Изучение гиполипидемического действия экстракта лука медвежьего (черемши) (Allium ursinum L.)

Уменьшение продолжительности жизни населения развитых стран определило повышенное внимание общества к заболеваниям, развитие которых особенно прогрессирует у жителей крупных мегаполисов. К заболеваниям медикосоциальной значимости, прежде всего, относится атеросклероз, последствия которого приводят к высокой смертности от ишемической болезни сердца (ИБС) и инсульта (по данным ВОЗ, 21% смертности в мире), к потере работоспособности и к инвалидности. Многочисленные экспериментальные, клинические и эпидемиологические исследования свидетельствуют, что одним из главных факторов риска развития атеросклероза являются нарушения обмена липидов и липопротеинов (ЛП) (дислипопротеидемии атерогенного характера) среди них наиболее существенным является увеличение в крови атерогенных ЛП. Развитие дислипопротеидемии атерогенного характера обусловлено действием многих неблагоприятных факторов среды, сопутствующими заболеваниями, наследственной предрасположенностью. Одна из важных причин – нарушение функционального состояния печени, которая играет ключевую роль в обмене липидов и липопротеинов. В настоящее время гиполипидемическая лекарственная терапия признаётся главным способом снижения развития атеросклероза и его осложнений, поэтому гиполипидемические средства следует рассматривать и как антиатеросклеротические.

Айрапетова Карина Артуровна, аспирантка

Саджая Любовь Анатольевна, кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры биохимии и микробиологии

В связи с недостаточной эффективностью и побочным действием немногочисленных препаратов, применяющихся в качестве гиполипидеми-ческих и/или антиатеросклеротических средств, актуален поиск новых активных соединений. Интерес исследователей представляет поиск ги-полипидемических веществ, близких к естественным метаболитам организма, а также к соединениям, выделенным из растений.

Одним из таких растений является лук медвежий (черемша) ( Allium ursinum L., сем. Al-liaceae), широко применяемый за рубежом в качестве антиоксидантного, противогрибкового, антибактериального, кардиотонического, гипо-лимидемического средства в виде спиртовых экстрактов и капсул с порошком измельченного сырья. Однако в России лук медвежий является малоизученным растением и не находит широкого применения в официальной медицине.

Цель исследования: получение экстракта надземной части лука медвежьего, собранного в 2011 г. на Северном Кавказе и изучение его ги-полипидемического действия.

Материалы и методы исследования . Изучение гиполипидемической активности проводили на 24 крысах-самцах линии «Wistar» весом около 250,0-280,0 г. Животные прошли двухнедельный карантин и содержались в стандартных условиях вивария при естественном освещении. Для изучения гиполипидемической активности экстракта черемши использовали твиновую модель гиперлипидемии: однократное внутрибрюшинное введение твина-80 в дозе 250 мг /100 г массы тела.

Основываясь на данные зарубежной литературы густой экстракт черемши вводили в дозе 200 мг/кг [1]. В качестве препарата сравнения использовали фенофибрат трайкор в терапевтической дозе 12,5 мг/кг. Исследуемые вещества в виде водной суспензии вводили в выше указанных дозах опытным группам крыс перорально в течение 10 дней до введения твина-80.

Предварительное введение было направлено на насыщение действующими веществами ряда органов и тканей, связанных с метаболизмом липидов, что широко используется в случаях однократного применения агента, индуцирующего развитие гиперлипидемии. На 10-ый день животным внутрибрюшинно вводили твин-80 и через 12 часов осуществляли забой путем декапитации. Контрольной группе животных вводили в течение такого же срока дистиллированную воду, которая используется для приготовления суспензии веществ, на 10-ый день – внутрибрюшинно – твин-80 и через 12 часов осуществляли забой. Перед забоем животные голодали в течение 12 часов.

