Корреляции свободных легких цепей иммуноглобулинов с биохимическими и иммунологическими показателями крови у больных с множественной миеломой

Автор: Голенков А.К., Митина Т.А., Клинушкина Е.Ф., Катаева Е.В., Чуксина Ю.Ю., Черных Ю.Б., Трифонова Е.В., Захаров С.Г., Высоцкая Л.Л., Белоусов К.А., Марьина С.А., Зулькарнаев А.Б., Варданян Р.В., Мадзяра О.П., Когарко И.Н., Когарко Б.С.

Журнал: Вестник гематологии @bulletin-of-hematology

Рубрика: Оригинальные статьи

Статья в выпуске: 1 т.19, 2023 года.

Бесплатный доступ

Метод определения свободных легких цепей (СЛЦ) является высоко чувствительным, быстрым и относительно простым диагностическим исследованием при множественной миеломе (ММ). Многими исследованиями была показана прогностическая и диагностическая ценность определения концентраций и отношения κ/λ СЛЦ. В нашем исследовании предпринято изучение корреляций значений СЛЦ и их κ/λ отношения с другими иммунологическими и биохимическими показателями у больных с ММ. В исследование включено 56 больных с ММ. Проводился анализ групп больных с IgG ММ (n=36), миеломой Бенс-Джонса (Bj ММ) (n=12) и IgA (n=8) ММ. Определяли значения и достоверность корреляций параметров общего белка (ОБ), иммуноглобулинов 3 основных классов (IgG, IgA, IgM), β2-микроглобулина (β2М), С-реактивного белка (СРБ), концентрации парапротеина (PIg), свободных легких цепей κ и λ (СЛЦ), κ/λ отношения. У больных с IgG ММ отмечались достоверные значения корреляций ОБ и IgG (R 0,60; p

Еще

Множественная миелома, свободные легкие цепи, иммуноглобулины, β2-микроглобулин, с-реактивный белок

Короткий адрес: https://sciup.org/170198328

IDR: 170198328

Текст научной статьи Корреляции свободных легких цепей иммуноглобулинов с биохимическими и иммунологическими показателями крови у больных с множественной миеломой

Метод определения свободных легких цепей иммуноглобулинов κ и λ основан на способности специальных диагностических антител реагировать со скрытыми детерминантами легких цепей Ig. В процессе синтеза полной (интактной) молекулы Ig в антителопродуцирующей клетке создается избыток легких цепей, которые можно определить в циркуляции. В полной молекуле Ig легкие цепи прочно связаны с тяжелыми цепями (две легкие и две тяжелые цепи) и изотип полной молекулы Ig по легким цепям можно определить с помощью диагностических антител к поверхностным детерминантам легкой цепи. Однако эти антитела не могут различить циркулирующие СЛЦ и легкие цепи, интегрированные в полную молекулу Ig. Методические возможности определения циркулирующих СЛЦ (FreeLight Assay) послужили основанием для изучения их функции и клинического значения в гематологии и терапии. В гематологии применение данного метода касалось в основном парапротеинемий, где изменения белкового обмена были минимальными и не могли быть установлены стандартами иммунохими-ческими методами. Это касалось несекретирующей ММ, перехода моноклональной гаммапатии неясного значения (MGUS) в ММ, Bj ММ, AL-амилоидоза. Изучение СЛЦ при ММ с интактной молекулой PIg позволило рассматривать этот метод как альтернативу стандартным иммунохимическим методикам, имеющий более высокую точность и скорость получения результатов [1].

В наших предшествующих работах важные данные были получены при анализе отношений концентраций СЛЦ в ликворе и сыворотке при ММ, что позволяло прогнозировать опухолевые поражения ЦНС [2]. Высокие значения СЛЦ в крови у больных Bj ММ можно расценивать как серьезный риск поражения почек еще до наступления протеинурии перегрузки [1].

Большой интерес представляли работы по изучению чувствительности к велкейду у больных ММ за счет короткого периода полураспада СЛЦ (2-4 часа). Если после введения больному велкейда концентрация опухолевой СЛЦ снижалась через сутки на 30%, то полученный результат расценивался как чувствительность к препарату [1]. Более высокая чувствительность метода FreeLight, чем стандартные иммунохимические методики, позволила использовать его для диагностики строго полного ответа в международных оценочных системах [3]. В последнее время метод FreeLight стали использовать для antibody producers in MM, as well as the association of the paraprotein with β2-microglobulin, which is an important prognostic marker in IgG MM.

