @vestnik-bsu
Статья в выпуске: 12, 2010 года.
Бесплатный доступ
Отвар и экстракт сухой Trifolium lupinaster L. в экспериментах на белых крысах обладают выраженной желчегонной активностью. Экстракт Trifolium lupinaster L. при CCl4-гепатите оказывает гепатопротекторное действие
Желчегонная активность, токсический гепатит
Короткий адрес: https://sciup.org/148179252
IDR: 148179252
Текст научной статьи Влияние клевера лупинового на желчевыделительную функцию печени у белых крыс
Существенный вклад в арсенал фармакотерапевтических средств для лечения заболеваний печени и билиарной системы, а также для профилактики возможных осложнений гепатита и предупреждения хронизации процесса вносят фитопрепараты, которые способствуют нормализации иммунной системы, восстановлению функциональной активности гепатоцитов и оттока желчи, а также предупреждают развитие холецистита и желчнокаменной болезни [3; 6]. Одним из применяемых в тибетской медицине растений при заболеваниях печени является клевер лупиновый – Trifolium lupinaster L. из семейства Fabaceae [1; 5; 7]. В народной медицине клевер лупиновый применяется в качестве ранозаживляющего и противовоспалительного средства [8]. В надземной части клевера лупинового содержатся алкалоиды, аскорбиновая кислота; идентифицировано около 20 соединений фенольной природы, выявлено наличие пальмитиновой, олеиновой и линолевой кислот [2].
Цель исследования оценить желчегонную активность отвара и экстракта клевера лупинового при экспериментальном гепатите, вызванном введением 4-хлористого углерода.
Материалы и методы исследования
Растительное сырье было собрано в Прибайкальском районе Республики Бурятия в июле 2009 г. Эксперименты проведены на белых крысах линии Wistar обоего пола с исходной массой 170-200 г в осенне-зимний период.
В первой серии экспериментов определяли желчегонную активность у интактных крыс: отвар клевера лупинового, приготовленного по требованиям ГФ ХI [4], вводили в объеме 1,0 мл однократно в двенадцатиперстную кишку; водный раствор экстракта клевера лупинового вводили в дозах 100 и 300 мг/кг однократно в двенадцатиперстную кишку в объеме 1,0 мл.
В другой серии экспериментов оценивали влияние экстракта клевера лупинового на желчевыделительную функцию печени у крыс при токсическом гепатите, вызванном путем подкожного 4-кратного введения 50%-ного масляного раствора (V/V) тетрахлорметана (СС14) в объеме 4 мл/кг 1 раз в сутки.
Сухой экстракт клевера лупинового был получен и стандартизован в Отделе биологически активных веществ Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. Экстракт клевера лупинового вводили внутрижелудочно в экспериментально-терапевтической дозе 300 мг/кг в течение 10 дней, начиная с 4 дня от начала введения гепатотропного яда, 1 раз в сутки, в форме водного раствора (10 мл/ кг). Крысам контрольной группы вводили эквиобъемное количество очищенной воды. Исследования проводили через 7, 14 и 21 сутки от начала эксперимента.
О характере желчеобразования и желчевыделения судили по скорости секреции желчи, общему количеству выделенной желчи, концентрации желчных кислот, по количеству выделенных в каждой часовой порции холестерина и билирубина [9].
Полученные результаты обработаны с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни [9].
Результаты и обсуждение
В результате проведенных исследований установлено (табл. 1, 2), что отвар клевера лупинового оказывает выраженное желчегонное действие. В частности, скорость секреции желчи возрастала на 3139%, общее количество выделенной желчи превышало данный показатель у крыс контрольной группы на 30%. При введении лабораторным животным отвара клевера лупинового содержание желчных кислот в желчи возрастало на 30%, билирубина – на 33%, холестерина – на 70% по сравнению с показателями у крыс контрольной группы.
