Ассоциация полиморфизма 5G/4G гена PAI-1С развитием тромбофилических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях
Автор: Шамсутдинова Д. Б., Каримов Х. Я., Бобоев К. Т.
Журнал: Вестник гематологии @bulletin-of-hematology
Рубрика: Оригинальные статьи
Статья в выпуске: 4 т.15, 2019 года.
Бесплатный доступ
Изучены ассоциации полиморфизма гена PAI-1 с развитием тромбофилических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях (ХМПЗ). Работа выполнена на образцах ДНК, выделенных из периферической крови больных с наиболеечасто встречающимися ХМПЗ: хроническим миелолейкозом (ХМЛ, n = 32) и истинной полицитемией (ИП, n = 79), а также группы контроля (n = 114). Генотипирование образцов и детекция полиморфизма 5G/4G генаPAI-1 проводились методом ПЦР на приборе«Applied Biosystems 2720» (США) с использованием наборов реагентов НПО «Литех»(Москва, Россия). Статистический анализ результатов проведен с использованием пакета статистических программ «OpenEpi 2009». Порезультатам работы выявлено, что гетерозиготный и гомозиготный генотипы полиморфизма 5G/4G гена PAI-1 в подгруппе с тромбозом в группах больных ХМЛ и ИП повышаетриск развития тромбозов. Возможно, это связано с тем, что, у лиц с гетерозиготным генотипом теряется защитный эффект, оказываемый диким генотипом 5G/5G, вследствиечего могут развиваться тромбофилические состояния.
Хронические миелопролиферативные заболевания, хроническиймиелолейкоз, истинная полицитемия, носительство, полиморфизма 5g/4g гена pai-1, генотип, тромбофилические состояния
Короткий адрес: https://sciup.org/170171777
IDR: 170171777
Association of polymorphism 5G/4G PAI-1 gene with the developmentof thrombophilic states in chronic myeloproliferative diseases
Studying the association of thepolymorphism of the PAI-1 gene with thedevelopment of thrombophilic conditions inchronic myeloproliferative diseases. The workwas performed on DNA samples isolated fromthe peripheral blood of patients with the mostcommon chronic myeloid leukemia (CML,n = 32) and polycythemia vera (PV, n = 79), aswell as the control group (n = 114). Genotypingof the samples and detection of the 5G/4Gpolymorphism of the PAI-1 gene were performedby PCR on an “Applied Biosystems 2720” device(USA) using the “Litekh” reagent kits (Moscow,Russia). Statistical analysis of the resultswas performed using the statistical softwarepackage “OpenEpi 2009”. Results and discussion.Heterozygous and homozygous genotypes of the5G/4G polymorphism of the PAI-1 gene in thesubgroup with thrombosis in groups of patientswith CML and PV increases the risk of thrombosis.Perhaps this is due to the fact that, in individualswith a heterozygous genotype, the protectiveeffect of the wild genotype 5G/5G is lost, as aresult of which thrombophilic conditions maydevelop.
Текст научной статьи Ассоциация полиморфизма 5G/4G гена PAI-1С развитием тромбофилических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях
кроветворной клетки [1, 2, 3]. Наряду с проявлениями, связанными с клональной экспансией, при ХМПЗ зачастую развиваются тромбозы, усугубляющие течение основного заболевания. Высокая вероятность и труд- ности лечения тромботических осложнений при ХМПЗ требуют необходимость своевременной оценки факторов приводящих к развитию тромбозов у онкогематологических больных, в частности при хроническом миелолейкозе (ХМЛ) и истинной полицитемии (ИП) [4].
Современная диагностика тромбофиличе-ских состояний предусматривает определение носительства тромбогенных мутаций и полиморфизмов [5]. Многочисленные исследования последних лет посвящены изучению роли мутации ряда генов,полиморфизма гена PAI-1 в предрасположенности к формированию тромбофилических состояний [6,7, 8]. Однако, в доступной нам литературе, исследований посвященных изучению полиморфизма гена PAI-1 в развитии тромбофилических состояний при ХМПЗ не обнаружено,в связи с чем исследования в данном направлении представляется интересным.
