Ассоциация полиморфизма 5G/4G гена PAI-1С развитием тромбофилических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях
Автор: Шамсутдинова Д. Б., Каримов Х. Я., Бобоев К. Т.
Журнал: Вестник гематологии @bulletin-of-hematology
Рубрика: Оригинальные статьи
Статья в выпуске: 4 т.15, 2019 года.
Бесплатный доступ
Изучены ассоциации полиморфизма гена PAI-1 с развитием тромбофилических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях (ХМПЗ). Работа выполнена на образцах ДНК, выделенных из периферической крови больных с наиболеечасто встречающимися ХМПЗ: хроническим миелолейкозом (ХМЛ, n = 32) и истинной полицитемией (ИП, n = 79), а также группы контроля (n = 114). Генотипирование образцов и детекция полиморфизма 5G/4G генаPAI-1 проводились методом ПЦР на приборе«Applied Biosystems 2720» (США) с использованием наборов реагентов НПО «Литех»(Москва, Россия). Статистический анализ результатов проведен с использованием пакета статистических программ «OpenEpi 2009». Порезультатам работы выявлено, что гетерозиготный и гомозиготный генотипы полиморфизма 5G/4G гена PAI-1 в подгруппе с тромбозом в группах больных ХМЛ и ИП повышаетриск развития тромбозов. Возможно, это связано с тем, что, у лиц с гетерозиготным генотипом теряется защитный эффект, оказываемый диким генотипом 5G/5G, вследствиечего могут развиваться тромбофилические состояния.
Хронические миелопролиферативные заболевания, хроническиймиелолейкоз, истинная полицитемия, носительство, полиморфизма 5g/4g гена pai-1, генотип, тромбофилические состояния
Короткий адрес: https://sciup.org/170171777
IDR: 170171777
Текст научной статьи Ассоциация полиморфизма 5G/4G гена PAI-1С развитием тромбофилических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях
кроветворной клетки [1, 2, 3]. Наряду с проявлениями, связанными с клональной экспансией, при ХМПЗ зачастую развиваются тромбозы, усугубляющие течение основного заболевания. Высокая вероятность и труд- ности лечения тромботических осложнений при ХМПЗ требуют необходимость своевременной оценки факторов приводящих к развитию тромбозов у онкогематологических больных, в частности при хроническом миелолейкозе (ХМЛ) и истинной полицитемии (ИП) [4].
Современная диагностика тромбофиличе-ских состояний предусматривает определение носительства тромбогенных мутаций и полиморфизмов [5]. Многочисленные исследования последних лет посвящены изучению роли мутации ряда генов,полиморфизма гена PAI-1 в предрасположенности к формированию тромбофилических состояний [6,7, 8]. Однако, в доступной нам литературе, исследований посвященных изучению полиморфизма гена PAI-1 в развитии тромбофилических состояний при ХМПЗ не обнаружено,в связи с чем исследования в данном направлении представляется интересным.
Цель работы. Изучение ассоциации полиморфизма 5G/4G гена PAI-1 с развитием тромбо-филических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях.
Материалы и методы. В исследование включено 111 больных с наиболее часто встречающимися ХМПЗ:схроническим миелолейкозом (ХМЛ, n = 32) и истинной полицитемией (ИП, n = 79), а также группы контроля (n = 114). Сбор материала для исследования,осуществлен на базе клиники научно-исследовательского института Гематологии и переливания крови МЗ РУз. Больные ХМПЗ составили основную группу (n = 111), которые в соответствие с нозологией распределены на 2 группы:1-я — больные с ХМЛ,2-я — с ИП,при этом каждая группа разделена на две подгруппы А — с тромбозом и Б — без тромбоза.
Генотипирование образцов и детекция полиморфизма гена PAI-1 проводились методом ПЦР на приборе «Applied Biosystems 2720» (США) с использованием наборов реагентов НПО «Ли-тех» (Москва, Россия), согласно инструкции производителя. Статистический анализ результатов проведен с использованием пакета статистических программ «OpenEpi 2009».
Результаты и обсуждение. Анализ полученных результатов исследования показал следующее: частота аллеля 4G — полиморфизма гена PAI-1 в подгруппах с тромбозом (n = 53) и без тромбоза в основной группе больныхХМПЗ составила 57.5 % и 33.6 % (χ2 = 12.8; Р = 0.0003; OR = 2.7; 95 %CI 1.55–4.614), тогда как в контрольной группе этот показатель составил 28.8 %. Наряду с этим его частота в группе больных ХМЛ (n = 32) составила 42.2 % (в подгруппе А (n = 11) — 54.5 %, а в подгруппе Б (n = 21) — 35.7 %); п группе больных ИП (n = 79) составила 46.2 % (в подгруппе А (n = 42) — 58.3 %, а в подгруппе Б (n = 37) — 32.4 %)
Изучение частоты распределения генотипов полиморфизма PAI-1 в основной группе больных ХМПЗ и контроле показало,что носительство гомозиготного генотипа 5G/5G составило 30.6 % и 54.4 %, соответственно, тогда как носительство гетерозиготного генотипа 5G/4G наблюдалось у 48.6 % и 30.5 % обследованных. Следует отметить, что как в группе больных,так и в контроле также выявлено носительство редкого гомозиготного генотипа 4G/4G (20.7 % против 7.9 %). В подгруппах А и Б основной группы носительство гомозиготного генотипа 5G/5G отмечалось у 15.1 % и 44.8 % (χ2 = 11.5; Р = 0.001; OR = 0.2; 95 % CI 0.09–0.54), соответственно, гетерозиготного генотипа 5G/4G у 54.7 % и 43.1 % (χ2 = 1.5; Р = 0.2; OR = 1.6; 95 % CI 0.753–3.377), гомозиготного генотипа 4G/4G у 30.2 % и 12.1 % (χ2 = 5.5; Р = 0.02; OR = 3.1; 95 %
CI 1.78–8.427) ( таблица 1 и таблица 2 ).
