Масс-спектрометрическое определение энзиматических свойств протеолитических ферментов на примере аспартатной протеиназы из Trichoderma viride

Новиков А.В. Савельева Н.В. Симанкова А.Н. Краснов Н.В. Миргородская О.А.

Журнал: Научное приборостроение @nauchnoe-priborostroenie

Рубрика: Оригинальные статьи

Статья в выпуске: 1 т.14, 2004 года.

Бесплатный доступ

Продемонстрирована возможность использования масс-спектрометрии для определения специфических сайтов разрывов в пептидных и белковых субстратах, а также для определения количественных характеристик гидролиза для аспартатной протеиназы из Trichoderma viride. Изучена зависимость от рН. Определены кинетические параметры для отдельных наиболее быстро гидролизуемых связей. Показано, что результаты, полученные с помощью масс-спектрометрии, совпадают с данными, полученными с использованием ВЭЖХ.

Похожие статьи в разделе Аналитическая химия

Оценка емкости масс-спектров высокого разрешения при анализе сложных смесей
Оценка емкости масс-спектров высокого разрешения при анализе сложных смесей

Лютвинский Я.И., Макаров В.В., Козлов Б.Н., Подольская Е.П., Труфанов А.С., Апацкая М.В., Краснов И.А., Краснов Н.В., Веренчиков А.Н.

Комбинация подходов точной массово-временной метки и мечения изотопом кислорода 18O для количественного анализа протеома мочи человека
Комбинация подходов точной массово-временной метки и мечения изотопом кислорода 18O для количественного анализа протеома мочи человека

Агрон И.А., Автономов Д.М., Кононихин А.С., Попов И.А., Мельник С.А., Мошковский С.А., Николаев Е.Н.

Эффективность протеаз панкреатина и трипсина при ферментативном гидролизе коллагена
Эффективность протеаз панкреатина и трипсина при ферментативном гидролизе коллагена

Семенычева Людмила Леонидовна, Егорихина Марфа Николаевна, Часова Виктория Олеговна, Валетова Наталья Борисовна, Митин Александр Вячеславович, Кузнецова Юлия Леонидовна

Кинетические закономерности ферментативного гидролиза белков тканей гидробионтов: эффект способа внесения фермента
Кинетические закономерности ферментативного гидролиза белков тканей гидробионтов: эффект способа внесения фермента

Новиков Виталий Юрьевич, Деркач Светлана Ростиславовна, Широнина Анастасия Юрьевна, Мухин Вячеслав Анатольевич

Масс-спектрометрия с мягкими методами ионизации в протеомном анализе (обзор)
Масс-спектрометрия с мягкими методами ионизации в протеомном анализе (обзор)

Краснов Н.В., Лютвинский Я.И., Подольская Екатерина Петровна

Короткий адрес: https://sciup.org/14264321

IDS: 14264321   |   УДК: 543.51:

Determination of specificity of proteinase from Trichoderma viride by mass spectrometry

The possibility of using mass spectrometry to determine specific sites of hydrolysis of peptide and protein sequence was demonstrated. The types of digested bonds, scheme of hydrolysis, kinetic parameters for most easily hydrolyzable bonds were determined. The effect of pH on the initial rates of SPN hydrolysis was appreciated. The agreement of data from mass spectrometry and HPLC was demonstrated.

Список литературы Масс-спектрометрическое определение энзиматических свойств протеолитических ферментов на примере аспартатной протеиназы из Trichoderma viride

  • Симанкова А.Н. и др. Грибная аспартатная протеиназа из Trichoderma viride. Специфичность при гидролизе олигопептидов//Биоорган. химия. 1998. Т. 24. С. 822-830.
  • Миргородская О.А. и др. Расщепление желудочным соком человека аналогов люлиберина, содержащих остаток D-аланина//Биоорган. химия. 1997. Т. 23. С. 611-615.
  • Нейроэндокринология/Под ред. чл.-корр. РАН А.Л. Поленова. СПб., 1994. Ч. 2. С. 89-106.
  • Антонов В.К. Химия протеолиза. М.: Наука, 1983.
  • Mirgorodskaya O.A. et al. Quantitation of peptides and proteins by matrix-assisted laser desorption/ionisation mass spectrometry using 18O-labeled internal standards//Rapid Commun. Mass Spectrom. 2000. V. 14. P. 1226-1232.
  • Новиков А.В. и др. Использование ESI-MS и изотопно меченных аминокислотных стандартов для определения концентрации белков//Научное приборостроение. 2002. T. 12, № 4. C. 70-80.
  • Ichishima E.//Meth. Enzym. 1970. V. 19. P. 397-406.
  • Гайда А.В., Остерман А.П., Руденская Г.Н., Степанов В.М.//Биохимия. 1981. Т. 46. С. 181-189.