Состояние неспецифической резистентности у телят под влиянием нуклеиновых кислот и ронколейкина

Основой здоровья и возможности реализации продуктивного потенциала сельскохозяйственных животных является высокий уровень естественной резистентности и иммунного статуса их организма. Недостаточность защитных механизмов организма приводит к повышению уровня заболеваемости животных, невозможности адекватного ответа на чужеродные антигены, в том числе, вводимые при иммунизациях [5, 6].

Субпопуляцией Т-лимфоцитов продуцируется интерлейкин-2. «Зрелый»

интерлейкин-2 содержит 133 аминокислотных остатка и одну углеводную цепь. На его основе разработан и используется в ветеринарии и медицине препарат Интерлейкин-2 человека рекомбинантный (Ронколейкин), обладающий иммуномодулирующим действием. [3].

Стимулятором лейкопоэза является также препарат деринат натрия, представляющий собой смесь натриевых солей полихлоргидратов дериватов ДНК и РНК.

Основной задачей исследований было изучение влияния смеси солей ДНК и РНК, а также препарата интерлейкина-2 (Ронколейкина) на лейкопоэз у телят в молочный период и становление неспецифической резистентности.

Материалы и методы. Опыты проведены на кафедре анатомии, хирургии и внутренних незаразных болезнях Нижегородской сельскохозяйственной академии, на телятах 20-30-дневного возраста в условиях хозяйства «Центральное» Нижегородской области и в виварии ВНИИФБиП (Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания животных, г. Боровск, Калужской области).

Первый опыт выполнен на телятах на 2-х группах (опытная и контроль), в каждой группе по 10 голов. Основная задача опыта - выявить влияние нуклеиновых кислот на морфологический состав крови телят и становление у них неспецифической резистентности.

Телятам опытной группы препарат на основе смеси ДНК и РНК инъецировали парентерально двукратно в дозе 100мг на голову. Животным контрольной группы вводили подкожно физиологический раствор хлористого натрия.

Во втором опыте , проведенном в хозяйстве "Центральное", телятам опытных групп 20-30- дневного возраста вводили парентерально препарат интерлейкин-2 (Ронколейкин) (первая опытная группа) в дозе 0,2 мг на животное однократно, вторая группа служила контролем. Основная задача опыта - изучить влияние интерлейкина на морфологический состав крови животных, иммунологические и биохимические показатели крови и становление неспецифической резистентности. В каждой группе имелось по 15 телят.

Формирование групп в опытах проводилось по принципу парных аналогов. Животные содержались в профилактическом помещении в хозяйстве, в виварии в клетках в помещении, где находились коровы. Велось клиническое наблюдение за подопытными животными. Взвешивание проводилось пред началом опыта и через 1 и 2 месяца после его начала. Телята имели свободный доступ к сену, к комбикорму и воде.

Пробы крови из яремной вены брали через 10 суток после введения препаратов, а во втором опыте и через 30 дней.

При анализе крови применены следующие методы (Кондрахин и др., 2004):

• -    сывороточные иммуноглобулины – по реакции помутнения с сульфатом цинка;

• -    количество форменных элементов крови – в камере Горяева;

• -    концентрация белковых фракций в сыворотке крови – нефелометрическим методом;

• -    уровень гемоглобина – по методу Сали;

• -    бактерицидная активность сыворотки крови – методом в модификации О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966) с применением тест-культуры Staphilococcuc epidermidis;

• -    лизоцимная активность – методом в модификации УНИИЭВ с использованием тест-культуры Micrococcus lysodeikticus;

Содержание белка, мочевины и глюкозы в крови определяли методами, изложенными в биохимическом справочнике, подготовленным во ВНИИФБиП (Боровск, 1997).

Анализы выполнялись в лаборатории белково-аминокислотного питания (ВНИИФБиП), клинической ветлаборатории, на кафедре анатомии, хирургии и внутренних незаразных болезней Нижегородской ГСХА и в областной ветлаборатории.

Статистическая обработка полученных материалов проводилась методом парных сравнений (Асатиани, 1965).

Результаты исследований. Первый опыт проведен в виварии института г. Боровск на 2-х группах телят 20-30дневного возраста. Телятам первой группы препарат на основе смеси ДНК и РНК инъецировали парентерально двукратно в дозе 100мг на голову, вторая группа служила контролем.

