Выявление основных маркеров тромбофилии в паре донор/ реципиент ТКМ

Введение. Процесс восстановления кроветворения у пациентов после трансплантации донорского костного мозга (ТКМ) во многом зависит от генетических особенностей пары донор/реципиент, связанных не только с HLA совместимостью. Полиморфизмы, являющиеся факторами риска возникновения различных заболеваний, никак не проявляющихся до ТКМ, могут стать причиной серьезных осложнений после нее. Среди этих факторов и полиморфизмы, являющиеся маркерами тромбофилии. Часто описывают посттрансплантационные тромбозы глубоких вен и тромбоэмболии. Кроме того, после ТКМ могут образовываться микротромбы, которые приводят к развитию различного рода воспалений и инфекций. Выявление генетических факторов риска тромбофилии может иметь значение для прогнозирования таких состояний. Представлены результаты исследования полиморфизмов генов F5 G1691A, MTHFR C677T, F2 G20210A и PAI-1 5G( – 675)4G в парах до-нор/реципиент ТКМ.

F2 G20210A (rs1799963), PAI-1 5G( – 675)4G (rs1799 9) определяли с помощью аллель-специфической полимеразной цепной реакции в реальном времени (АС-ПЦР-РВ) в модификации TaqМan на приборе RotorGene (Corbett Research). Пробы и зонды собственного дизайна приведены ниже. Условия реакции: предварительная денатурация при 950 – 300 сек, затем 45 циклов 630 – 50 сек и 950 – 15 сек.

Результаты. Было протестировано 90 пар донор/реципиент. Факторами риска возникновения тромбофилии считали гомо/гетеро-зиготность по полиморфизмам rs6025 в гене F5, rs1799963 в гене F2 и гомозиготность по rs1 01133 в гене MTHFR и rs1799 9 в гене PAI-1. Были выявлены 4 реципиента и 6 доноров, являющихся гетерозиготами по G1691A, и не являющихся трансплантационными па-рами,три донора и реципиента,являющихся парой при ТКМ и несущих одновременно гетерозиготную мутацию G1691A, один реципиент и один донор,являющиеся гетерозиготами по G20210A, 5 реципиентов и 6 доноров, гомозиготы по C677T, и 12 реципиентов и 21 донор, гомозиготы по PAI-1 5G( – 675)4G. Анализ историй болезни реципиентов, являющихся гетерозиготами G1691A (мутация Лейдена), показал, что у некоторых из них развились тромбозы глубоких вен вскоре после ТКМ. У одной пациентки без мутаций возникла тромбоэмболия легочной артерии вскоре после ТКМ от донора с мутацией G1691A. Причина ТЭЛА не ясна. Известно, что факторы свертывания вырабатываются в основном клетками печени. Однако тромбоцитарный F5 синтезируется и в мегакариоцитах и,таким образом,донорский дефектный F5 может играть роль после ТКМ. В любом случае необходимо дальнейшее наблюдение за реципиентами,имеющими маркеры тромбофилии свои или донорские.

Выводы. Мы полагаем, что для оценки риска посттрансплантационных тромбозов имеет значение генетический анализ полиморфизмов факторов, являющихся риском возникновения тромбофилии,в паре донор/ реципиент.