Изучение токсикологических свойств новой многокомпонентной кормовой добавки

Введение. Птицеводство – одна из наиболее динамично развивающихся отраслей сельского хозяйства. Аграрный комитет Российской Федерации активно поддерживает развитие этой сферы в промышленных масштабах [1, 2, 3]. Сегодня птицеводство является ключевым направлением, обеспечивающим страну продукцией высокого качества [2, 4]. За последние десять лет активно набирает тем роста экспорта отечественной продукции птицеводства. Если в 2023 г. экспорт мяса составлял 362,9 тыс. т (65% от общего объема), то по данным Минсельхоза РФ и Россельхознадзора в 2024 году показатель приблизился к 500 тыс. тонн, в 2025 г. - 550-600 тысячам тоннам [5]. Для увеличения объёмов производства и коммерческой привлекательности необходимо полностью использовать генетический потенциал птицы [1].

Одним из способов достижения этой цели является улучшение условий кормления, включая использование высокоэффективных биологически активных кормовых добавок в рационе [6, 7, 8]. Отряд гусеобразных способны потреблять большие объёмы зелёного пастбищного корма, однако этот рацион не всегда полностью покрывает их потребности питательных веществах. В этой связи особое внимание привлекают кормовые добавки с улучшенными свойствами. Эффект связан с улучшением метаболических процессов и запуском механизмов, обуславливающих активацию ростовых процессов и обеспечивающих интен- сивный рост организма. Физиологические изменения, запускаемые добавкой, в итоге положительно сказываются на ключевых технологических показателях мяса [1]. Обязательным этапом, предшествующим внедрению в промышленное птицеводство, является токсикологическая оценка любой кормовой добавки [9, 10].

Исходя из вышеизложенного, целью нашего исследования являлось изучение токсикологических свойств новой многокомпонентной кормовой добавки «СелЕсап» на лабораторных животных.

Условия, материалы и методы. Исследования проводились в условиях кафедры технологии животноводства, кормления и зоогигиены ФГБОУ ВО Казанский ГАУ. Опыт по изучению раздражающего действия проводили на кроликах породы советская шиншилла. Для этого были созданы 3 группы по 3 особи в каждой, весом 2,9±0,25 кг. Работа включала в себя две серии: нанесение добавки на кожу и слизистые оболочки глаз.

За сутки до начала исследования с кожи животных в лопаточной области, с обеих сторон спины, удаляли волосяной покров на участках размером 5 × 5 см2, предназначенных для аппликации.

На подготовленный участок кожи кролика, с правой стороны, однократно вносили суспензию кормовой добавки в дозах, представленных в таблице 1. Слева, в качестве контрольной точки, наносили 1 мл дистиллированной воды.

Таблица 1 – Дозы кормовой добавки при накожной аппликации

Группа	Доза и количество			Летальность, гол.
	Доза, мг/кг	Комплексная кормовая добавка, мг/гол	Вода, мл
1	2000	5800	3,0	0
2	4000	11600	3,0	0
3	6000	17400	3,0	0

Спустя четыре часа после нанесения исследуемого вещества, остатки суспензии тщательно удаляли с кожи стерильной ватой. Затем этот участок промывали тёплой водой с мылом. За реакцией кожи наблюдали через один и восемнадцать часов после аппликации. Наблюдения за животными продолжали в течение 7 дней.

Раздражающее действие кормовой добавки «СелЕсап» на слизистую оболочку глаз проводили путём внесения суспензии в нижний отдел конъюнктивального мешка левого глаза, при этом в правый глаз, служивший контролем, вносили дистиллированную воду. Для усиления эффекта и обеспечения равномерного распределения суспензии верхний край роговицы мягко прижимали в течение одной минуты, что давало возможность исключения потери препарата и обеспечивало его максимальный контакт с поверхностью глаза. Наблюдение за состоянием слизистой оболочки глаз осуществляли в течение одной недели.