В наших исследованиях было показано, что повышенная сумма концентраций поликлональных СЛЦ у больных ХЛЛ без СЛЦ клона сопровождалась более коротким временем до начала химиотерапии [6]. Учитывая изложенное, становится очевидным, что роль СЛЦ в диагностике ММ и ХЛЛ не ограничивается характеристикой опухолевого роста, но также имеет более широкое прогностическое значение. В связи с этим было предпринято настоящее исследование, направленное на изучение концентрации СЛЦ и κ/λ отношение у больных ММ в сравнении с другими иммунологическими и биохимическими показателям крови для установления закономерных корреляций между ними.

Методы исследования

В исследование включено 56 больных ММ (32 -мужчины; 24 - женщины) в возрасте 58 лет (40-71). Впервые диагностированная ММ установлена у 10 больных, остальным проводилось химиотерапевтическое лечение с достижением противоопухолевого ответа, который определяли по концентрациям PIg в сыворотке: IgG ММ (n=36) – 13,7 г/л (1,0-65,0); Bj ММ (n=12) – 2,3 г/л (1,0-8,4); IgA ММ (n=8) – 6,7 г/л (1,0-11,5). Исследование проводили однократно с определением ОБ, иммуноглобулинов 3 основных классов (IgG, IgA, IgM), β2М, СРБ, концентрации и изотипа PIg. При этом применяли методы, которые являлись стандартными в лабораторной практике клинических учреждений. Свободные легкие цепи иммуноглобулинов сыворотки крови определяли на иммунохимическом анализаторе Immage 800 Beckman Coulter, США с использованием поликлональных диагностических антисывороток раздельно против κ и λ (Binding Site, Англия) с вычислением κ/λ отношения. Статистический анализ проводили по критерию ранговой корреляции Спирмена с вычислением корреляционных коэффициентов с подтверждением достоверности результатов, которые были отобраны для анализа.

Результаты

Основываясь на данных, представленных в таблицах 1 и 2, были выделены достоверные корреляции указанных показателей при IgG ММ (IgGκ – 26; IgGλ – 10).

Таблица 1

Значения корреляций СЛЦ с иммунологическими и биохимическими показателями крови у 36 больных с IgG ММ .

IgG	IgA	IgM	ОБ	β2М	κ	λ	κ/λ	конц PIg г/л	СРБ
IgG	1	-0,18041	0,043335	0,675455	0,552941	0,128725	0,065911	0,035271	0,937784	-0,3989
IgA	-0,18041	1	0,598196	-0,04814	-0,19868	0,18581	0,17655	0,039209	-0,28894	0,297521
IgM	0,043335	0,598196	1	-0,03111	0,019132	-0,12259	0,499807	-0,29747	-0,00858	0,249311
ОБ	0,675455	-0,04814	-0,03111	1	0,071556	0,190795	-0,09206	0,103347	0,711632	-0,6
B2-m	0,552941	-0,19868	0,019132	0,071556	1	0,070588	0,129412	0,017647	0,412088	-0,0055
κ	0,128725	0,18581	-0,12259	0,190795	0,070588	1	-0,53768	0,914146	0,110909	-0,37414
λ	0,065911	0,17655	0,499807	-0,09206	0,129412	-0,53768	1	-0,7775	0,102955	0,167813
κ/λ	0,035271	0,039209	-0,29747	0,103347	0,017647	0,914146	-0,7775	1	0,008469	-0,27235
PIg г/л	0,937784	-0,28894	-0,00858	0,711632	0,412088	0,110909	0,102955	0,008469	1	-0,57859
СРБ	-0,3989	0,297521	0,249311	-0,6	-0,0055	-0,37414	0,167813	-0,27235	-0,57859	1

Примечания: IgG, IgA, IgM - иммуноглобулины с интактной молекулой; ОБ - общий белок; в2М -в2-микроглобулин; к - свободная легкая цепь (к-изотип); Х - свободная легкая цепь (Х-изотип); к/Х - отношение СЛЦ; конц PIg г/л - концентрация парапротеина; СРБ - С-реактивный белок.

Таблица 2

Достоверность корреляций СЛЦ с иммунологическими и биохимическими показателями крови у 36 больных с IgG ММ .

