Влияние применения энрофлоксацина на динамику лейкоцитарных индексов в крови утят

Непрерывный контроль состояния здоровья птиц в условиях современных птицефабрик является важной задачей, решение которой влияет на объем и качество получаемой продукции. Зачастую, на организм поголовья оказывает действие комплекс технологических факторов, таких как, например, повышенная плотность посадки, способствующая увеличению загрязненности воздуха микрофлорой, в результате чего возникают инфекционные заболевания, способные быстро распространяться, охватывая большое количество животных [9, 13, 16, 18].

Вышеуказанные факторы, как следствие, обуславливают снижение продуктивности птиц и ухудшение их физиологического состояния в целом. С целью стабилизации инфекционной обстановки среди птицепоголовья, проводят лечебные и профилактические мероприятия, с применением антибактериальных препаратов различных групп. Одними из используемых лекарственных средств являются фторхинолоны, отличающиеся особым механизмом действия, а также широким спектром активности, что определяет эффективное решение проблем в терапии патологий микробного происхождения [15, 21].

Актуальным антибактериальным препаратом в птицеводстве является представитель фторхинолонов энрофлоксацин, изначально синтезированный для терапии инфекционных болезней птиц. Кроме того, лекарственное средство способно влиять как на грамотрицательные, так и на некоторые грамположительные микроорганизмы [10].

Тем не менее, несмотря на выявленные достоинства энрофлоксацина, мало изучено его воздействие непосредственно на физиологическое состояние отдельных видов птиц, в особенности, в их ранний возрастной период. В частности, крайне мало данных о влиянии препарата на показатели системы крови утят. Так, важным фактором диагностических исследований, отражающим физиологический статус, является изучение лейкоцитарных индексов, представляющих собой интегральные показатели лейкограммы, позволяющие оценить степень воспалительного процесса, механизмы и уровень компенсации устойчивости организма, прогноз и направление воспалительных процессов, а также выявить эндогенную интоксикацию [1].

В связи с вышесказанным, целью нашего исследования являлось выявление динамики лейкоцитарных индексов утят при использовании энрофлоксацина.

Материал и методы исследований.

В осуществленном опыте были задействованы утята суточного возраста породы «Башкирская», разделенные на 1 (контроль) и 2 (опыт) группы, подобранные с учетом принципа аналогов. В ходе эксперимента все исследуемое поголовье получало рацион, сбалансированный по основным питательным и биологически активным веществам. Кроме того, утятам 2 группы на протяжении 10 суток выпаивали энрофлоксацин в дозе 200 мг/л, в то время как 1 группе давали обычную питьевую воду. Затем производили отбор крови где ПЭ – псевдоэозинофилы, Л – лимфоциты.

Лейкоцитарный индекс (ЛИ) [11 ] :

методом внутрисердечной пункции на 1, 3, 5, 7, 9 и 11 сутки после отмены препарата. Стабилизацию отобранных проб крови проводили с использованием 3,8 % цитрата натрия.

В мазках крови окрашенных по Романовскому-Гимзе        исследовали лейкограмму, используя метод подсчета отдельных видов лейкоцитов, после чего определяли индексы по следующим формулам.

Индекс Кребса (ИК) [5]:

ИК= ^ПЭ ,

Л ,

ЛИ= ^Л ,

ПЭ, где ПЭ – псевдоэозинофилы, Л – лимфоциты.

Индекс иммунореактивности (ИИР) [8]:

ИИР= ^Л+Э ,

М , где Л – лимфоциты, М – моноциты, Э – эозинофилы.

Лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) [14]:

ЛИИ = ПЭ    ,

Б + Э + Л + М , где ПЭ – псевдоэозинофилы, Б – базофилы, Э – эозинофилы, Л – лимфоциты, М – моноциты.

Индекс сдвига лейкоцитов крови (ИСЛК) [19]:

Б+Э+ПЭ

ИСЛК =

Л+М

,

где Б – базофилы, Э – эозинофилы, ПЭ – псевдоэозинофилы, Л – лимфоциты, М – моноциты.

Лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс (ИЛГ) [20]: ИЛГ = Л ,

Б+Э+ПЭ, где Л – лимфоциты, Б – базофилы, Э – эозинофилы, ПЭ – псевдоэозинофилы.

Статистическая обработка цифрового материала проведена с использованием программы SPSS Statistic 17.0, достоверность полученных результатов оценивали при помощи непараметрического критерия Манна-

Уитни.

Результат исследований. Лейкоцитарные индексы являются показателями системы крови, изменяющимися при многих физиологических реакциях. Кроме того, их данные способны отражать неспецифическую и специфическую резистентность организма, а также свидетельствовать о наличии эндогенной интоксикации [3, 17]. В результате проведенных исследований, нами обнаружено, что энрофлоксацин вызывал достоверное изменение практически всех индексов только на третьи и седьмые сутки.

Так, индексы эндогенной интоксикации (ЛИИ и ИСЛК) были повышены на третьи (на 34 и 31 %) и седьмые сутки (72 и 59 % соответственно), а ИЛГ в аналогичные промежутки времени был достоверно снижен на 35 и 70 % (Таблица 1). Обнаруженные данные, вероятно, отражают присутствие небольшого количества токсических веществ в кровяном русле [2], не являющихся причиной серьезных расстройств, кроме того, в дальнейшем достоверных изменений выявлено не было.

Таблица 1 – Значения лейкоцитарных индексов крови цыплят, у.е.