Опыты по определению эмбриотоксиче-ских и тератогенных свойств кормовой добавки проводили на половозрелых самках белых крыс линии Wistar в возрасте 7-9 недель, имевшие массу тела в диапазоне 190-210 г. Были сформированы 4 группы: животных три опытные группы и одна контрольная по 10 животных в каждой. Все лабораторные животные находились в одинаковых условиях среды.

Для получения синхронизированной беременности использовали схему совместного содержания самцов и самок в соотношении 1 : 3. На следующие сутки у самок были взяты влагалищные мазки, по обнаружению сперми-ев устанавливали первый день беременности. В течение опыта беременным крысам опытных групп внутрижелудочно вводили новую кормовую добавку в виде суспензии, в дозах 2000, 4000, 6000 мг/кг соответственно. Контроль получал 2 мл дистиллированной воды. На 20-ый день беременности было эвтанази-ровано по 4 самки. После их вскрытия прово- дили исследование матки и плаценты, подсчет количества желтых тел и количество плодов. Для оценки постнатального влияния кормовой добавки «СелЕсап» от сохранившихся самок получили потомство и наблюдали за ним на протяжении месяца, при этом учитывали двигательную активность, сроки открывания глаз, появление волосяного покрова и общее физическое развитие.

Результаты и обсуждение. При исследовании раздражающего действия суспензии кормовой добавки «СелЕсап» особое внимание уделялось таким признакам, как покраснение, повышение чувствительности и воспаление. По прошествии часа после нанесения аппликации на опытный участок кожи кроликов первой и второй групп, не было выявлено признаков эритемы и отёка, а поверхность кожи оставалась идентичной контрольному участку. В то время как, у кроликов третьей группы на опытном участке наблюдались незначительные проявления отёка и покраснения. Однако, к седьмому часу эксперимента эти симптомы заметно регрессировали, а к восьмому часу они полностью исчезли, свидетельствуя о минимальном раздражающем воздействии исследуемой кормовой добавки.

Исследование реакции конъюнктивы глаза проводилось непосредственно после внесения кормовой добавки, далее с интервалом в 15 минут в течение первого часа, а также через 24 и 48 часов. Оценивались общие клинические признаки животного, степень отёка век и интенсивность слезоотделения.

Исследование реакции конъюнктивы глаза выявило незначительное покраснение и слезотечение, которые исчезали через 5 минут. В ходе эксперимента не наблюдалось посторонних реакций или патологических изменений. Конъюнктива оставалась интактной, без видимых патологий и лакримаций. Общее состояние кроликов оставалось без изменений. Оценка интенсивности реакции проводилась в баллах по шкале ГОСТ ISO 10993-10-2011 (табл. 2).

Таблица 2 – Система оценки и классификации глаз

Интенсивность реакции	Общая оценка в баллах (ГОСТ ISO 10993-10-2011)	Раздражающий эффект
Отсутствие реакции	1	Слабый
Выраженная гиперемия	1	Слабый
Наличие лакримации	3	Слабо выраженный
Наличие выделений	6	Умеренный
Длительная ярко выраженная гиперемия, лакримация, отёк век	9	Выраженный
Слабая гиперемия	2	Слабый

Таким образом, исходя из полученных результатов можно сделать заключение о том, что кормовая добавка «СелЕсап» не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз лабораторных животных.

Результаты патологоанатомического вскрытия животных, использованных в оценке эмбриотоксичности и тератогенности, показаны в таблице 3.