В сыворотке крови определяли содержание общего холестерина, триглицеридов (ТРГ) и общих липидов (ОЛ), содержание атерогенных липопротеинов низкой плотности ( β -липо-протеидов) и очень низкой плотности (пре- β -липопротеидов). Полученные данные обрабатывали методами вариационной статистики и оценивали достоверность различий при помощи t-критерия Стьюдента. Содержание триглицеридов в сыворотке (ммоль/л) определяли энзиматическим колориметрическим методом, основанном на гидролизе ТРГ липазой с образованием жирных кислот и эквимолярного количества глицерина. Определение содержания общих липидов в сыворотке крови проводили по стандартному набору реактивов фирмы «La Сhema». Принцип метода основан на том, что липиды и жирные кислоты, фосфолипиды и холестерин взаимодействуют после гидролиза серной кислотой с фосфованилиновым реактивом с образованием красного окрашивания. Содержание общих липидов выражали в г/л.

Количество холестерина в сыворотке крови (ммоль/л) измеряли ферментативным фотометрическим методом с использованием стандартного набора реактивов «DiaSys». При гидролизе эфиров холестерина холестеринэстеразой образуется свободный холестерин. Образовавшийся в результате гидролиза и имеющийся в пробе холестерин окисляется кислородом воздуха под действием холестериноксидазы с образованием эквимолярных количеств перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты с образованием окрашенного соединения, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации холестерина в пробе и измеряется фотометрически.

Определение β- и пре-β липопротеидов сыворотки крови проводили турбидиметрически по Бурштейну и Самай [3]. Метод основан на способности β- и пре-β липопротеидов образовывать с гепарином комплекс, который осаждается без денатурации в присутствии хлористого кальция. Степень мутности, измеряемая при длине волны 720±2 нм, пропорциональна содержанию β- и пре-β липопротеидов. Содержание β- и пре-β липопротеидов выражали в г/л.

Результаты и обсуждение . Как показывают результаты исследования, представленные в табл. 1, однократное внутрибрюшинное введение твина-80 сопровождалось развитием выраженной гиперлипидемии. Так, у животных контрольной группы отмечали достоверное по отношению к интактным значениям увеличение содержания ОЛ в крови на 200%, что связано с ростом концентрации в крови β и пре-β-ЛП на 391%, а так же ТРГ и общего холестерина на 229% и 71% соответственно. Данные изменения липидного спектра сыворотки крови соответствуют картине гиперлипопротеидемии 2 типа, а подтипа по классификации Фредриксона, принятой Всемирной организацией здравоохранения и основанной на фенотипических характеристиках сыворотки при нарушениях липидного обмена [2].

Таблица 1. Влияние густого экстракта черемши на состояние показателей липидного обмена в крови на фоне твиновой гиперлипидемии

Примечание: РИ – уровень достоверной разницы по отношению к интактным значениям; РК – уровень достоверной разницы по отношению к контрольным значениям; n – количество животных в группе.

Лечебно-профилактическое введение густого экстракта черемши в дозе 200 мг/кг привело к достоверному по сравнению с контролем снижению содержания холестерина в сыворотке крови на 46%, причем этот показатель полностью нормализовался, так как достоверно не отличался от значений у здоровых животных. Содержание триглицеридов и общих липидов в крови достоверно снижались на 15% и 29% соответственно, но уровня нормы так и не достигли. Отмечали тенденцию к снижению содержания в крови β и пре-β-ЛП. Эти изменения были достоверны и их уровень, как и уровень холестерина, достиг значений интактных животных. В группе животных, получавших трайкор в дозе 12,5 мг/кг, отмечали восстановление до нормально уровня практически всех исследуемых показателей. Содержание β и пре-β-ЛП и ТРГ, снижаясь в 1,9 и 2,6 раза, соответственно, полностью нормализовалось. Содержание общих липидов сыворотки крови достоверно уменьшилось на 33% по сравнению с контролем, но уровня нормы не достигло, оставаясь на 100% выше интактных значений. Уровень холестерина снизился на 56% (более, чем в 2 раза), при этом он стал даже ниже нормы на 25%.

Выводы. Применение густого экстракта черемши на фоне твиновой гиперлипидемии меняло липидный спектр сыворотки крови подобно тому, как это происходило под влиянием трайкора.

На основании проведенных исследований установлено, что в условиях твиновой гиперлипидемии лечебно-профилактическое введение густого экстракта в дозе 200 мг/кг оказывает нормализующее влияние на состояние показателей липидного обмена в крови, проявляя отчетливый гипохолестеринемический эффект, сопоставимый с препаратом сравнения трайкор.