Сутки	Группа	ЛИИ	ИСЛК	ИЛГ
1	1	1,56±0,19	1,95±0,25	0,55±0,11
	2	1,33±0,16	1,77±0,22	0,59±0,08
3	1	1,04±0,09	1,33±0,13	0,77±0,08
	2	1,58±0,08**	1,94±0,08**	0,50±0,02**
5	1	1,66±0,21	1,98±0,22	0,53±0,08
	2	1,27±0,08	1,57±0,08	0,62±0,03
7	1	0,54±0,11	1,01±0,35	1,43±0,32
	2	1,96±0,23**	2,48±0,34**	0,43±0,07**
9	1	1,78±0,19	2,29±0,21	0,44±0,04
	2	1,56±0,18	2,21±0,31	0,48±0,06
11	1	2,35±0,22	3,25±0,26	0,30±0,03
	2	2,28±0,17	2,93±0,18	0,30±0,02

** – Статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и группах опыта по U-критерию Манна-Уитни при P<0,01.

Легкую степень интоксикации подтверждают и другие зафиксированные данные, так, например, достоверное увеличение ЛИИ не выходило за пределы референтных значений, установленных исследователями (от 1,0 до 2,0) [7].

Установлено, что ИСЛК наиболее полно отражает уровень реактивности организма, чем общее количество лейкоцитарных клеток в крови [17]. Опираясь на полученные значения индекса, не превышающие 1,99 у.е. [7], выявлено, что даже при повышении данных, ИСЛК находится в пределах нормы, что вероятно, свидетельствует об отсутствии ингибирующего воздействия энрофлоксацина на иммунную реактивность организма утят.

Таблица 2 – Значения лейкоцитарных индексов крови цыплят, у.е.

Сутки	Группа	ИК	ЛИ	ИИР
1	1	1,92±0,26	0,60±0,12	22,2±4,41
	2	1,64±0,21	0,67±0,09	37,2±3,84*
3	1	1,23±0,12	0,86±0,09	37,7±4,37
	2	1,87±0,09**	0,54±0,03**	30,7±4,26
5	1	1,92±0,23	0,58±0,09	36,7±3,24
	2	1,50±0,07	0,67±0,03	27,9±5,08
7	1	0,76±0,24	1,92±0,48	49,8±8,41
	2	2,41±0,32**	0,46±0,07**	28,3±0,15
9	1	2,19±0,22	0,48±0,05	29,8±2,31
	2	2,04±0,29	0,54±0,07	34,6±4,15
11	1	3,11±0,26	0,33±0,03	28,3±2,09
	2	2,87±0,21	0,36±0,02	25,7±2,82

** – Статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и группах опыта по U-критерию Манна-Уитни при P<0,01; * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и группах опыта по U-критерию Манна-Уитни при P<0,05.

Практически аналогичный непродолжительный эффект обнаружен при исследовании индексов неспецифической реактивности. Так, на третьи и седьмые сутки зафиксировано увеличение ИК на 34 и 68 %, а также падение ЛИ на 37 и 76 % (Таблица 2). Повышение ИК, вероятно, отражает небольшую активизацию фагоцитарных процессов, в то время как снижение ЛИ, возможно, отражает некоторый непродолжительный сдвиг в обмене веществ организма птиц [4, 10].

Зарегистрировано единовременное увеличение ИИР на 40 % в сравнении с контролем, произошедшее на первые сутки после отмены препарата. Подобный сдвиг ИИР может отражать возможный рост секреции лимфокинов, стимулирующих функциональную активность эозинофилов, псевдоэозинофилов и базофилов [6]. Индексы неспецифической резистентности аналогично вышеуказанным показателям эндогенной интоксикации так же не выходили за пределы установленных норм.

Заключение. Несмотря на выявленные изменения, как индексов эндогенной интоксикации, так и неспецифической резистентности, сдвиги данных не являются ярко выраженными, а также подтверждающими негативное воздействие применения энрофлоксацина. Кроме того, достоверные отличия индексов в крови утят опытной группы не превышали обозначенные нормы. В целом, основываясь на установленных результатах, можно предположить, что использование энрофлоксацина в дозе 200 мг/л не оказывает отрицательного эффекта на физиологический статус утят.

В статье приведены результаты опыта по изучению воздействия энрофлоксацина на динамику показателей лейкоцитарных индексов эндогенной интоксикации и неспецифической резистентности в крови утят, на основании которых можно косвенно судить о состоянии физиологического статуса птиц. Утята были разделены на две группы, в которых 1 – контрольная (птицы получали чистую воду), 2 – опытная (на протяжении десяти суток выпаивали энрофлоксацин с водой в дозе 200 мг/л). Отбор крови проводили на 1, 3, 5, 7, 9, 11 сутки после отмены препарата. Осуществляли подсчет лейкоцитарной формулы, на основе которой находили значения индекса иммунореактивности (ИИР), индекса Кребса (ИК), лейкоцитарного индекса (ЛИ), лимфоцитарно-гранулоцитарного индекса (ИЛГ), лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ), индекс сдвига лейкоцитов крови (ИСЛК). В результате произведенных исследований обнаружена достоверная динамика практически всех индексов на третьи и седьмые сутки после отмены препарата, что, возможно, вызвано воздействием энрофлоксацина. Так, например, индексы эндогенной интоксикации (ЛИИ и ИСЛК) увеличены на третьи (на 34 и 31 %) и седьмые сутки (72 и 59 % соответственно), а ИЛГ в аналогичные промежутки времени был достоверно ниже на 35 и 70 %, ЛИ на 37 и 76 %, а ИК повышен на 34 и 68 %. Однако зарегистрированные сдвиги не являлись продолжительными, а изменение ИИР вовсе было единовременным. Кроме того, все зафиксированные отличия в крови утят опытной группы не выходили за пределы референсных значений.