Неспецифическая резистентность у новорожденных телят под влиянием тимогена

Одним из резервов увеличения продуктивности молодняка крупного рогатого скота является повышение резистентности, особенно в условиях несбалансированного кормления коров-матерей и нарушений технологии содержания. Для этих целей предложено множество препаратов, однако преимущество имеют природные вещества, участвующие в процессах естественной регуляции жизнедеятельности организма.

Проведенными ранее исследованиями установлено участие ряда аминокислот в регуляции процессов пищеварения, межуточного обмена и неспецифической резистентности у телят и отработаны способы применения препаратов аминокислот для этих целей. У новорожденных телят аминокислоты глицин, глутамат, таурин, орнитин, введенные перорально или парентерально, повышают интенсивность всасывания иммуноглобулинов молозива в кишечнике, ускоряют становление естественной резистентности [3,12,13].

В регуляции неспецифической резистентности и иммунитета участвуют также производные аминокислот, в том числе пептиды [4,14,15].

Для проведения исследований нами был выбран дипептид тимоген (глутамил-триптофан). Глутаминовая кислота, входящая в его состав, относится к группе аминокислот, способных ускорять дифференцировку предшественников Т-клеток в Т-лимфоциты и усиливать ответ на гетерологические эритроциты in vitro на спленоцитах и в опытах на лабораторных животных [2]. Тимоген стимулировал гуморальный иммунный ответ у тимэктомированных мышей, увеличивал содержание циклических нуклеотидов в спленоцитах, усиливал хемотаксис и фагоцитоз нейтрофилов, стимулировал регенерацию печени у крыс после частичной гепатэктомии и при экспериментальном циррозе.

Препарат применяют для стимулирования регенерации тканей при воспалительных заболеваниях, трофических нарушениях, поражениях кожи и слизистых оболочек, последствиях воздействия термических и химических факторов, сопровождающихся нарушением репаративных процессов [10,16].

Материалы и методы. Работа выполнена в весенне-летний период (май-август) 2015 года на молочно-товарной ферме сельскохозяйственного производственного кооператива «Мир»

Дальнеконстантиновского района

Нижегородской области. Объектами исследования были отобранные по принципу пар аналогов 16 новорожденных телят черно-пестрой породы, которые были разделены на 2 группы – контрольную и опытную. Телятам опытной группы Тимоген инъецировали внутримышечно двукратно по 100 мкг в первый час после рождения и через 4-5 часов. Животным контрольной группы вводили подкожно физиологический раствор хлористого натрия по той же схеме. Пробы крови отбирали через 1 и 10 суток после рождения.

У телят каждой группы в ходе проведения научно-хозяйственного опыта определяли следующие показатели:

• -    Гематологические – подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов пробирочным методом в камере Горяева, количество гемоглобина по методу Сали, выведение лейкоцитарной формулы путем

подсчёта в мазках крови лейкоцитов разных видов, окрашенных по Романовскому-Гимза.

• -    Биохимические – исследование в сыворотке крови животных уровня общего белка, мочевины и глюкозы на биохимическом анализаторе AU480 Olympus, иммуноглобулинов на анализаторе Minicap, Sebia.

• -    Иммунологические – определение бактерицидной активности сыворотки крови – с применением тест культуры Staphylococcus epidermidis в модификации (Смирнова, Кузьмина, 1966); лизоцимной активности – с использованием тест культуры Micrococcus lysodeikticus в модификации УНИИЭВ.

• -    Оценку достоверности эффектов проводили методом парных сравнений [1].

Анализы выполнялись в лаборатории «Гемохелп», на кафедре «Анатомия, хирургия и внутренние незаразные болезни» Нижегородской ГСХА.

Таблица 1 - Биохимические показатели крови телят при применении Тимогена

Показатели	Возраст 1 сутки		Возраст 10 суток
	Контроль	Опыт (Тимоген)	Контроль	Опыт (Тимоген)
Иммуноглобулины, мг/мл	12,5±0,7	17,2±1,3*	13,8±1,1	17,1±1,0*
Общий белок, %	5,53±0,49	6,41±0,47	6,48±0,53	6,79±0,55
Гемоглобин, г/л	96,7±7,8	99,8±8,2	93,4±6,5	96,7±5,5
Мочевина, ммоль/л	4,61±0,35	4,92±0,27	3,91±0,32	3,78±0,17
Глюкоза, ммоль/л	5,82±0,41	6,29±0,32	5,44±0,39	5,42±0,23

Примечание: здесь и далее в таблицах: *P<0.05 по парному критерию при сравнении с контролем

Результаты исследований .