Цель работы. Изучение ассоциации полиморфизма 5G/4G гена PAI-1 с развитием тромбо-филических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях.
Материалы и методы. В исследование включено 111 больных с наиболее часто встречающимися ХМПЗ:схроническим миелолейкозом (ХМЛ, n = 32) и истинной полицитемией (ИП, n = 79), а также группы контроля (n = 114). Сбор материала для исследования,осуществлен на базе клиники научно-исследовательского института Гематологии и переливания крови МЗ РУз. Больные ХМПЗ составили основную группу (n = 111), которые в соответствие с нозологией распределены на 2 группы:1-я — больные с ХМЛ,2-я — с ИП,при этом каждая группа разделена на две подгруппы А — с тромбозом и Б — без тромбоза.
Генотипирование образцов и детекция полиморфизма гена PAI-1 проводились методом ПЦР на приборе «Applied Biosystems 2720» (США) с использованием наборов реагентов НПО «Ли-тех» (Москва, Россия), согласно инструкции производителя. Статистический анализ результатов проведен с использованием пакета статистических программ «OpenEpi 2009».
Результаты и обсуждение. Анализ полученных результатов исследования показал следующее: частота аллеля 4G — полиморфизма гена PAI-1 в подгруппах с тромбозом (n = 53) и без тромбоза в основной группе больныхХМПЗ составила 57.5 % и 33.6 % (χ2 = 12.8; Р = 0.0003; OR = 2.7; 95 %CI 1.55–4.614), тогда как в контрольной группе этот показатель составил 28.8 %. Наряду с этим его частота в группе больных ХМЛ (n = 32) составила 42.2 % (в подгруппе А (n = 11) — 54.5 %, а в подгруппе Б (n = 21) — 35.7 %); п группе больных ИП (n = 79) составила 46.2 % (в подгруппе А (n = 42) — 58.3 %, а в подгруппе Б (n = 37) — 32.4 %)
Изучение частоты распределения генотипов полиморфизма PAI-1 в основной группе больных ХМПЗ и контроле показало,что носительство гомозиготного генотипа 5G/5G составило 30.6 % и 54.4 %, соответственно, тогда как носительство гетерозиготного генотипа 5G/4G наблюдалось у 48.6 % и 30.5 % обследованных. Следует отметить, что как в группе больных,так и в контроле также выявлено носительство редкого гомозиготного генотипа 4G/4G (20.7 % против 7.9 %). В подгруппах А и Б основной группы носительство гомозиготного генотипа 5G/5G отмечалось у 15.1 % и 44.8 % (χ2 = 11.5; Р = 0.001; OR = 0.2; 95 % CI 0.09–0.54), соответственно, гетерозиготного генотипа 5G/4G у 54.7 % и 43.1 % (χ2 = 1.5; Р = 0.2; OR = 1.6; 95 % CI 0.753–3.377), гомозиготного генотипа 4G/4G у 30.2 % и 12.1 % (χ2 = 5.5; Р = 0.02; OR = 3.1; 95 %
CI 1.78–8.427) ( таблица 1 и таблица 2 ).
Частота распределения аллелей и генотипов полиморфизма 5G/4G гена PAI-1 в группах больных ХМПЗ и контроля
Таблица 1.