	IgG	IgA	IgM	ОБ	B2-m	κ	λ	κ/λ	конц PIg г/л	СРБ
IgG		0,292365	0,801849	<0,05	0,02854	0,454331	0,702515	0,838183	<0,05	0,176931
IgA	0,292365		0,000117	0,790207	0,457778	0,277923	0,302993	0,820392	0,114912	0,320196
IgM	0,801849	0,000117		0,863755	0,945498	0,476282	0,001911	0,078076	0,963482	0,406457
ОБ	<0,05	0,790207	0,863755		0,799685	0,287518	0,610383	0,567098	<0,05	0,042359
B2-m	0,02854	0,457778	0,945498	0,799685		0,796678	0,632692	0,951973	0,163472	0,988865
κ	0,454331	0,277923	0,476282	0,287518	0,796678		0,00072	<0,05	0,552526	0,206948
λ	0,702515	0,302993	0,001911	0,610383	0,632692	0,00072		2,43Е-08	0,581539	0,581423
κ/λ	0,838183	0,820392	0,078076	0,567098	0,951973	<0,05	<0,05		0,963933	0,465333
PIg г/л	<0,05	0,114912	0,963482	<0,05	0,163472	0,552526	0,581539	0,963933		0,066317
СРБ	0,176931	0,320196	0,406457	0,042359	0,988865	0,206948	0,581423	0,465333	0,066317

Следует отметить достоверные значения корреляций ОБ и IgG (R 0,60; p <0,05). Достоверными были значения корреляций β2М и IgG (R 0,55; p=0,02). Концентрация PIg и IgG также характеризовалась высокой достоверностью (R 0,90; p <0,05). Поликлональные IgM и IgA характеризовались высокими значениями корреляций (R 0,60; p <0,05). Опухолевая СЛЦ λ и IgM при IgGλ ММ были связаны между собой достоверными корреляциями (R 0,50; p=0,001).

Концентрация PIg и ОБ были связаны достоверными значениями (R 0,70; p <0,05). Биохимический показатель СРБ был достоверно связан с концентрацией ОБ (R -0,60; p=0,04). Обратная зависимость была установлена между СЛЦ κ и λ (R -0,53; p=0,0007) и κ/λ-отношением и λ СЛЦ (R -0,70; p <0,05).

В таблицах 3 и 4 представлены значения корреляций и их достоверность между исследуемыми показателями у 12 больных с Bj ММ (Bjκ – 6; Bjλ – 6).

Таблица 3

Значения корреляций СЛЦ с иммунологическими и биохимическими показателями крови у 12 больных с Bj ММ .

	IgG	IgA	IgM	ОБ	B2-m	κ	λ	κ/λ	конц PIg г/л	СРБ
IgG	1	0,496503	-0,06294	0,714286	-1	-0,06993	0,356643	-0,29072	0,7	0,3
IgA	0,496503	1	0,566434	-0,03571	-0,5	0,29371	0,468531	-0,57443	-0,2	-0,1
IgM	-0,06294	0,566434	1	-0,39286	-0,5	-0,43357	0,097902	-0,3993	-0,9	-0,5
ОБ	0,714286	-0,03571	-0,39286	1		0,357143	-0,07143	0,126131	0,8
B2-m	-1	-0,5	-0,5		1	1	0,5	0,5
κ	-0,06993	0,29371	-0,43357	0,357143	1	1	-0,42657	0,679511	0,7	0,5
λ	0,356643	0,468531	0,097902	-0,07143	0,5	-0,42657	1	-0,87216	0,2	0,1
κ/λ	-0,29072	-0,57443	-0,3993	0,126131	0,5	0,679511	-0,87216	1	0,153897	0,410391
PIg г/л	0,7	-0,2	-0,9	0,8		0,7	0,2	0,153897	1
СРБ	0,3	-0,1	-0,5			0,5	0,1	0,410391		1

Таблица 4

Достоверность корреляций СЛЦ с иммунологическими и биохимическими показателями крови у 12 больных с Bj ММ .

	IgG	IgA	IgM	ОБ	B2-m	κ	λ	κ/λ	конц PIg г/л	СРБ
IgG		0,104138	0,851456	0,088095	0,333333	0,834618	0,255964	0,356686	0,233333	0,683333
IgA	0,104138		0,059053	0,963492	1	0,354539	0,127507	0,054075	0,783333	0,95
IgM	0,851456	0,059053		0,395635	1	0,161609	0,766437	0,19781	0,083333	0,45
ОБ	0,088095	0,963492	0,395635			0,444444	0,906349	0,8	0,133333	0,75
B2-m	0,333333	1	1			0,333333	1	1
κ	0,834618	0,354539	0,161609	0,444444	0,333333		0,168896	0,017895	0,233333	0,45
λ	0,255964	0,127507	0,766437	0,906349	1	0,168896		0,000434	0,783333	0,95
κ/λ	0,356686	0,054075	0,19781	0,8	1	0,017895	0,000434		0,833333	0,5
PIg г/л	0,233333	0,783333	0,083333	0,133333		0,233333	0,783333	0,833333
СРБ	0,683333	0,95	0,45	0,75		0,45	0,95	0,5

Среди исследуемых 12 больных у 6 диагностирована Bjκ и у 6 Bjλ ММ. При анализе корреляций установлено, что достаточно высокие и достоверные корреляции были получены при оценке κ/λ отношения СЛЦ и κ СЛЦ (R 0,70; p=0,02), а также при анализе κ/λ отношения СЛЦ и λ СЛЦ (R -0,80; p=0,0004). Отношение κ/λ СЛЦ было достоверно связано с поликлональным IgA (R -0,60; p=0,05). Поликлональные IgA и IgM также были связаны достоверными корреляциями (R 0,60; p=0,05).