Результаты, полученные в ходе опыта, показали, что через сутки после внутримышечного введения новорожденным телятам Тимогена уровень иммуноглобулинов в крови у них был на 37,6% (P<0.05) выше, чем у контрольных животных (табл. 1), что вероятно, связано с изменением интенсивности всасывания этих белков из молозива. Известно, что поступление иммуноглобулинов молозива осуществляется у новорожденных телят в основном в первые сутки после рождения и особенно – в первые часы посредством пиноцитоза. Повышенный уровень иммуноглобулинов в крови телят опытной группы сохранился и через 10 дней после введения препарата (+23,9%, P<0.05).

Некоторое увеличение концентрации иммуноглобулинов в крови телят контрольной группы на 10 день опыта (+10,4%) может быть связано с тем, что через неделю после рождения у телят слизистая оболочка тонкого кишечника способна синтезировать т.н. секреторные защитные иммуноглобулины [5].

Одновременно у телят опытной группы отмечена тенденция повышения в крови уровня общего белка, гемоглобина и глюкозы. При втором анализе крови телят различия наблюдались лишь по содержанию общего белка и гемоглобина, при некотором снижении концентрации мочевины и глюкозы.

У телят опытной группы, через 1 сутки после рождения отмечен более высокий уровень лейкоцитов в крови по сравнению с интактными животными (+26,2%, Р<0,05). Показатели крови телят на фоне применения Тимогена (табл. 2).

Выявленные различия морфологических показателей крови у животных опытных групп нашли отражение в показателях неспецифической резистентности. Фагоцитарная активность крови у телят опытной группы на 1 сутки была выше на 13,4% (P<0,05%), чем в контроле, что обусловлено в значительной мере функцией нейтрофилов. Увеличение фагоцитарного индекса отражает повышение и активности фагоцитарных клеток крови.

Таблица 2 - Морфологические показатели крови телят на фоне применения Тимогена

Показатели	Возраст 1 сутки		Возраст 10 суток
	Контроль	Опыт (Тимоген)	Контроль	Опыт (Тимоген)
Эритроциты, млн/мкл	7,72±0,27	8,83±0,23*	8,05±0,06	8,17±0,05
Лейкоциты, тыс/мкл	8,54±0,63	10,78±0,57*	8,79±0,31	9,83±0,65*
Лейкоформула, %:
палочкоядерные нейтрофилы	2,1	1,4	1,8	1,2
сегментоядерные нейтрофилы	37,3±2,6	40,1±3,4	42,6±3,0	41,8±2,8
общее      количество нейтрофилов, тыс/мкл	3,61	4,65	4,2	4,5
эозинофилы	1,1	1,3	0,8	1,1
базофилы	2,0	1,6	1,7	1,2
моноциты	7,8	7,3	8,3	7,5
лимфоциты	49,7±2,5	48,3±3,4	45,8±2,9	46,2±3,3
общее      количество лимфоцитов, тыс/мкл	4,7	5,81*	4,52	4,98
Соотношения лейкоцитов:
лимфоциты/сегменто-ядерные нейтрофилы	1,33	1,2	1,08	1,19
нейтрофилы/лимфоциты	0,79	0,86	0,97	0,86

Бактерицидная активность сыворотки крови, показывающая суммарное действие гуморального и клеточного звеньев защиты, была выше у телят опытной группы на 12,5 % (P<0,05%), чем в контроле на 1 сутки.

При повторном исследовании крови по отмеченным показателям на 10 сутки после начала опыта различия с контрольной группой у опытных животных несколько сгладились. Выровнялся уровень лейкоцитов в основном за счет увеличения количества сегментоядерных нейтрофилов, но при этом снизилось содержание лимфоцитов, что привело к изменению показателей неспецифической реактивности.

Стимуляция неспецифической резистентности телят введением подкожно Тимогена способствовала повышению прироста живой массы телят на 13,7 % в сравнении с контрольной группой (457 г/сут. и 520 в контроле и опыте) в молочный период выращивания за 2 месяца наблюдения.

Заключение . Полученные данные позволяют уточнить некоторые стороны регуляции формирования иммунитета и становления неспецифической резистентности у новорожденных телят, что должно быть учтено при разработке физиологически обоснованных способов иммуностимуляции в этот период, часто сопровождающийся иммунодефицитами и болезнями инфекционной природы.

Проведен опыт на новорожденных телятах с подкожным введением Тимогена с целью стимуляции всасывания колостральных иммуноглобулинов и становления неспецифической резистентности. Применение данного препарата повысило уровень лейкоцитов, белка и иммуноглобулинов в крови новорожденных телят, что дает основание считать, что тимус у новорожденных телят участвует в регуляции всасывания иммуноглобулинов и других важных компонентов молозива. Тимоген стимулировал становление неспецифической резистентности, что проявилось в увеличении показателей фагоцитарной и бактерицидной активности крови.

Повышение показателей неспецифической резистентности телят сопровождалось увеличением прироста живой массы в молочный период выращивания.