|
Группы |
5G |
4G |
5G/5G |
5G/4G |
4G/4G |
|||
|
% |
% |
n |
% |
n |
% |
n |
% |
|
|
ХМПЗ n = 111 |
54.9 |
45.0 |
34 |
30.6 |
54 |
48.6 |
23 |
20.7 |
|
А – с тромбозом, n = 53 |
42.5 |
57.5 |
8 |
15.1 |
29 |
54.7 |
16 |
30.2 |
|
Б - без тромбоза, n = 58 |
66.4 |
33.6 |
26 |
44.8 |
25 |
43.1 |
7 |
12.1 |
|
1. ХМЛ n = 32 |
57.8 |
42.2 |
10 |
31.2 |
17 |
53.1 |
5 |
15.6 |
|
А - с тромбозом, n = 11 |
45.4 |
54.5 |
2 |
18.2 |
6 |
54.5 |
3 |
27.3 |
|
Б -без тромбоза, n = 21 |
64.3 |
35.7 |
8 |
38.1 |
11 |
53.4 |
2 |
9.5 |
Продолжение таблицы
|
2. Истинная полицитемия, n = 79 |
53.8 |
46.2 |
24 |
30.4 |
37 |
46.8 |
18 |
22.8 |
|
А — с тромбозом, n = 42 |
41.7 |
58.3 |
6 |
14.3 |
23 |
54.8 |
13 |
30.9 |
|
Б — без тромбоза, n = 37 |
48.6 |
32.4 |
18 |
48.6 |
14 |
37.8 |
5 |
13.5 |
|
Контрольная группа, n = 114 |
73.2 |
26.8 |
62 |
54.4 |
43 |
30.5 |
9 |
7.9 |
Таблица 2.
|
5G/4G гена PAI-1 |
ХМПЗ + n = 53 |
ХМПЗ – n = 58 |
χ2 |
Р |
RR |
OR |
95 % CI |
|
5G |
45 |
77 |
12.8 |
0.0003 |
1.7 |
2.7 |
1.55-4.614 |
|
4G |
61 |
39 |
|||||
|
5G/5G |
8 |
26 |
11.5 |
0.001 |
0.3 |
0.2 |
0.0878-0.5451 |
|
5G/4G |
29 |
25 |
1.5 |
0.2 |
1.3 |
1.6 |
0.753-3.377 |
|
4G/4G |
16 |
7 |
5.5 |
0.02 |
2.5 |
3.1 |
1.178- 8.427 |
Различия в частоте встречаемости полиморфизма 5G/4G гена PAI ^1 в группе больных ХМПЗ с и без тромбоза
Распределение частоты генотипов в зависимости от нозологии ХМПЗ составило следующие значения: в группе больных ХМЛ и ИП носительство гомозиготного генотипа 5G/5G по отношению к контролю было в 1,74 (31.2 %) и 1,78 раз меньше (30.4 %), носительство гетерозиготного 5G/4G и гомозиготного 4G/4G генотипов наооборот превышало в 1,74 (53.1 %) и 1,53 (46.8 %) раза, атакже в 1.97(15.6 %) и 2.9(22.8 %) раза соответственно.
Сравнительная оценка распределения частот генотипов при ХМЛ и ИП в зависимости от подгрупп больных с наличием тромбоза и без него показало,что у больных с тромбо-
Различия в частоте встречаемости полиморфизма 5G/4G гена PAI ^1 в группе больных ХМЛ с и без тромбоза
зом частота носительства генотипов 5G/4G и 4G/4G несколько превышает таковые среди больных без тромботических осложнений Так, в у больных ХМЛ А подгруппы в сравнение с Б подгруппой это составило статистически незначимое различие — 54.5 % против 53.4 %; χ2 = 0.06; Р = 0.8; OR = 1.1; 95 %CI 0.25– 4.714 и 27.3 % против 9.5 %; χ2 = 1.7; Р = 0.2; OR = 3.6; 95 %CI 0.496–25.56. Тогда как у больных ИПА подгруппы в сравнение с Б подгруппой это различие составило — 54.8 % против 37.8 %; χ2 = 2.3; Р = 0.1; OR = 2.0; 95 %CI 0.808– 4.893 и 30.9 % против 13.5 %; χ2 = 2.3; Р = 0.1; OR = 2.9; 95 %CI 0.910–9.03 (таблица 3 и таблица 4).
