Динамика частоты хромосомных аберраций в крови беременных женщин, проживающих во Владикавказе

Чопикашвили Лидия Васильевна, доктор биологических наук, заведующая медико-генетическим отделом Гаглоева Лейла Нодаровна, кандидат медицинских наук, доцент женщин фертильного возраста, особенно в период беременности. На некоторых промышленных территориях эта проблема вышла за рамки чисто медицинских, т.к. прогрессирующее ухудшение здоровья наиболее уязвимых групп населения напрямую связывают с возрастанием антропогенных нагрузок [6, 7].

Цель работы : проведение многолетнего цитогенетического обследования беременных женщин с отягощенным акушерским анамнезом.

Методика исследования. Всего обследовано 67 женщин, из которых 17 составили группу здоровых беременных женщин в сроке 26-37 недель (средний возраст 29±1,3 года), 50 беременных женщин с отягощенным акушерским анамнезом (ОАА) в сроке 16-40 недель и средним возрастом 31±0,91. Цитогенетическое исследование проводили на препаратах метафаз-ных хромосом лимфоцитов периферической крови, культивируемых в условиях in vitro в соответствии со стандартной процедурой [2]. Цельную кровь (1 мл) культивировали макрометодом в культуральной смеси, состоящей из 7,5 мл среды RPMI 1640 («Sigma») и 1,5 мл эмбриональной сыворотки («BioClot») в пробирках объемом 15 мл. Для стимуляции деления клеток в пробирки добавляли по 0,01 мг фитогемаглюти-нина («ПанЭко»). За 2 часа до фиксации в культуры добавляли колхицин (50 мкл), по окончании культивирования клетки обрабатывали гипотоническим раствором 0,55% KCl при 37º в течение 15 мин. Фиксацию клеточного материала проводили в трех сменах охлажденного этанол-уксусного фиксатора (3:1, общее время – 50 минут). Клеточную суспензию раскапывали на охлажденные предметные стекла, высушивали, шифровали и окрашивали 2% раствором красителя Гимза. На каждого донора анализировали от 100 до 300 метафазных пластин, на которых учитывали процент клеток с аберрациями хромосом; число одиночных фрагментов, хроматидных обменов, парных фрагментов и хромосомных обменов. Ахроматические пробелы в число аберраций не включали и учитывали отдельно (Бочков, 1974). Всего проанализировано

7300 метафазных пластинок. Статистическую обработку фактического материала проводили с помощью программ «Microsoft Office Excel 2007» и «Statistica 2010». Сравнение групп осуществлялось с помощью непараметрического рангового U -теста Манна-Уитни.

Результаты исследования. В табл. 1 представлены результаты 6-летнего цитогенетического мониторинга беременных женщин с ОАА, проживающих в Северной Осетии. Видно, что частота аберрантных метафаз в крови обследованных беременных с ОАА достоверно отличалась от контрольных значений (здоровые беременные, р ≤ 0,01).

Таблица 1. Частота хромосомных аберраций в крови беременных женщин с ОАА

Примечание: *- р ≤ 0,01 и ** - р ≤ 0,05

Результаты анализа цитогенетического обследования беременных женщин с ОАА, проживающих в Северной Осетии, за период с 2002 по 2011 г. выявили динамику частоты клеток с хромосомными аберрациями (рис. 1). Данный показатель у беременных женщин с ОАА за период наблюдений был минимальным в 2005 году, максимальных значений достиг в 2009 году (2,29±0,57 и 3,5±0,46, соответственно).

Рис. 1. Многолетняя динамика частот хромосомных аберраций в крови беременных женщин с ОАА

Полученные результаты свидетельствуют о том, что максимальная мутабильность в крови беременных женщин с ОАА и здоровых беременных выявлена в 2009 г.

Как видно из табл. 2 во всех обследованных группах преобладающим типом аберраций были одиночные фрагменты. Увеличение частоты клеток с хромосомными аберрациями преимущественно достигалось за счет парных фрагментов и обменов. За весь период исследований частота парных фрагментов у беременных женщин с ОАА была максимальной в 2009 г. и возросла до 1,13±0,39, что более, чем в 2 раза выше, чем средние величины данного показателя за прочие годы наблюдений (табл. 2). Отсутствие значительного роста аберраций хромосомного типа при существенном увеличении числа парных фрагментов и аберраций хроматидного типа, возможно, связанно с элиминацией клеток в условиях чрезмерного токсико-генетического воздействия. Об этом также свидетельствует значительный рост в группе женщин с ОАА в 2009 г. числа полиплоидных клеток и клеток, содержащих более 1 хромосомной аберрации (табл. 2).

Таблица 2. Спектр хромосомных аберраций в крови беременных женщин с ОАА

Исследования показали, что пределы колебаний аберрантных метафаз в крови беременных женщин с ОАА варьировали в широких пределах – от 0 до 7%. У здоровых беременных данный показатель составил от 1 до 3%.

Выводы: в результате проведенного цитогенетического обследования беременных было выявлено значимое превышение среднего числа клеток с хромосомными аберрациями в группе женщин с ОАА по сравнению со здоровыми беременными (3,15±0,24% против 2,06±0,31% соответственно, р ≤ 0,01). За период наблюдений наибольшее число аберрантных метафаз на 100 клеток, выявленное в 2009 г., во всех группах является показателем значительного усиления мутагенного давления на организм обследованных беременных. Полученные данные свидетельствуют о необходимости антимутагенной профилактики у этой категории граждан Северной Осетии.