В таблицах 5 и 6 представлены результаты и достоверность корреляций исследуемых показателей у 8 больных с IgA ММ. Среди них у 7 диагностирован IgA κ и у 1 IgA λ изотипы Pig.

Таблица 5

Значения корреляций СЛЦ с иммунологическими и биохимическими показателями крови у 8 больных с IgA ММ .

	IgG	IgA	IgM	ОБ	B2-m	κ	λ	κ/λ	конц PIg г/л	СРБ
IgG	1	0,496503	-0,06294	0,714286	-1	-0,06993	0,356643	-0,29072	0,7	0,3
IgA	0,496503	1	0,566434	-0,03571	-0,5	-0,29371	0,468531	-0,57443	-0,2	-0,1
IgM	-0,06294	0,566434	1	-0,39286	-0,5	-0,43357	0,097902	-0,3993	-0,9	-0,5
ОБ	0,714286	-0,03571	-0,39286	1		0,357143	-0,07143	0,126131	0,8	-0,4
B2-m	-1	-0,5	-0,5		1	1	0,5	0,5
κ	-0,06993	-0,29371	-0,43357	0,357143	1	1	-0,42657	0,679511	0,7	0,5
λ	0,356643	0,468531	0,097902	-0,07143	0,5	-0,42657	1	-0,87216	0,2	0,1
κ/λ	-0,29072	-0,57443	-0,3993	0,126131	0,5	0,679511	-0,87216	1	0,153897	0,410391
PIg г/л	0,7	-0,2	-0,9	0,8		0,7	0,2	0,153897	1
СРБ	0,3	-0,1	-0,5	-0,4		0,5	0,1	0,410391		1

Таблица 6

Достоверность корреляций СЛЦ с иммунологическими и биохимическими показателями крови у 8 больных с IgA ММ .

	IgG	IgA	IgM	ОБ	κ	λ	κ/λ	конц PIg г/л
IgG		0,945337	0,399603	0,372222	0,071726	0,345833	0,03254	0,616667
IgA	0,945337		0,26746	0,285714	0,752034	0,500794	0,793006	0,027778
IgM	0,399603	0,26746
ОБ	0,372222	0,285714	0,822222		0,852381	0,892063	0,892381	0,397222
κ	0,071726	0,752034	0,619097	0,852381		0,083085	0,000397	0,155556
λ	0,345833	0,500794	0,536409	0,892063	0,083085		0,132292	0,75
κ/λ	0,03254	0,793006	0,500794	0,892381	0,000397	0,132292		0,155566
PIg г/л	0,616667	0,027778	0,511111	0,397222	0,155556	0,75	0,155566

Примечания: IgG, IgA, IgM - иммуноглобулины с интактной молекулой; ОБ - общий белок; к -свободная легкая цепь (к-изотип); Х - свободная легкая цепь (Х-изотип); к/Х - отношение СЛЦ; конц PIg г/л - концентрация парапротеина.

Следует отметить высокие и достоверные корреляции между κ/λ отношением СЛЦ и поликлональным IgG (R -0,76; p=0,03), а также отношением СЛЦ κ/λ и СЛЦ κ изотипа (R 0,97; p=0,02). Концентрация PIg и клонального IgA имели достоверную взаимосвязь (R 0,89; p=0,02).