Таблица 3 – Эмбриотоксичность и тератогенность комплексной кормовой добавки на крысах линии Wistar

Показатель	Группа (n=4)
	I-контроль	II	III	IV
Количество желтых тел, ед.	11,3±0,87	11,6±1,03	11,8±0,55	11,4±0,31
Количество мест имплантации, ед.	9,8±0,92	10,2±0,83	10,4±0,36	9,9±0,49
Предимплантационная гибель, %	13,27	12,06	11,86	13,16
Количество живых эмбрионов, ед.	9,5±0,66	9,9±0,95	10,1±0,54	9,6±0,61
Постимплатационная гибель, %	3,07	3,00	2,88	3,08
Масса эмбрионов	3,3±0,24	3,4±0,18	3,5±0,23	3,3±0,35
Краниокаудальное размеры эмбриона, мм	30,8±0,41	32,1±0,33	33,7±0,28	30,9±0,34
Уродства,    аномалии развития: - внешнего вида - костной системы - внутренних органов	Не обнаружены
Общая  эмбриональная смертность, %	15,93	14,66	14,41	15,79

Анализ репродуктивной функции по показателям количества желтых тел и числа мест имплантации не выявил достоверных различий между опытными и контрольной группами, что указывает на отсутствие отрицательного воздействия на овуляцию и имплантацию. При макроскопическом исследовании плодов под лупой аномалии в развития глаз (анофтальмия, микрофтальмия), черепа (заячья губа, волчья пасть и др.), головного мозга (мозговой грыжи и др.), конечностей, пальцев, хвоста, позвоночника и передней брюшной стенки обнаружено не было, что свидетельствовало об отсутствии эмбриотоксических и тератогенных свойств. В течение всего периода беременности состояние крыс было в пределах физиологической нормы. Во всех опытных группах в постнатальный период уродств и мертворожденных крысят не наблюдали.

У новорожденных отмечался активный сосательный рефлекс и нормальные кожные покровы, шерсть появлялась на 8-9-й день, а глаза открывались на 14-15-й день. На протяжении последующих двух месяцев наблюдения патологий в развитии и здоровье потомства выявлено не было (табл. 4).

Таблица 4 – Показатели морфометрии самок и развития

Показатель	Группа (n=6)
	1-контроль	2	3	4
1 сутки	189,11 ±2,74	188,52±2,63	188,34±2,34	189,39±3,12
7 сутки	201,04±2,93	200,61±2,75	201,15±2,56	201,32±2,96
14 сутки	227,33±2,85	228,43±2,61	229,60±2,44	227,74±2,81
21 сутки	262,95±2,51	264,54±2,43	266,31±2,35	263,13±2,73
Продолжительность беременности, сут.	21,70±0,16	22,10±0,14	22,50±0,10	21,90±0,25
Количество крысят на 1 самку, гол.	9,30±0,32	9,40±0,26	9,70±0,18	9,30±0,47
Масса помета, г	45,11±2,38	46,34±1,73	48,15±1,65	44,70± 1,96
Масса тела новорожденного, г	4,85±0,61	4,93±0,46	4,96±0,36	4,81±0,48

В результате проведенного эксперимента исследование выявило существенное влияние кормовой добавки «СелЕсап» на метаболический статус крыс.

Увеличение среднесуточных приростов во всех опытных группах указывает на улучшение усвояемости питательных веществ при применении кормовой добавки. Крысы опытной группы имеют большую живую массу по сравнению с контрольными животными. Полученный результат подтверждает ростостимулирующий эффект кормовой добавки. Наряду с повышением живой массы у крыс в опытных группах наблюдался пропорциональный рост массы внутренних органов по сравнению с контролем, что обусловлено введением кормовой добавки.

Выводы. Таким образом, при токсикологической оценке новой кормовой добавки

«СелЕсап» установлено, что она не обладает раздражающим действием при накожных аппликациях и внесении на слизистую оболочку глаз.

Результаты исследовании подтвердили отсутствие эмбриотоксичности и тератогенности в кормовой добавке и свидетельствовали о безопасности в дозах – 2000, 4000 и 6000 мг/ кг. О развитии эмбрионов в пределах физиологических норм свидетельствовал прирост живой массы самок в период беременности. Таким образом, кормовая добавка «СелЕсап» в дозе до 6000 мг/кг не оказывала отрицательного влияния на течение беременности самок, их эмбрионов и молодняка в эмбриональный и постэмбриональный периоды развития, что служит обоснованием её безопасного включения в схемы кормления сельскохозяйственных птицы.