Таблица 3.
|
PAI-1 5G/4G |
Подгруппа |
χ2 |
Р |
RR |
OR |
95 % CI |
|
|
А |
Б |
||||||
|
5G |
10 |
27 |
2.1 |
0.1 |
1.5 |
2.2 |
0.75–6.17 |
|
4G |
12 |
15 |
|||||
|
5G/5G |
2 |
8 |
1.3 |
0.2 |
0.5 |
0.4 |
0.061–2.11 |
|
5G/4G |
6 |
11 |
0.06 |
0.8 |
1.0 |
1.1 |
0.25–4.714 |
|
4G/4G |
3 |
2 |
1.7 |
0.2 |
2.9 |
3.6 |
0.496–25.56 |
Таблица 4.
|
PAI-1 5G/4G |
Подгруппа |
χ2 |
Р |
RR |
OR |
95 % CI |
|
|
А |
Б |
||||||
|
5G |
35 |
50 |
10.6 |
0.001 |
1.8 |
2.9 |
1.52–5.598 |
|
4G |
49 |
24 |
|||||
|
5G/5G |
6 |
18 |
11.0 |
< 0.05 |
0.3 |
0.2 |
0.059–0.5171 |
|
5G/4G |
23 |
14 |
2.3 |
0.1 |
1.4 |
2.0 |
0.808–4.893 |
|
4G/4G |
13 |
5 |
2.3 |
0.1 |
2.3 |
2.9 |
0.910–9.03 |
Различия в частоте встречаемости полиморфизма
5G/4G гена PAI-1 в группе больных ХМЛ с и без тромбоза
В объединенной группе пациентов ХМЛ и ИП нами выявлено соответствие наблюдаемых и ожидаемых частот генотипов по РХВ с выбранным уровнем значимости P > 0,05, при этом χ2 = 0.8 и Р = 0.4. В частности, наблюдаемая частота (0.16) генотипа 5G/5G в группе больных несколько отличалась от ожидаемой частотой (0.19); в отношении гетерозиготного 5G/4G гомозиготного генотипов 4G/4G наблюдаемая частота оставила 0,55 и 0,29, а ожидаемая — 0,49 и 0,32. При этом различие между наблюдаемой и ожидаемой частотами гетерозигот статистически незначимы, что определяет статистически незначимое преобладание гетерозигот в группе больных.Статистических достоверных различий в показателях для гомозигот по данному полиморфному варианту также не выявлено.
Эти данные позволяют сделать вывод, о том, что гетерозиготный гомозиготный генотипы полиморфизма 5G/4G гена PAI-1 в подгруппеАу пациентовХМЛ и ИП повышает риск развития тромбозов. Возможно, это связано с тем,что,у лиц с гетерозиготным генотипом теряется защитный эффект, оказываемый диким генотипом 5G/4G, в следствие чего могут развиваться тромбофилические состояния.
Список литературы Ассоциация полиморфизма 5G/4G гена PAI-1С развитием тромбофилических состояний при хронических миелопролиферативных заболеваниях
- Абдулкадыров, К. М., Шуваев В. А., И. С. Мартынкевич И. С. Что нам известно об истинной полицитемии (обзор литературы и собственные данные) // Онкогематология.- 2015.- № 10.- C. 28.
- Блинецкая С. Л. Основные наследственные тромбофилии и их роль при привычном невынашивании беременности. АГ-инфо. 1/2013. С. 16-21.
- Ватутин Н.Т., ТарадинГ. Г., Бахтеева Т. Д., и др. Истинная полицитемия: современные представления о патогенезе, диагностике, лечении // Ж. Клиническая медицина.- 2012.- № 8. - С. 24-31.
- Керимов А. А. Хронические миелопролиферативные заболевания: современное состояние вопроса. // Биомедицина 3/2014. С. 3-8.
- Кузнецова П. И. Гемореологические аспекты тромботических осложнений при Ph-негативных миелопролиферативных заболеваниях // Тромбоз, гемостаз и реология.- 2016.- Т. 67, № S3.-С. 232-234.
- Момот А. П. Проблема тромбофилии в клинической практике // Российский журнал детской гематологии и онкологии. 2015. № 1. С. 36-48.
- Heit J.A. Thrombophilia: Clinical and Laboratory Assessment and Manajement. In: Kitchens C. S., Kessler C. M., Konkle B.A., eds. Consultative Hemostasis and Thrombosis. 3rd ed. Philadelphia: Saunders Elsevier, 2013. Pp. 205-39.
- McManus R. J., Fitzmaurice D.A., Murray E., Taylor C. Thromboembolism. Clin Evid 2011; 2011: pii:0208.
