Особенности естественной резистентности и физиолого-биохимического статуса у телят с признаками диареи

Оценка естественной резистентности у продуктивных животных продолжает оставаться актуальной проблемой в ветеринарной медицине [1, 2, 3]. Это связано с тем, что резистентность животного организма зависит от многих факторов, которые в условиях интенсификации животноводства вызывают напряжение функций органов и их систем, что отражается и на активности защитных реакций организма [4, 5, 6, 7]. Кроме того, изучение состояния естественной резистентности крупного рогатого скота может быть направлено на поиски путей повышения племенной ценности животных и своевременную коррекцию ряда патологических состояний [7, 8, 9, 10].

Известно, что при любом негативном воздействии на организм, в нем происходит изменение уровня различных показателей крови, отражающих работу гомеостатических систем [11]. При этом появляются сдвиги физиологических констант и меняется структура функциональных связей, в том числе и в механизмах, обеспечивающих естественную резистентность организма [12, 13, 14, 15]. Так, например, лизоцимная и бактерицидная активности крови зависят от количества нейтрофилов, в частности, с увеличением количества нейтрофильных гранулоцитов повышаются лизоцимная и бактерицидная активности в сыворотке крови коров.

В то же время любое воздействие патологических факторов на организм приводит к изменениям активности некоторых параметров системы регулирующей агрегатное состояние крови [16]. Наиболее быстро реагируют плазменные факторы, часть из которых относится к белкам острой фазы [17, 18].

Все компоненты, участвующие в формировании естественной резистентности у животных, взаимодействуют с другими структурами, в связи с чем определенный интерес представляет корреляционный анализ этих показателей в норме и при патологии [19, 20, 21].

Цель работы: изучить активность и провести корреляционный анализ между показателями естественной резистентности, рядом морфо-биохимических и гемо-стазиологических показателей у телят черно-пестрой породы с расстройствами функций желудочно-кишечного канала, сопровождающимися диарейным синдромом.

Материалы и методы исследования. Работа выполнена на факультете ветеринарной медицины и биотехнологий Вологодской ГМХА имени Н.В. Верещагина. Научно-хозяйственный опыт выполняли на базе хозяйства СХПК «Ильюшинский» Вологодского района на телятах черно-пестрой породы в 2017-2018 гг.

Опытных животных разделили на две группы: 1 группа ‒ клинически здоровые телята в возрасте 10-30 дней (n=10), 2 группа ‒ телята с признаками диареи в возрасте 10-30 дней (n=10). Подбор животных для проведения опыта осуществляли методом сбалансированных групп.

Кровь для исследования брали из яремной вены в три пробирки: для гематологического исследования – в пробирки с ЭДТА К2 (фиолетовая крышка), для биохимических исследований – в пробирки с активатором свертывания (красная крышка), для определения коагулограммы и показателей естественной резистентности – в пробирки с с цитратом натрия 3,8% (голубая крышка).

Морфологические показатели определяли по цельной стабилизированной крови на автоматическом гематологическом анализаторе Exigo-17 производства Boule Medical A.B. (Швеция).

Биохимические показатели определяли по сыворотке крови на полуавтомати- ческом анализаторе Биалаб-100 производства ООО «Бианалитика» (Россия).

Гемостазиологические показатели (фибриноген /ФБ/, активированное частичное тромбопластиновое время /АЧТВ/, протромбиновое время /ПВ/, тромбиновое время /ТВ/) определяли в бедной тромбоцитами плазме на одноканальном коагу-лометре Trombostat производства Behnk Elektronik (Германия).

Для оценки естественной резистентности организма использовали цитратную плазму, в которой определяли поглотительную активность нейтрофилов (фагоцитарная активность /ФА/, фагоцитарный индекс /ФИ/, фагоцитарная емкость /ФЕ/, фагоцитарное число /ФЧ/) и состояние гуморального звена неспецифической защиты по показателям бактерицидной активности сыворотки крови /БАСК/ и лизо-цимной активности сыворотки крови /ЛАСК/.

Полученные результаты исследования обрабатывали с помощью программного пакета MicrosoftExcel и Statistica 6.1. Значения полученных результатов отражены в форме средней величины и стандартной ошибки средней (M±m). Сравнение данных проводилось с применением U-критерия Манна-Уитни для независимых выборок. Результаты исследования со значением вероятности допущения альфа-ошибки, равные или менее 5% (р<0,05), расценивались как статистически значимые.