У телят после введения смеси нуклеиновых кислот, наблюдалось достоверное повышение уровня лейкоцитов в крови (+7,7%, Р<0,05) по сравнению с животными контрольной группы, в основном за счет сегментоядерных нейтрофилов (+38,7%), при некотором снижении уровня лимфоцитов (-11,4%).

Изменение уровня нейтрофилов и лимфоцитов у телят опытной группы привело к изменению показателей неспецифической реактивности: снизился индекс лимфоциты/сегментоядерные нейтрофилы на 36,2%, но повысился индекс нейтрофилы/лимфоциты у телят на 59,2%.

Выявленные различия морфологических показателей крови у телят опытных групп и контрольной нашли отражение в биохимических показателях крови этих животных. Уровень общего белка в сыворотке крови был выше у телят, которым вводили Интерлейкин на 23,6% в сравнении с контрольной группой, а иммуноглобулинов на 24,1%. Различия по уровню гемоглобина крови были несущественными, как и по количеству эритроцитов в крови, концентрации мочевины и глюкозы.

Таким образом, смесь ДНК и РНК, введенная парентерально телятам молочного периода выращивания, повысила уровень лейкоцитов в крови, а также оказала воздействие на иммунологические показатели.

Во втором опыте , проведенном в хозяйстве «Центральное» Нижегородской области, телятам опытных групп 20-30дневного возраста вводили парентерально препарат интерлейкина-2 – ронколейкин (первая группа) в дозе 0,2 мг на животное однократно, вторая группа являлась контролем.

У телят опытной группы, которым вводили ронколейкин, через 10 дней содержание лейкоцитов было выше, чем у телят контрольной группы на 31,2% (р<0,05) за счет сегментоядерных нейтрофилов (27,6%), при снижении уровня лимфоцитов (-8,9%), но общее количество лимфоцитов (тыс/мкл) возросло на 19,6%, был выше показатель неспецифической реактивности нейтрофилы/лимфоциты на 41%.

Выявленные различия морфологических показателей крови у животных опытных групп нашли отражение в показателях неспецифической резистентности. Фагоцитарная активность крови у телят опытной групп была выше на 18,7 %, чем в контроле, что обусловлено в значительной мере функцией нейтрофилов. Увеличение фагоцитарного индекса отражает повышение и активности фагоцитарных клеток крови.

Бактерицидная активность сыворотки крови, показывающая суммарное действие гуморального и клеточного звеньев защиты, была выше у телят опытной группы на 18,2% при введении ронколейкина, чем в контроле.

Из биохимических показателей крови более четкое повышение отмечено по содержанию α-глобулинов (+30,3%, р<0,05) у телят после введения ронколейкина в сравнении с контрольной группой.

При повторном исследовании крови по отмеченным показателям через 30 дней после начала опыта (введения препаратов) различия с контрольной группой у животных опытной группы в отдельных случаях снизились. Выровнялся уровень лейкоцитов в основном за счет уменьшения количества сегментоядерных нейтрофилов, но при этом возросло содержание лимфоцитов, что привело к изменению показателей неспецифической реактивности.

Стимуляция неспецифической резистентности телят введением парентерально ронколейкина способствовала повышению прироста живой массы телят на 22,0% в сравнении с контрольной группой (478 г/сут и 583 г/сут соответственно в контроле и опытной группе) в молочный период выращивания за 2 месяца наблюдения.

Заключение. Полученные данные позволяют уточнить некоторые стороны регуляции формирования иммунитета и становления неспецифической резистентности у телят в молочный период выращивания, что должно быть учтено при разработке физиологически обоснованных способов иммуностимуляции в этот период, часто сопровождающийся иммунодефицитами и болезнями инфекционной этиологии.

Резюме

Изучались уровень иммуноглобулинов и морфологические показатели крови телят при введении им препарата нуклеиновых кислот и интерлейкина-2.

Применение препарата нуклеиновых кислот повысило уровень лейкоцитов, белка и иммуноглобулинов в крови телят.

При использовании интерлейкина-2 отмечено существенное повышение в крови телят уровня лейкоцитов, и гамма-глобулинов. Ронколейкин стимулировал становление неспецифической резистентности, что проявилось в увеличении показателей фагоцитарной и бактерицидной активности крови телят.

Повышение показателей неспецифической резистентности телят сопровождалось увеличением прироста живой массы телят в молочный период выращивания.

STATE OF NONSPECIFIC RESISTANCE CALVES UNDER THE INFLUENCE NUCLEIC