Частота распределения аллелей и генотипов полиморфизма 5G/4G гена PAI-1 в группах больных ХМПЗ и контроля
Таблица 1.
|
Группы |
5G |
4G |
5G/5G |
5G/4G |
4G/4G |
|||
|
% |
% |
n |
% |
n |
% |
n |
% |
|
|
ХМПЗ n = 111 |
54.9 |
45.0 |
34 |
30.6 |
54 |
48.6 |
23 |
20.7 |
|
А – с тромбозом, n = 53 |
42.5 |
57.5 |
8 |
15.1 |
29 |
54.7 |
16 |
30.2 |
|
Б - без тромбоза, n = 58 |
66.4 |
33.6 |
26 |
44.8 |
25 |
43.1 |
7 |
12.1 |
|
1. ХМЛ n = 32 |
57.8 |
42.2 |
10 |
31.2 |
17 |
53.1 |
5 |
15.6 |
|
А - с тромбозом, n = 11 |
45.4 |
54.5 |
2 |
18.2 |
6 |
54.5 |
3 |
27.3 |
|
Б -без тромбоза, n = 21 |
64.3 |
35.7 |
8 |
38.1 |
11 |
53.4 |
2 |
9.5 |
Продолжение таблицы
|
2. Истинная полицитемия, n = 79 |
53.8 |
46.2 |
24 |
30.4 |
37 |
46.8 |
18 |
22.8 |
|
А — с тромбозом, n = 42 |
41.7 |
58.3 |
6 |
14.3 |
23 |
54.8 |
13 |
30.9 |
|
Б — без тромбоза, n = 37 |
48.6 |
32.4 |
18 |
48.6 |
14 |
37.8 |
5 |
13.5 |
|
Контрольная группа, n = 114 |
73.2 |
26.8 |
62 |
54.4 |
43 |
30.5 |
9 |
7.9 |
Таблица 2.
|
5G/4G гена PAI-1 |
ХМПЗ + n = 53 |
ХМПЗ – n = 58 |
χ2 |
Р |
RR |
OR |
95 % CI |
|
5G |
45 |
77 |
12.8 |
0.0003 |
1.7 |
2.7 |
1.55-4.614 |
|
4G |
61 |
39 |
|||||
|
5G/5G |
8 |
26 |
11.5 |
0.001 |
0.3 |
0.2 |
0.0878-0.5451 |
|
5G/4G |
29 |
25 |
1.5 |
0.2 |
1.3 |
1.6 |
0.753-3.377 |
|
4G/4G |
16 |
7 |
5.5 |
0.02 |
2.5 |
3.1 |
1.178- 8.427 |
Различия в частоте встречаемости полиморфизма 5G/4G гена PAI ^1 в группе больных ХМПЗ с и без тромбоза
Распределение частоты генотипов в зависимости от нозологии ХМПЗ составило следующие значения: в группе больных ХМЛ и ИП носительство гомозиготного генотипа 5G/5G по отношению к контролю было в 1,74 (31.2 %) и 1,78 раз меньше (30.4 %), носительство гетерозиготного 5G/4G и гомозиготного 4G/4G генотипов наооборот превышало в 1,74 (53.1 %) и 1,53 (46.8 %) раза, атакже в 1.97(15.6 %) и 2.9(22.8 %) раза соответственно.
Сравнительная оценка распределения частот генотипов при ХМЛ и ИП в зависимости от подгрупп больных с наличием тромбоза и без него показало,что у больных с тромбо-
Различия в частоте встречаемости полиморфизма 5G/4G гена PAI ^1 в группе больных ХМЛ с и без тромбоза
зом частота носительства генотипов 5G/4G и 4G/4G несколько превышает таковые среди больных без тромботических осложнений Так, в у больных ХМЛ А подгруппы в сравнение с Б подгруппой это составило статистически незначимое различие — 54.5 % против 53.4 %; χ2 = 0.06; Р = 0.8; OR = 1.1; 95 %CI 0.25– 4.714 и 27.3 % против 9.5 %; χ2 = 1.7; Р = 0.2; OR = 3.6; 95 %CI 0.496–25.56. Тогда как у больных ИПА подгруппы в сравнение с Б подгруппой это различие составило — 54.8 % против 37.8 %; χ2 = 2.3; Р = 0.1; OR = 2.0; 95 %CI 0.808– 4.893 и 30.9 % против 13.5 %; χ2 = 2.3; Р = 0.1; OR = 2.9; 95 %CI 0.910–9.03 (таблица 3 и таблица 4).