Качественную интерпретацию силы связи между показателями крови выполняли по полученному значению R на основе шкалы Чеддока (учитывались корреляционные связи, где R≥0,7).

Результаты исследования. Проведение общего анализа крови дает возможность оценить состояние организма в данный момент времени [8, 10]. Морфологические показатели крови у телят опытных групп представлены в таблице 1 .

Таблица 1 ‒ Морфологические показатели крови телят опытных групп

Показатели                        1 группа                2 группа

Эритроциты, 1012/л	6,81±0,39	7,09±0,33
Гемоглобин, г/л	90,5±5,18	92,8±3,78
Гематокрит, %	24,7±1,93	26,8±1,28
Тромбоциты, 109/л	790±155	621±43,3
Лейкоциты, 109/л	8,48±0,77	11,8±0,9**
Палочкоядерные нейтрофилы,%	4,0±0,7	9,3±1,71**
Сегментоядерные нейтрофи-лы,%	37,5±4,52	49,3±3,69*
Моноциты,%	10±1,2	7,3±1,67
Лимфоциты,%	47,6±4,98	33,7±2,44*
Эозинофилы,%	0,3±0,15	0,2±0,2
Базофилы%	06±027	02±013
** р<0,01; * р<0,05 – разница достоверна в сравнении с первой группой.

Так, количество тромбоцитов, эритроцитов, гемоглобина и гематокрит не имели достоверных различий и находились в пределах физиологической нормы в обеих опытных группах.

Достоверные результаты мы получили при сравнении количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы у телят первой и второй группы. Так, у телят второй группы более высокие показатели мы получили в количестве лейкоцитов на 28% (р<0,01), содержании палочкоядерных (р<0,01) и сегментоядерных (р<0,05) нейтрофилов на 57 и 24% соответственно и на 29 % ниже было содержание лимфоцитов (р<0,05). Наблюдаемый нейтрофилез и лимфоцитопения свидетельствует о воспалительном процессе в организме телят второй группы [10].

По биохимическим показателям крови оценивают состояние обменных процессов в организме. Результаты биохимического анализа крови телят опытных групп представлены в таблице 2 .

Таблица 2 ‒ Биохимические показатели крови телят опытных групп

Показатели             1 группа               2 группа

Общий белок, г/л	66,1±1,95	63,6±1,53
Альбумины, г/л	32,5±0,7	32±0,94
Глобулины, г/л	33,6±1,87	31,7±1,83
Глюкоза, ммоль/л	4,7±0,19	3,82±0,12**
Холестерин, ммоль/л	2,66±0,25	2,86±0,1*
Мочевина, ммоль/л	4,17±0,53	4,81±0,52
Кальций, ммоль/л	3,12±0,1	2,79±0,11*
** р<0,01; * р<0,05 – разница достоверна в сравнении с первой группой.

Из полученных данных следует, что показатель общего белка в крови всех телят находился в пределах нормативных значений. Однако в крови больных телят уровень общего белка был ниже на 2,5 г/л. При этом количество альбуминов и мочевины у телят обеих опытных групп недостоверно находился на одном уровне, а количество глобулинов у телят с расстройствами функций желудочно-кишечного канала, сопровождающимися диарейным синдромом, было ниже при сравнении с телятами первой группы.

Уровень обмена холестерина у всех телят достоверно находился на одном уровне и соответствовал физиологической норме. Достоверные изменения между группами также мы получили и при оценке концентрации кальция в крови. Так, у телят второй группы мы отмечали снижение уровня кальция и глюкозы в сыворотке крови, что связано, по-видимому, с нарушением процессов всасывания в кишечнике у телят с диспепсией.

Кроме морфологических и биохимических показателей крови мы также оценивали и состояние плазменно-коагуляционного звена гемостаза (табл. 3) и показатели естественной резистентности (табл. 4) у телят в обеих группах.