Обсуждение

У 56 больных с ММ проведен корреляционный анализ значений циркулирующих СЛЦ и κ/λ отношений с иммунологическими и биохимическими показателями крови, включающими концентрации ОБ, PIg, иммуноглобулинов 3 классов (IgG, IgA, IgM), β2M, СРБ. При IgG ММ (IgG κ – 26, IgG λ – 10) корреляции κ/λ отношения и κ СЛЦ свидетельствуют об их клональном характере. Обратная зависимость между концентрациями СЛЦ κ и λ свидетельствует о супрессивном влиянии опухоли на нормальные ан-тителопродуценты. Важна взаимосвязь между СЛЦ λ и поликлональным IgM, которая свидетельствует о том, что при IgG λ ММ СЛЦ λ опухолевого фенотипа активирует поликлональные IgM антителопроду- центы. Значения поликлональных IgM и IgA находятся в прямой зависимости, что свидетельствует об их синхронных колебаниях, связанных со стимулирующим или иммуносупрессивным влиянием на антителопродуценты. Установленная положительная корреляция между IgG и β2M свидетельствует о том, что важный прогностический маркер для ММ, каким является β2М, связан с PIgG. Концентрации PIg и IgG находились в прямой зависимости. Аналогичные результаты были получены при анализе ОБ и IgG, и ОБ и PIg. Обратная зависимость между значениями ОБ и СРБ связана с высокой активностью и интоксикацией основного заболевания, влияющих на синтез альбумина и СРБ печенью. Это подтверждается положительными корреляциями ОБ и PIg.

Анализ корреляций исследуемых иммунологических и биохимических показателей крови при Bj ММ (n=12; κ – 6, λ – 6) выявил значимые связи между κ/λ СЛЦ и κ СЛЦ и отрицательные значения корреляций κ/λ отношения и λ СЛЦ. Эти показатели были связаны с изотипами Bj ММ (κ или λ), а также указывали на иммуносупрессию клоновыми продуцентами СЛЦ на нормальные продуценты СЛЦ κ и λ изотипов соответственно. Установленная отрицательная корреляция между отношением κ/λ СЛЦ и поликлональным IgA свидетельствует о супрессивном влиянии опухолевого клона κ изотипа на нормальные IgA антителопродуценты. Поликлональные IgA и IgM находились в прямой зависимости, и изменение их концентраций было связано с колебаниями супрессивного влияния опухоли на гуморальный иммунитет. При изучении иммунологических и биохимических показателей крови у больных IgA ММ (κ – 7, λ – 1) установлена обратная зависимость между κ/λ отношением и поликлональным IgG. Это сви- детельствует о супрессивном влиянии опухоли на поликлональные (нормальные) IgG антителопро-дуценты, что имеет большое значение при обсуждении иммунодефицитного синдрома при ММ, так как IgG изотип является доминирующим среди других изотипов Ig. Положительные корреляции PIg и IgA свидетельствует о том, что PIg представлены IgA изотипом. Положительные корреляции κ/λ и κ СЛЦ свидетельствуют о преобладании концентраций κ СЛЦ в κ/λ отношении.

Заключение

Таким образом, проведенный корреляционный анализ СЛЦ, а также иммунологических и биохимических показателей крови показал иммуносупрессивное влияние опухоли, определяемое по концентрации СЛЦ, на нормальные антителопродуценты при ММ. Важный прогностический маркер при ММ, каким является β2М, был связан с PIg при IgG ММ. Обратная зависимость между ОБ, который связан с PIg при IgG ММ и СРБ обусловлена снижением синтеза печенью альбумина и СРБ.

Список литературы Корреляции свободных легких цепей иммуноглобулинов с биохимическими и иммунологическими показателями крови у больных с множественной миеломой

Голенков А.А. Барышников А.Ю., Караулов А.В., Митина Т.А. Лечение множественной миеломы; Москва, 2009, 125 с.
Голенков А.К., Трифонова Е.В., Митина Т.А., Катаева Е.В. и др. Сравнительный анализ концентрации свободных легких цепей иммуноглобулинов сыворотки крови и спинномозговой жидкости при множественной миеломе, осложненной опухолевой миелорадикулопатией // Гематология, трансфузиология. Восточная Европа. - 2016. - Т. 2, №1. - С.24-31.
Бессмельцев С.С. Множественная миелома: диагностика и терапия (часть 1) // Вестник гематологии. - 2922. - Т.XVIII, №2. - С. 4-26.
Martin W, Abraham R, Shanafelt T, et al. Serum-free light chain-a new biomarker for patients with B-cell non-Hodgkin lymphoma and chronic lymphocytic leukemia // Transl Res. - 2007. - Vol. 149, N 4. - P. 231-235.
Maurer MJ, Cerhan JR, Katzmann JA, et al. Monoclonal and polyclonal serum free light chains and clinical outcome in chronic lymphocytic leukemia // Blood. - 2011. - Vil. 118, N 10. - P. 2821-2826.
Голенков А.К., Митина Т.А., Клинушкина Е.Ф., Катаева Е.В. и др. Прогностическое значение поликлональных свободных легких цепей иммуноглобулинов сыворотки крови у больных хроническим лимфолейкозом // Вестник гематологии. - 2022. - Т. XVIII, №2. - С 27-33.

Еще

Статья научная