Влияние фуразолидона на показатели белых кровяных клеток цыплят

Введение. Промышленное птицеводство является интенсивно развивающейся отраслью современного сельского хозяйства. При этом, настолько активное развитие приводит к возникновению трудностей, которые связаны с содержанием сельскохозяйственной птицы в условиях птицекомплекса. Например, слишком плотная посадка вызывает рост рисков заражения животных инфекциями, вспышки которых снижают продуктивность, а также могут приводить к массовой гибели птицепо-головья. Использование антимикробных препаратов для терапии и профилактики инфекционных заболеваний является вполне эффективным [1], однако важным является своевременное выявление возможного отрицательного действия антибиотика на физиологическое состояние животных. Отличительная особенность нитрофуранов – способность к быстрой утилизации в организме, при этом метаболиты, которые образуются при приеме препаратов этой группы, достаточно долго можно обнаружить в органах и тканях. Антимикробный эффект фуразолидона реализуется путем блокировки работы бактериальных ферментов, что ингибирует процессы клеточного дыхания, нарушает работу цикла Кребса, прекращает синтез нуклеиновых кислот и, как следствие, приводит к гибели микроба. Фуразоли-дон применяют при заражении грамположи-тельными и грамотрицательными бактериями, кроме того он эффективен при кокцидиозе и трихомонадозе [2, 3, 4]. Известно, что у достаточно широкого спектра микроорганизмов редко развивается резистентность к нитрофуранам. Исходя из вышесказанного, важным является изучение последствий влияния нитрофуранов на показатели крови цыплят [5, 6, 7]. Особое внимание следует обратить на возможное изменение количества псевдоэозинофилов, как микрофагального компонента неспецифического иммунитета у птиц. Псевдоэозинофилы не дифференцируют объекты по антигенам, в связи с чем их часто рассматривают вне иммунной системы и не относят к иммунокомпетентным клеткам. Однако, полиморфноядерные лейкоциты используют специфические иммунные механизмы для осуществления своих функций.

Цель исследования – выявить изменения показателей белой крови цыплят при использовании фуразолидона.

Условия, материалы и методы. Исследования осуществлены на базе Белгородского филиала ФГБНУ «Федеральный научный центр - Всероссийский научноисследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук» (Белгород). Для достижения поставленной цели, по принципу аналогов, были сформированы две группы суточных петушков кросса Хайсекс-Браун - контрольная (50 голов) и опытная (50 голов). Птицы контрольной интактной группы получали сбалансированный по всем компонентам основной рацион. Для цыплят опытной группы в дозе 200 мг/л на протяжении первых десяти суток жизни с водой вводили фуразолидон.

Отбор крови осуществлялся на первые, третьи, пятые, седьмые и девятые сутки после отмены препарата.

При исследовании гематологических показателей определяли количество лейкоцитов, лейкоцитарную формулу, а так же проводили расчет лейкоцитарных индексов.

Количество лейкоцитов подсчитывали с использованием камеры Горяева.

Расчет лейкоформулы осуществлен в относительных и абсолютных значениях, после чего определяли лейкоцитарные индексы: «лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс», «индекс Кребса» (индекс соотношения нейтрофилов и лимфоцитов), «лейкоцитарный индекс», «лейкоцитарный индекс интоксикации», «индекс сдвига лейкоцитов крови», «индекс иммунореактивности».

Статистическая обработка полученного цифрового материала осуществлена с использованием программы SPSS Statistic 17.0. В связи с небольшим объемом выборки статистическую значимость полученных результатов оценивали при помощи непараметрического критерия Манна-Уитни.

Результаты и обсуждение. Данные, полученные при подсчёте общего числа лейкоцитов, свидетельствуют о лейкопении, которая была выявлена у цыплят, получавших фуразолидон (рис. 1).

Рисунок 1 – Динамика общего числа лейкоцитов цыплят, 109×л-1

Примечание: * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни приp<0,05.

Количество лейкоцитов в группе Ⅱ было ниже, чем в контрольной. Лейкопения может регистрироваться при угнетении функционирования органов кроветворения [8]. При этом, в целом, численность лейкоцитов нормализовалась к девятым суткам после отмены препарата.