Таблица 1
Влияние отвара и экстракта клевера лупинового На скорость секреции желчи у интактных крыс
|
Группы животных |
Скорость секреции желчи в течение 5 часов, мг/мин/100 г |
||||
|
1 ч |
2 ч |
3 ч |
4 ч |
5 ч |
|
|
Контрольная (Н2О) Опытная 1 (отвар клеве- |
5,8 ± 0,4 |
5,4 ± 0,2 |
4,1 ± 0,3 |
4,1 ± 0,3 |
4,0 ± 0,1 |
|
ра лупинового) |
6,0 ± 0,2 |
7,1 ± 0,3* |
5,6 ± 0,4* |
5,7 ± 0,3* |
4,6 ± 0,3 |
|
Контрольная (Н2О) Опытная 2 (экстракт клевера лупинового): |
5,4 ± 0,4 |
4,6 ± 0,4 |
4,0 ± 0,5 |
3,7 ± 0,3 |
3,8 ± 0,4 |
|
100 мг/кг |
5,7 ± 0,4 |
6,0 ± 0,6 |
6,0 ± 0,4* |
5,1 ± 0,3* |
5,5 ± 0,5 |
|
300 мг/кг |
4,9 ± 0,5 |
5,5 ± 0,5 |
5,3 ± 0,4* |
5,2 ± 0,3* |
4,6 ± 0,4 |
Примечание: * – здесь и далее различия достоверны по сравнению с контролем при Р ≤ 0,05
При введении крысам экстракта клевера лупинового в дозе 100 мг/кг отмечалось наиболее выраженное желчегонное действие. В частности, скорость секреции желчи при введении испытуемого экстракта возрастала на 30-47%, общее количество выделенной желчи повышалось на 40% по сравнению с показателями у животных контрольной группы. Наряду с этим экстракт клевера лупинового оказывал стимулирующее влияние на синтез и выделение желчных кислот, содержание которых в желчи при введении его в дозе 300 мг/кг возрастало на 59% по сравнению с соответствующим показателем в контроле. Кроме того, указанный экстракт способствовал повышению содержания в желчи холестерина, содержание которого возрастало на 61% по сравнению с показателями в контроле.
Таблица 2
Влияние отвара и экстракта клевера лупинового на биохимический состав желчи у интактных крыс
|
Группы животных |
Общее кол-во желчи за 2-5 часы |
Желчные кислоты |
Билирубин |
Холестерин |
|
мг/ 1 |
00 г |
|||
|
Контрольная (Н2О) |
1056 ± 52 |
4,66 |
0,084 |
0,062 |
|
Опытная 1 (отвар клевера лупинового) |
1380 ± 67* |
6,06 |
0,112 |
0,106 |
|
Контрольная (Н2О) Опытная 2 (экстракт клевера лупино- |
966 ± 40 |
4,38 |
0,150 |
0,060 |
|
вого): 100 мг/кг |
1350 ± 65* |
5,03 |
0,147 |
0,097 |
|
300 мг/кг |
1236 ± 52* |
6,98 |
0,177 |
0,097 |
При токсическом повреждении печени лабораторных животных, вызванном введением СС14, отмечалось резкое угнетение желчевыделительной и холатообразовательной функции печени: снижалась интенсивность секреции желчи, подавлялся синтез и выделение с желчью желчных кислот, билирубина и холестерина (табл. 3, 4). Как следует из приведенных таблиц, курсовое введение экстракта клевера лупинового в экспериментально-терапевтической дозе 300 мг/кг сопровождалось повышением скорости секреции желчи через 7 суток от начала эксперимента на 36-57% по сравнению с показателями у животных контрольной группы. Наряду с этим суммарное содержание желчных кислот в желчи возрастало через 7, 14 и 21 сутки на 30, 94 и 39% соответственно. Кроме того, применение экстракта клевера стимулировало выведение холестерина и в значительной степени билирубина с желчью.
В дополнительной серии экспериментов определяли острую токсичность отвара клевера лупино-вого на белых крысах обоего пола с массой 160 ± 10 г при однократном внутрижелудочном введении; наблюдение за общим состоянием и поведением животных осуществляли в течение 14 дней. Установлено, что введение отвара в максимально возможном вводимом объеме не сопровождалось интоксикацией и гибелью крыс в течение всего периода наблюдения. Общее состояние и поведенческие реакции у крыс данной группы практически не отличались от таковых у крыс контрольной группы.
