Особенности структуропостроения сыворотки крови при гастроэнтерите телят

Введение. В последние годы, анализируя опыт развития овцеводства, можно отметить, что конкурентоспособность этой отрасли во многом зависит от полного раскрытия генетического потенциала мясной продуктивности овец. С ростом спроса и цен в течение последних 15-20 лет возникла необходимость не только в повышении мясной продуктивности овец, но и в улучшении качества баранины. Мясо различных пород овец варьируется по химическому составу и энергетической ценности [3-5,7]. Биологическая ценность мяса определяется аминокислотным составом белка. Для определения пищевой ценности баранины важно знать о качественном составе белков в мясе. Для этой цели определяется аминокислотный состав мяса, устанавливают содержание аминокислот - заменимых и незаменимых [1,2,4,6].

Одним из методов оценки нарушений гомеостаза является фацийная диагностика - морфологическое исследование твердофазных структур, которые образуются после высыхания капель биологических жидкостей. Под фацией понимают твердую пленку высохшей капли, чья структура изучается с помощью световой микроскопии. Установлено, что структурная организация фации определяется биохимическим составом исходной жидкости, и в первую очередь, ее белковыми компонентами [1, с.375].

Как отмечают В.В. Шабалин и соавторы [2,с. 121-124], самоорганизация, понимаемая как непроизвольный процесс формирования и усложнения высокоупорядоченных структур, является определяющей чертой биологических систем.

Методы кристаллографии нашли широкое применение в лабораторной диагностике и востребованы в различных областях медицины. Их ценность заключается в возможности ранней диагностики патологических состояний еще на доклиническом этапе, на уровне молекулярных нарушений. Это, в свою очередь, позволяет своевременно назначать адекватные лечебнопрофилактические мероприятия и объективно оценивать их эффективность [3, 168-173].

По мнению И.И. Калюжного и соавторов [4, с.10-13], эффективная защита молодняка от патологий, в частности от наиболее распространенных гастроэнтеритов, напрямую зависит от двух ключевых условий: детального знания симптоматики и непрерывной модернизации методов ранней диагностики. Подчеркивается, что именно точная и своевременная постановка диагноза позволяет существенно снизить уровень заболеваемости.

В структуре заболеваемости молодняка сельскохозяйственных животных превалируют патологии респираторной и пищеварительной систем. Особенно высокая их распространенность наблюдается у животных в ранний и средний постнатальный периоды [5, с.390-394].

В работах В.П. Иванюка и соавторов [6, с.45-49] была установлена связь между возникновением гастроэнтеритов у молодняка и несбалансированностью рациона стельных коров. В частности, дисбаланс незаменимых аминокислот в корме приводит к изменению общего содержания белка в сыворотке крови, а дефицит кальция и витамина D провоцирует развитие гипокальциемии.

По данным Ю.В. Калинкиной [7, с.24], острые патологии желудочнокишечного тракта превалируют среди неинфекционных заболеваний телят. Проблема усугубляется критически высоким уровнем отхода молодняка: 7080% всей смертности приходится на ранний неонатальный период (первые 2-3 недели).

Цель исследования - выявить особенности патологических структурных элементов в сыворотке крови телят, больных гастроэнтеритом.

Задачи исследований – на данном этапе основная задача исследования состояла в изучении фации сыворотки крови и их патологических структур у телят больных гастроэнтеритом.

Материалы и методы . Экспериментальная работа выполнялась на базе учебно-опытного хозяйства «Степановский» (Оренбургский район). В качестве объекта исследования был задействован молодняк красной степной породы месячного возраста. Из числа телят, имеющих клиническую манифестацию гастроэнтерита, произвели формирование двух опытных групп, каждая из которых включала 10 голов. На начальном этапе эксперимента была проведена оценка клинического статуса животных. У телят отмечалось обострение хронической формы гастроэнтерита, которое сопровождалось характерными симптомами: диареей, снижением аппетита, потерей массы тела и другими.

Материалом для исследования служила венозная кровь, полученная от больных телят. Забор крови проводили в утренние часы до кормления (натощак) путем венепункции с использованием вакуумных систем. В качестве основного аналитического метода был применен метод клиновидной дегидратации. Суть данного подхода заключается в получении стандартизированной высушенной пленки (фации), обладающей устойчивой морфологической картиной для последующего микроскопического исследования.

Процедура получения фаций сыворотки крови (ФСК) методом клиновидной дегидратации выполнялась следующим образом: на стандартное предметное стекло наносили 0,02 мл сыворотки (СК). Далее образцы высушивали в течение 18-24 часов в строго контролируемых условиях: при температуре 25 °C и относительной влажности 65-70%.

