Влияние препарата «Ветостим» на основные показатели крови индюшат и их иммунный статус

Птицеводство – одна из наиболее рентабельных и высокопродуктивных отраслей сельского хозяйства. Однако, несмотря на достигнутые показатели, в промышленном птицеводстве остается много нерешенных проблем [1].

Пусковым механизмом в патогенезе инфекционных, особенно вирусных болезней в условиях промышленной технологии является снижение иммунобиологической реактивности организма птицы, вызванное различными технологическими стресс-факторами, один из которых – многократная вакцинация индюшат в раннем постнатальном онтогенезе [2].

В этой ситуации возрастает роль профилактических и лечебных мероприятий, направленных на повышение естественной резистентности птицы, стимуляцию их иммунной системы [3]. В связи с этим создание и применение иммуномодуляторов с целью воздействия на повышение общей резистентности организма птицы, устойчивости его к технологическим

стрессам, снятию отрицательного иммунодепрессивного действия вакцинных препаратов заслуживает пристального внимания [4].

Цель исследований – изучить влияние препарата «Ветостим» (ООО «Сиббиотест») на основные морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови индюшат, а также оценить эффективность специфической профилактики Ньюкаслской болезни на фоне применения данного препарата.

Материалы и методы

Для oпределения влияния препарата «Ветoстим» на оснoвные гематологические, биохимические, иммунобиологические показатели индюшат, а также на специфическую резистентность против Ньюкаслской болезни при иммунизации живой вакциной было сформировано две группы индюшат крoсса BIG-6 (по 100 гол.), подобранных по принципу аналогов. Индюшатам первой группы вводили препарат «Ветостим» (0,1 мг/кг), вторая группа была контрoльной. Препарат применяли дважды методом выпаивания сoвместно с вакциной «Авивак-НБ» против Ньюкаслской болезни на 14-е и 28-е сут. сoгласнo рекомендации прoизводителя. Для этого от индюшат убирали систему поения на 60 мин. после вакцинировали.

На 42-е сут. у индюшат брали кровь для гематологических, биохимических и иммунологических исследований. Кровь для серологических исследований получали на 10-е сут. и через 14 сут. после ревакцинации против Ньюкаслской болезни (42-е сут.) согласно технологии содержания птицы, принятой на данном предприятии (рисунок).

Группы птиц

I группа

II группа

Возраст – 10 сут.

Взятие крови для исследования на напряженность иммунитета к вирусу Ньюкаслской болезни (n = 48)

Возраст – 14 сут.

Вакцинация против Ньюкаслской болезни вакциной «Авивак-НБ» методом выпаивания с водой

+ иммуномодулятор «Ветостим» в дозе 0,1 мг/кг

Без применения иммуномодулятора

Возраст 28 – сут.

Ревакцинация против Ньюкаслской болезни вакциной «Авивак-НБ» методом выпаивания с водой

+ иммуномодулятор «Ветостим» в дозе 0,1 мг/кг

Без применения иммуномодулятора

Возраст – 42 сут.

Взятие крови для исследования на напряженность иммунитета к вирусу Ньюкаслской болезни (n = 48) Взятие крови для гематологических, биохимических и иммунологических исследований (n = 30)

Схема проведения эксперимента

Иммунологические исследования крови проводили на базе лаборатории ГНУ ВНИ-ИБТЖ РАСХН (д-р биол. наук В.С. Власенко). Количество Т-лимфоцитов определяли с помощью спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-рок): Т-киллеров – непрямого глобулинового розеткообразования с эритроцитами быка (ЕА-рок); В-лимфоцитов – комплементарного розеткообразования с эритроцитами быка. Функциональную активность лейкоцитов оценивали в НСТ-тесте спонтанном без нагрузки, с последующей фиксацией реакции с помощью многоканального иммунохимического анализатора «Fluorofot STDL ess-486-M». Содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) устанавливали методом осаждения полиэтиленгликолем (ПЭГ-6000) с последующим фотометрическим определением оптической плотности образовавшегося преципитата на проточном фотометре 5010 v5+ при λ = 450 нм [5].

Морфологические исследования крови проводили общепринятыми методами с последующим выведением лейкограммы.

При определении количества общего белка, глобулинов, альбуминов, креатинина и щелочной фосфатазы в сыворотке крови экспериментальной птицы использовали биохимический анализатор «Screen Master» производства фирмы Hospitex (Швейцария, Италия) с применением реактивов Hospitex.

Оценивали напряженность поствакцинального иммунитета при исследовании сыворотки крови на содержание специфических антител методом РЗГА.

Полученный цифровой материал обрабатывали с помощью биометрических методов с применением критерия Стьюдента с использованием интегрального пакета Excel.

Результаты исследований

При изучении морфологических характеристик крови установлено увеличение количества лимфоцитов у индюшат на 11,2% (p < 0,001) и снижение количества псевдоэозинофилов на 4,8% (p < 0,05) в опытной группе в сравнении с контрольной. Отмечено снижение моноцитов и эозинофилов на 3,2 и 2,6% соответственно. Не найдено достоверных различий в количестве: базофилов; эритроцитов и гемоглобина в периферической крови индюшат опытной и контрольной групп (табл. 1).