Таблица 3
Влияние экстракта клевера лупинового на скорость секреции желчи у белых крыс при токсическом гепатите
|
Группы животных |
Скорость секреции желчи в течение 4 часов, мг/ мин на 100 г |
|||
|
1-й час |
2-й час |
3-й час |
4-й час |
|
|
Интактная 7 сутки: |
5,4 ± 0,3 |
5,2 ± 0,4 |
5,4 ± 0,2 |
4,7 ± 0,1 |
|
Контрольная (СС14 + Н2О) Опытная (СС14 + экстракт клевера |
3,8 ± 0,3 |
4,2 ± 0,2 |
4,1 ± 0,3 |
3,5 ± 0,2 |
|
лупинового) 14 сутки: |
5,2 ± 0,5* |
6,1 ± 0,6* |
5,3 ± 0,4 |
5,5 ± 0,5* |
|
Контрольная (СС14 + Н2О) Опытная (СС14 +экстракт клевера |
4,6 ± 0,1 |
4,6 ± 0,3 |
4,1 ± 0,5 |
4,4 ± 0,4 |
|
лупинового) 21 сутки: |
4,7 ± 0,4 |
6,1 ± 0,5* |
5,9 ± 0,1* |
4,5 ± 0,3 |
|
Контрольная (СС14 + Н2О) Опытная (СС14 +экстракт клевера |
4,4 ± 0,3 |
5,3 ± 0,1 |
5,1 ± 0,1 |
5,0 ± 0,2 |
|
лупинового) |
6,2 ± 0,5* |
7,0 ± 0,6* |
6,9 ± 0,3* |
6,1 ± 0,3* |
Таблица 4
Влияние экстракта клевера лупинового на общее количество и биохимический состав желчи у белых у крыс при токсическом гепатите
|
Группы животных |
Общее кол-во желчи за 1-4 часы |
Желчные кислоты |
Билирубин |
Холестерин |
|
мг/ 100 г |
||||
|
Интактная |
1242 ± 78 |
8,08 |
0,096 |
0,106 |
|
7 сутки: Контрольная (СС14 + Н2О) |
936 ± 51 |
6,82 |
0,068 |
0,065 |
|
Опытная (СС14 +экстракт клевера лупинового) |
1326 ± 108* |
8,88 |
0,142 |
0,111 |
|
14 сутки: Контрольная (СС14 + Н2О) Опытная (СС14 +экстракт клеве- |
1062 ± 32 |
4,56 |
0,084 |
0,096 |
|
ра лупинового) |
1272 ± 98* |
8,85 |
0,094 |
0,105 |
|
21 сутки: Контрольная (СС14 + Н2О) Опытная (СС14 +экстракт клеве- |
1188 ± 61 |
5,79 |
0,098 |
0,094 |
|
ра лупинового) |
1572 ± 57* |
8,06 |
0,109 |
0,128 |
Острую токсичность экстракта клевера лупинового определяли на беспородных белых мышах обоего пола с массой 20-23 г при внутрибрюшинном введении. DL50 определяли по методу Кербера в диапазоне доз с интервалом 250 мг/кг. Установлено, что DL50 экстракта клевера лупинового составляет 2500 ± 176 мг/кг. Полученные результаты позволяют отнести клевер лупиновый к группе практически нетоксичных веществ по действующей классификации [9].
Заключение
Таким образом, отвар и сухой экстракт клевера лупинового обладают желчегонной активностью и гепатозащитным действием, что обусловлено содержанием в нем различных классов биологически активных веществ, для которых характерны свойства стимуляции холереза [2]. Природные вещества различных классов, являясь высокоактивными соединениями, оказывают непосредственное влияние на гепатоциты и опосредованное – на гладкомышечный элемент желчных путей и сосудистую систему, тем самым предупреждают формирование литогенной желчи, обеспечивают повышение функциональных возможностей гепатобилиарной системы.
