Масс-спектрометрическое определение энзиматических свойств протеолитических ферментов на примере аспартатной протеиназы из Trichoderma viride
Автор: Новиков А.В., Савельева Н.В., Симанкова А.Н., Краснов Н.В., Миргородская О.А.
Журнал: Научное приборостроение @nauchnoe-priborostroenie
Рубрика: Оригинальные статьи
Статья в выпуске: 1 т.14, 2004 года.
Бесплатный доступ
Продемонстрирована возможность использования масс-спектрометрии для определения специфических сайтов разрывов в пептидных и белковых субстратах, а также для определения количественных характеристик гидролиза для аспартатной протеиназы из Trichoderma viride. Изучена зависимость от рН. Определены кинетические параметры для отдельных наиболее быстро гидролизуемых связей. Показано, что результаты, полученные с помощью масс-спектрометрии, совпадают с данными, полученными с использованием ВЭЖХ.
Короткий адрес: https://sciup.org/14264321
IDR: 14264321 | УДК: 543.51:
Determination of specificity of proteinase from Trichoderma viride by mass spectrometry
The possibility of using mass spectrometry to determine specific sites of hydrolysis of peptide and protein sequence was demonstrated. The types of digested bonds, scheme of hydrolysis, kinetic parameters for most easily hydrolyzable bonds were determined. The effect of pH on the initial rates of SPN hydrolysis was appreciated. The agreement of data from mass spectrometry and HPLC was demonstrated.
Список литературы Масс-спектрометрическое определение энзиматических свойств протеолитических ферментов на примере аспартатной протеиназы из Trichoderma viride
- Симанкова А.Н. и др. Грибная аспартатная протеиназа из Trichoderma viride. Специфичность при гидролизе олигопептидов//Биоорган. химия. 1998. Т. 24. С. 822-830.
- Миргородская О.А. и др. Расщепление желудочным соком человека аналогов люлиберина, содержащих остаток D-аланина//Биоорган. химия. 1997. Т. 23. С. 611-615.
- Нейроэндокринология/Под ред. чл.-корр. РАН А.Л. Поленова. СПб., 1994. Ч. 2. С. 89-106.
- Антонов В.К. Химия протеолиза. М.: Наука, 1983.
- Mirgorodskaya O.A. et al. Quantitation of peptides and proteins by matrix-assisted laser desorption/ionisation mass spectrometry using 18O-labeled internal standards//Rapid Commun. Mass Spectrom. 2000. V. 14. P. 1226-1232.
- Новиков А.В. и др. Использование ESI-MS и изотопно меченных аминокислотных стандартов для определения концентрации белков//Научное приборостроение. 2002. T. 12, № 4. C. 70-80.
- Ichishima E.//Meth. Enzym. 1970. V. 19. P. 397-406.
- Гайда А.В., Остерман А.П., Руденская Г.Н., Степанов В.М.//Биохимия. 1981. Т. 46. С. 181-189.