Динамика лейкограммы крови цыплят обеих групп эксперимента была неоднозначной (табл. 1).

Обнаружены статистически значимые изменения количества базофилов в группе, получавшей фурозалидон на первые, третьи, седьмые и девятые сутки после отмены препарата. Увеличение содержания базофилов в периферичсекой крови цыплят можно связать с восприятием фуразолидона как антигена [9].

Количество эозинофилов возросло в крови цыплят в первые, третьи и седьмые сутки эксперимента (на 30%, 5% и 21% соответственно), и снизилось в сравнении с группой интактного контроля на пятые сутки на 10%, и на девятые, с разницей в 15%. Неоднозначная динамика эозинофилов свидетельствует о возникновении возможной реакции гиперчувствительности на препарат [10].

Таблица 1 - Лейкограмма крови цыплят, %

Показатель	Группа	Срок исследования, сут.
		1	3	5	7	9
Базофилы	Ⅰ	2,01±0,52	1,32±0,21	2,02±0,37	1,81±0,40	1,53±0,34
	Ⅱ	2,70±0,42	2,51±0,34*	2,31±0,42	1,31±0,21	1,72±0,33
Эозинофилы	Ⅰ	6,02±0,97	7,83±0,48	7,33±0,76	6,02±0,73	8,51±0,76
	Ⅱ	8,01±0,58*	8,22±0,48	6,74±0,49	7,33±0,42	7,22±0,48
ПЭ	Ⅰ	52,83±1,17	58,04±1,37	55,72±1,54	58,72±2,03	55,82±1,66
	Ⅱ	64,22±1,52*	58,03±2,11	57,50±1,23	57,33±1,99	58,51±0,92
Лимфоциты	Ⅰ	37,52±1,48	31,03±1,21	32,71±1,12	31,54±0,99	31,83±0,95
	Ⅱ	22,71±1,36*	30,32±1,31	31,01±1,24	30,72±1,12	30,71±0,80
Моноциты	Ⅰ	1,70±0,33	1,81±0,48	2,33±0,42	2,01±0,52	2,33±0,42
	Ⅱ	2,50±0,56	2,71±0,49	2,52±0,67	3,31±0,76	2,01±0,45

Примечание: ПЭ – псевдоэозинофилы; * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни при p<0,05.

Различий по количеству псевдоэозинофилов и лимфоцитов в течение всего эксперимента не было обнаружено, за исключением первых суток после отмены препарата. Количество моноцитов оставалось стабильной в обеих группах в течение всего эксперимента.

Фагоцитарную активность и пролиферацию полиморфноядерных лейкоцитов характеризует «Лейкоцитарный индекс интоксикации» (ЛИИ). «Индекс сдвига лейкоцитов крови» (ИСЛК) свидетельствует о величине реакции организма при развитии острого воспалительного процесса.

Выявлено, что у интактных цыплят и цыплят, получавших фурозалидон, согласно значениям «лейкоцитарного индекса интоксикации», низкий уровень эндогенной интоксикации. В группе Ⅱ отмечена положительная динамика этого показателя. «Индекс сдвига лейкоцитов крови» характеризуется определенным превышением нормативных значений в сторону интенсивного гранулоци-тоза (табл. 2), что свидетельствует о развитии инфекционно-воспалительного процесса.

Лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс (ИЛГ), позволяет определить этиологию интоксикации и используется для оценки воспалительного процесса (табл. 3). У цыплят, получавших фурозалидон, зафиксирована интоксикация экзогенного происхождения в первый день после отмены препарата. Возвращение этого показателя к нормативным значениям происходит в течение последующего учтённого в эксперименте времени.

Таблица 2 - Динамика индексов эндогенной интоксикации, у.е.