Таблица 3.
|
PAI-1 5G/4G |
Подгруппа |
χ2 |
Р |
RR |
OR |
95 % CI |
|
|
А |
Б |
||||||
|
5G |
10 |
27 |
2.1 |
0.1 |
1.5 |
2.2 |
0.75–6.17 |
|
4G |
12 |
15 |
|||||
|
5G/5G |
2 |
8 |
1.3 |
0.2 |
0.5 |
0.4 |
0.061–2.11 |
|
5G/4G |
6 |
11 |
0.06 |
0.8 |
1.0 |
1.1 |
0.25–4.714 |
|
4G/4G |
3 |
2 |
1.7 |
0.2 |
2.9 |
3.6 |
0.496–25.56 |
Таблица 4.
|
PAI-1 5G/4G |
Подгруппа |
χ2 |
Р |
RR |
OR |
95 % CI |
|
|
А |
Б |
||||||
|
5G |
35 |
50 |
10.6 |
0.001 |
1.8 |
2.9 |
1.52–5.598 |
|
4G |
49 |
24 |
|||||
|
5G/5G |
6 |
18 |
11.0 |
< 0.05 |
0.3 |
0.2 |
0.059–0.5171 |
|
5G/4G |
23 |
14 |
2.3 |
0.1 |
1.4 |
2.0 |
0.808–4.893 |
|
4G/4G |
13 |
5 |
2.3 |
0.1 |
2.3 |
2.9 |
0.910–9.03 |
Различия в частоте встречаемости полиморфизма
5G/4G гена PAI-1 в группе больных ХМЛ с и без тромбоза
В объединенной группе пациентов ХМЛ и ИП нами выявлено соответствие наблюдаемых и ожидаемых частот генотипов по РХВ с выбранным уровнем значимости P > 0,05, при этом χ2 = 0.8 и Р = 0.4. В частности, наблюдаемая частота (0.16) генотипа 5G/5G в группе больных несколько отличалась от ожидаемой частотой (0.19); в отношении гетерозиготного 5G/4G гомозиготного генотипов 4G/4G наблюдаемая частота оставила 0,55 и 0,29, а ожидаемая — 0,49 и 0,32. При этом различие между наблюдаемой и ожидаемой частотами гетерозигот статистически незначимы, что определяет статистически незначимое преобладание гетерозигот в группе больных.Статистических достоверных различий в показателях для гомозигот по данному полиморфному варианту также не выявлено.
Эти данные позволяют сделать вывод, о том, что гетерозиготный гомозиготный генотипы полиморфизма 5G/4G гена PAI-1 в подгруппеАу пациентовХМЛ и ИП повышает риск развития тромбозов. Возможно, это связано с тем,что,у лиц с гетерозиготным генотипом теряется защитный эффект, оказываемый диким генотипом 5G/4G, в следствие чего могут развиваться тромбофилические состояния.
Список литературы Ассоциация полиморфизма 5G/4G гена PAI-1С развитием тромбофилических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях
- Абдулкадыров, К. М., Шуваев В. А., И. С. Мартынкевич И. С. Что нам известно об истинной полицитемии (обзор литературы и собственные данные) // Онкогематология.- 2015.- № 10.- C. 28.
- Блинецкая С. Л. Основные наследственные тромбофилии и их роль при привычном невынашивании беременности. АГ-инфо. 1/2013. С. 16-21.
- Ватутин Н.Т., ТарадинГ. Г., Бахтеева Т. Д., и др. Истинная полицитемия: современные представления о патогенезе, диагностике, лечении // Ж. Клиническая медицина.- 2012.- № 8. - С. 24-31.
- Керимов А. А. Хронические миелопролиферативные заболевания: современное состояние вопроса. // Биомедицина 3/2014. С. 3-8.
- Кузнецова П. И. Гемореологические аспекты тромботических осложнений при Ph-негативных миелопролиферативных заболеваниях // Тромбоз, гемостаз и реология.- 2016.- Т. 67, № S3.-С. 232-234.
- Момот А. П. Проблема тромбофилии в клинической практике // Российский журнал детской гематологии и онкологии. 2015. № 1. С. 36-48.
- Heit J.A. Thrombophilia: Clinical and Laboratory Assessment and Manajement. In: Kitchens C. S., Kessler C. M., Konkle B.A., eds. Consultative Hemostasis and Thrombosis. 3rd ed. Philadelphia: Saunders Elsevier, 2013. Pp. 205-39.
- McManus R. J., Fitzmaurice D.A., Murray E., Taylor C. Thromboembolism. Clin Evid 2011; 2011: pii:0208.