Изучение морфологических особенностей структурообразующих элементов фаций выполняли посредством микроскопа Levenhuk D870T

(режимы увеличения ×10, ×40). Визуальную фиксацию изображений проводили с использованием цифровой камеры C800NG. Для обеспечения повторяемости (воспроизводимости) [9, с.194-197] от каждого исходного сывороточного образца изготавливали 2-3 препарата (предметных стекла), нанося на каждое по три капли [9, с.194-197].

Обработка полученных данных осуществлялась в пакете прикладных программ Statistica 10.0.

Результаты и обсуждения. Фация, представляющая собой дегидратированную каплю биологической жидкости, может рассматриваться как ее макроскопический «портрет». В этой структуре находят отражение физикохимические параметры исходной жидкости, ее компонентный состав и концентрация растворённых веществ [10.с.430-434].

Методом клиновидной дегидратации был выполнен анализ структурообразующих элементов сыворотки крови у телят, страдающих гастроэнтеритом.

Радиальный тип фации традиционно используется как нормативный показатель при исследовании исходной фации сыворотки. Частично радиальный тип фации, демонстрирующий высокую упорядоченность ключевых структурных элементов (например, двойная фация, как показано на рисунке 1), может рассматриваться как вариант нормы.

Рисунок 1 – Фрагмент фации сыворотки крови больного теленка: частичнорадиальный тип; а - двойная фация, ув. х 10

Токсические бляшки идентифицируются в исходной фации как маркеры хронической интоксикации. Они представляют собой округлые образования, варьирующиеся по размеру от мелкого до крупного (рисунок 2). Ключевое отличие от токсического дождя заключается в их более значительном размере и выраженной выпуклости.

Степень выраженности данного маркёра бывает различной, от единичных до многочисленных токсических бляшек, особенно в краевой зоне двойной фации.

Если сыворотка крови является однородной, то бляшки не образуются. Состояние интоксикации приводит к перегрузке молекул альбумина токсинами, вследствие чего на их поверхности аккумулируется множество разнообразных компонентов. Данный процесс стимулирует повышенную агрегацию альбумина и, как следствие, способствует более выраженному расслоению раствора на две фазы. После устранения интоксикации токсические бляшки становятся менее выраженными. В дальнейшем по мере выведения токсических продуктов из организма, они полностью исчезают.

Рисунок 2 – Фрагмент фации сыворотки крови больного теленка: частично радиальный тип; а - токсическая бляшка, ув. x 40.

В последующем токсические бляшки могут сливаться в более крупные структуры, образуя двойную фацию.

Такая картина так же может наблюдаться при тяжелых стадиях интоксикации взрослых животных.

Структуры типа «лист» выступают в качестве маркеров склеротических изменений кровеносных сосудов. Их появление обусловлено вертикальным перераспределением специфических фракций сывороточных белков (рисунок 3). Наблюдаемые изменения указывают на негативную динамику патологического процесса. Данное прогрессирование ассоциировано с развитием интоксикации, гипоксии, ишемии и диспротеинемии в организме животных.

Данный механизм приводит к тому, что на поверхность фации мигрируют молекулы наиболее активных белков. В процессе дегидратации эти белки плотно сворачиваются, вызывая стягивание и уплотнение верхних слоев соответствующих зон.

Рисунок 3 - Фрагмент фации сыворотки крови больного теленка: частично радиальный тип; а - структура типа «лист», ув. x 40.

Степень    выраженности    склеротических    изменений    прямо пропорциональна отношению поперечного размера структуры «лист» к ее продольному размеру.

Образование широких трещин (рисунок 4) обусловлено маркером, указывающим на дегидратацию организма. При хроническом обезвоживании, вызванном нарушением всасываемости воды в толстой кишке у пациентов с гастроэнтеритом, определенная доля клеток продуцирует белковые молекулы с аномально высокой гидрофильностью. Следствием этого процесса является формирование неравномерных трещин в фациях сыворотки крови, что служит специфическим диагностическим признаком данного патологического состояния.

Рисунок 4 - Фрагмент суточной фации сыворотки крови больного теленка: частично радиальный тип; а - широкая неравномерная трещина; б -воронкообразные структуры в краевой зоне, ув. x 40.

Высокое напряжение функциональных систем и защитных механизмов морфологически проявляется в виде «воронок» (рисунок 4). Данные элементы визуализируются как светлые, однородные, вытянутые области, близкие к

Заключение. На основании полученных данных установлено, что патологические процессы у больных телят приводят к модификациям молекулярной организации сыворотки крови, которые поддаются визуализации в форме изменений дегидративных фаций (капель).

Обнаруженные фациальные паттерны выступают индикаторами прогрессирующего заболевания, сопряженного с интоксикацией, ишемией, диспротеинемией и перенапряжением механизмов гомеостатической адаптации. Идентифицированы следующие ключевые патоморфологические маркеры: сочетание двойной фации и токсической бляшки, структуры типа «лист», а также наличие широких трещин и «воронок».