Таблица 1

Гематологические показатели крови индюшат при применении препарата «Ветостим» (M ± m)

Группа птиц	Псевдоэозинофилы, %	Эозинофилы, %	Моноциты, %	Базофилы, %	Лимфоциты, %	Эритроциты, 1012/л	Гемоглобин, г/л
Контроль	37,4 ± 1,7	5,0 ± 0,5	5,4 ± 0,5	1,8 ± 0,6	50,4 ± 1,6	2,08 ± 0,18	104,0 ± 5,4
«Ветостим», 0,1 мг/кг	32,6 ± 0,9*	2,4 ± 0,5**	2,2 ± 0,4***	1,2 ± 0,4	61,6 ± 1,3***	1,86 ± 0,16	99,8 ± 5,3

* p < 0,05; ** p < 0,01; *** p < 0,001.

При анализе биохимических показателей крови индюшат установлено, что достоверных различий в количестве глобулинов, альбумина, общего белка и креатинина не зарегистрировано. Глобулинов в опытной группе было больше на 3,4 г/л, чем в контрольной. В опытной группе содержание щелочной фосфатазы увеличилось в 1,4 раза и было больше на 536,4 МЕ/л, чем в контроле (1408,2 ± 47,2 МЕ/л) (табл. 2).

Таблица 2 Биохимические показатели сыворотки крови индюшат при использовании препарата «Ветостим» (M ± m)

Группа птиц	Общий белок, г/л	Глобулины, г/л	Альбумин, г/л	Креатинин, мкмоль/л	Щелочная фосфотаза, МЕ/л
«Ветостим», 0,1 мг/кг	29,9 ± 2,3	19,3 ± 1,8	10,6 ± 0,9	39,6 ± 3,2	1944,6 ± 83,4***
Контроль	28,1 ± 1,2	15,9 ± 0,9	12,2 ± 0,8	37,9 ± 2,7	1408,2 ± 47,2

* p < 0,05; ** p < 0,01; *** p < 0,001.

При изучении иммунобиологических характеристик крови зарегистрировано увеличение лейкоцитов в опытной группе в сравнении с контролем. Так, абсолютное количество лейкоцитов в 1,5 раза выше (p < 0,01), чем в контрольной группе. Установлено увеличение Т- и В-лимфоцитов в 3,2 (p < 0,001) и 3,6 раза (p < 0,001) соответственно по сравнению с контрольной группой (табл. 3).

Таблица 3

Иммунологические показатели крови индюшат при использовании препарата «Ветостим» (M ± m)

Доза, № группы	Лейкоциты, тыс./мкл	Лимфоциты		Т-киллеры, тыс./мкл	НСТ-тест, ед. опт. плотности	ЦИК, у.е.
		Т, тыс./мкл	В, тыс./мкл
«Ветостим», 0,1 мг/кг	26,25 ± 1,05**	3,50 ± 0,33***	2,70 ± 0,24***	3,27 ± 0,35***	0,664 ± 0,064*	66,0 ± 14,9**
Контроль	17,40 ± 2,01	1,08 ± 0,11	0,75 ± 0,13	0,71 ± 0,06	0,503 ± 0,022	148,6 ± 19,5

* p < 0,05; ** p < 0,01; *** p < 0,001.

Содержание Т-киллеров выше в опытной группе в 4,6 раза в сравнении с контрольной (p < 0,001). В группе, где применяли «Ветостим», зарегистрировано увеличение фагоцитарной активности псевдоэозинофилов: выше контроля на 24% (p < 0,05). При определении количества ЦИК зафиксировано снижение данного показателя у цыплят опытной группы на 82,6 у.е. с достоверностью p < 0,05 в сравнении с контрольной группой.

При оценке напряженности иммунитета к вирусу Ньюкаслской болезни (после применения живой вакцины в сочетании с препаратом «Ветостим») определено, что на 10-е сут. средний титр антител в опытной группе выше на 0,1 log 2 по сравнению с контролем (2,56 log 2 ). Количество иммунной птицы в опытной группе составило 58%, что на 8% выше, чем в контроле (50%). После ревакцинации (на 42-е сут.) титр антител в опытной группе – 4,87 log 2 : на 0,29 log 2 выше, чем в контрольной (4,58 log 2 ). Эффективность иммунизации индюшат в опытной группе (96%) выше на 17% по сравнению с контролем (79%).

Заключение

Таким образом, у индюшат, иммунизированных вакциной «Авивак-НБ» в сочетании с иммуномодулятором «Ветостим», более напряженный иммунитет: повышенное содержание в крови Т-, В-лимфоцитов и Т-киллеров, увеличение функциональной активности псевдоэозинофилов, а также более интенсивный синтез антител к вакцинному вирусу Ньюкаслской болезни.