Срок исследования, сутки	Лейкоцитарный индекс интоксикации		Индекс сдвига лейкоцитов крови
	Группа Ⅰ	Группа Ⅱ	Группа Ⅰ	Группа Ⅱ
1	1,11±0,06	1,82±0,12*	1,63±0,12	3,11±0,27*
3	1,42±0,07	1,41±0,08	2,12±0,14	2,13±0,14
5	1,31±0,08	1,43±0,07	1,93±0,08	2,04±0,12
7	1,51±0,12	1,42±0,10	2,01±0,11	2,01±0,14
9	1,31±0,08	1,42±0,06	1,91±0,07	2,11±0,07

Примечание: * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни приp<0,05.

Таблица 3 - Динамика лимфоцитарно-гранулоцитарного индекса, у.е.

Срок исследования, сутки	Группа Ⅰ (контроль)	Группа Ⅱ (опыт)
1	0,61±0,04	0,32±0,03*
3	0,51±0,03	0,51±0,03
5	0,52±0,03	0,53±0,03
7	0,51±0,02	0,53±0,03
9	0,51±0,02	0,52±0,02

Примечание: * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни приp<0,05.

Использование «Индекса Кребса» (ИК), «Лейкоцитарного индекса» (ЛИ) и «Индекса иммунореактивности» (ИИР) позволяет оценить неспецифическую реактивность организма цыплят (табл. 4). В качестве косвенного физиологического признака для исследования адаптивного потенциала организма под действием стрессирующих факторов используется «Индекс Кребса». Выявлено стабильное превышение нормативных значений этого индекса в группе цыплят, получавших фурозали-дон, с положительной динамикой к девятым суткам после отмены препарата.

«Лейкоцитарный индекс» характеризует степень адаптации организма животных к влиянию экзогенных и эндогенных факторов. Установлена корреляция значений «Лейкоцитарного индекса» с показателями «Индекса Кребса»: стабильно снижено в группе Ⅱ, с положительной динамикой во временном тренде.

Показано, что при дифференциальных подсчетах белых кровяных клеток серийные индексы, преимущественно, более информативны, чем изменение численности или, так называемый, «сдвиг влево».

Таблица 4 - Динамика индексов неспецифической реактивности, у.е.

Сутки	Индекс Кребса		Лейкоцитарный индекс		Индекс иммунореактивности
	группа Ⅰ	группа Ⅱ	группа Ⅰ	группа Ⅱ	группа Ⅰ	группа Ⅱ
1	2	3	4	5	6	7
1	1,41±0,10	2,93±0,22*	0,71±0,04	0,44±0,03*	31,42±5,6	16,61±4,0
3	1,92±0,12	1,92±0,14	0,51±0,03	0,51±0,04	27,23±5,1	18,62±4,8
5	1,70±0,09	1,91±0,11	0,61±0,03	0,50±0,03	20,82±4,8	21,82±5,4

Продолжение Таблицы 4

1	2	3	4	5	6	7
7	1,92±0,12	1,92±0,13	0,51±0,04	0,51±0,04	25,52±5,7	15,84±4,7
9	1,81±0,10	1,92±0,06	0,61±0,03	0,54±0,02	20,72±4,1	23,62±4,7

Примечание: * – статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и опытной группах по U-критерию Манна-Уитни приp<0,05.

Выводы. Результаты анализа гематологических показателей крови свидетельствуют об отсутствии отрицательного воздействия фура-золидона на физиологическое состояние цыплят при выпаивании в первые десять суток жизни в дозе 200 мг/л.

При анализе данных лейкограммы установлен гранулоцитоз у птиц группы Ⅱ, сопровождающийся незначительной псевдоэозинофилией. Расчет лейкоцитарных индексов свидетельствует о несущественных отличиях от нормы в группе Ⅰ. При этом гематологические показатели находились в рамках нормативных значений. Статистически значимых отличий между показателями лейкограммы в группах Ⅰ и ⅠⅠ, к девятым суткам после отмены препарата, не выявлено.

В целом, к девятым суткам после отмены препарата показатели системы крови цыплят группы Ⅱ достоверно не отличались от значений таковых в контрольной группе цыплят, что свидетельствует об отсутствии критичного воздействия фура-золидона на организм птицы при назначении препарата с профилактической целью с водой для поения.