Таблица 3 ‒ Показатели естественной резистентности и неспецифической защиты организма у телят опытных групп

Показатели	1 группа	2 группа
ФЧ, м.т	3,61±0,49	3,58±0,62
ФИ, м.т	2,06±0,47	2,06±0,55
ФА, %	53,6±6,87	49,6±6,54

Показатели	1 группа	2 группа
ФЁ, тыс.нейтр/мкл	65,8±35	90,9±32,6
БАСК,%	58,4±4,59	68,8±1,18
ЛАСК,%	10±1,13	10,8±1,26

Примечание. Достоверных изменений между группами не наблюдали.

Таблица 4 ‒ Гемостазиологические показатели крови телят опытных групп

Показатели	1 группа	2 группа
Фибриноген, г/л	2,88±0,16	4,16±0,51*
АЧТВ	41,5±1,3	43±2,05
ПВ	37±0,84	33,6±0,75**
ТВ	32,2±4,36	26,6±1,06
** р<0,01; * р<0,05 – разница достоверна в сравнении с первой группой

Так, по результатам полученных данных достоверных изменений в показателях естественной резистентности мы не наблюдали. Однако стоит отметить, что такие показатели как ФЧ, ФИ и ЛАСК не менялись и у телят обеих групп находились на одном уровне, показатель ФА был выше у здоровых телят, а показатели ФЁ и БАСК были выше у телят второй группы.

При оценке плазменно-коагуляционного звена гемостаза мы наблюдали достоверное повышение уровня фибриногена на 31% (р<0,05) у телят второй группы. При этом укорачивается тромбиновое время на 17%, что свидетельствует о функциональной полноценности повышаемого фибриногена. Достоверное укорочение протромбинового времени (р<0,01) на 9% свидетельствует об активации внешнего пути свертывания. При этом АЧТВ как показатель внутреннего пути свертывания оставался практически неизменным.

Анализ корреляционных связей у здоровых телят показал тесную положительную связь между показателями ТВ, количеством лейкоцитов, их ФЁ и уровнем холестерина. У телят с диспепсией ни одна из этих связей не сохраняется (рисунок) .

1 опытная группа

• - тесная положительная связь, - тесная отрицательная связь

Эрит. – эритроциты, Тромб. – тромбоциты, Лейк. – лейкоциты, ФА – фагоцитарная активность, ФЕ – фагоцитарная емкость, БАСК – бактерицидная активность сыворотки крови, ЛАСК – ли-зоцимная активность сыворотки крови, ОБ – общий белок, Альб. – альбумины, Глоб. – глобулины, Глюк. – глюкоза, Хол. – холестерин, Моч. – мочевина, Кальц. – кальций, Фибр. – фибриноген, АЧТВ – активированное частичное тромбопластиновое время, ПВ – протромбиновое время, ТВ – тромбиновое время.

Рисунок. Корреляционный анализ показателей у телят

Уровень глюкозы обратно коррелирует с количеством холестерина, общего белка и глобулинов у здоровых телят. При этом у телят второй группы взаимосвязь глюкозы с другими показателями отсутствует.

Показатели гуморального звена иммунной защиты коррелируют между собой у здоровых телят. У телят второй группы с увеличением лизоцимной активности сыворотки крови возрастает количество фибриногена, снижается уровень кальция в крови и укорачивается тромбиновое время. При этом отрицательная связь наблюдается между показателями: фибриноген-кальций и фибриноген-ТВ.

Заключение. Выполненное исследование содержит новые данные актуальной научной проблемы ‒ о специфике естественной резистентности и физиолого-биохимического статуса телят в постнатальном онтогенезе. Установленные особенности неспецифической защиты и физиолого-биохимического статуса телят с возрастом важны при создании оптимальных условий их содержания и кормления, необходимых для полного раскрытия всех генетических возможностей организма. Полученные результаты позволяют дополнить уже имеющийся материал о резистентности организма в общем и естественной резистентности в частности у молодняка крупного рогатого скота в молочную и переходную фазы постнатального онтогенеза.

Имеется корреляционная связь между иммунологическими, морфофизиологическими и биохимическими показателями крови телят в молочную и переходную фазы постнатального онтогенеза. Таким образом, следует отметить изменение силы и направленности корреляционных связей между показателями у здоровых телят и телят с диспепсией. При этом наиболее интересная взаимосвязь наблюдается между показателями иммунного статуса и гемостаза, что требует дальнейших исследований в этом направлении.