Влияние гормональной стимуляции на биоморфологические показатели трутней при варроатозной инвазии

Введение. В ряде отраслей, особенно в пчеловодстве, при разведении пчел важной проблемой является клещевое заболевание вар-роатоз. Отрицательные воздействия клеща главным образом выражаются массовой гибелью личинок, куколок и взрослых пчел. Болезнь редко удается обнаружить на начальной стадии из-за отсутствия явных клинических признаков. Весной и осенью клещ поражает пчелиный приплод, а летом – трутневой. Клещ живет на трупах пчел, трутней, куколок 11 дней, на открытом расплоде 15 и на запечатанном – 32 дня [1, 2].

Цель исследования – изучение влияния гормональной стимуляции трутней при варроа-тозной инвазии на живую массу, объем гемолимфы и концентрацию сперматозоидов.

Объекты и методы. Эксперименты проводились на пчелиных семьях карпатской породы. Все семьи перед постановкой в зимовник обработаны противоварроатозным препаратом «Фу-мисан». По две полоски, пропитанные этим препаратом, помещали в улей на 21-й день. Для постановки экспериментов были сформированы шесть групп семей-аналогов, исследовали по 9 трутней в каждой. С 1-й по 5-ю группу включали семьи, пораженные варроатозом, процент за-клещеванности которых не превышал 20 %. В 6-ю контрольную группу объединили условно здоровые семьи пчел, заклещеванность которых не превышала 4 %.

Все группы подвергались стимуляции путем подкормки сахарным сиропом и медовой сытой, которую давали по 400 мл на семью через день,

• 9 раз. Сахарный сироп готовили из расчета 1 литр кипяченой воды на 1 кг сахара до полного растворения сахара. Медовая сыта - 1 литр кипяченой воды на 1 кг меда до полного его растворения [3, 4].

Осенью и весной в качестве стимулирующей подкормки семьям давали: 1-я группа - сахарный сироп (1:1) с добавлением феромона пчелиной матки (апирой); 2-я группа - медовая сыта (1:1) с добавлением феромона пчелиной матки (апирой); 3-я группа - сахарный сироп (1:1) с добавлением гормона гонадотропин; 4-я группа - медовая сыта (1:1) с добавлением гормона гонадотропин; 5-я группа - сахарный сироп (1:1); 6-я группа - медовая сыта (1:1) [5-7].

Определение экстерьерных и интерьерных показателей организма трутней проводили по общепринятым биохимическим методикам в аккредитованной исследовательской лаборатории кафедры аквакультуры и пчеловодства РГАУ - МСХА имени К.А. Тимирязева.

Для получения одновозрастных трутней проводили инкубацию зрелого расплода в термостате марки ТС-80 при 35 °С. В термостате поддерживали относительную влажность 75-85 %. Однодневных трутней метили и по соответствующим группам возвращали в ульи. Массу пчел определяли взвешиванием на аналитических весах. Для исследования количества сперматозоидов в семенниках у трутней отбор спермы осуществляли в градуированный капилляр. Отобранную сперму помещали на часовое стекло, после чего ее тщательно перемешивали с 1 мл 0,9 %-го раствора хлорида натрия. Стеклянной палочкой брали 1 каплю суспензии спермиев в воде и помещали ее в камеру Горяева. Подсчет спермиев в камере вели в 80 малых квадратах, расположенных по диагонали. Учитывали спермии, лежащие внутри малого квадрата, а также на левой и верхней его линиях. В связи с тем, что содержимое семяприемника растворено в 1 мл 0,9 %-го раствора хлорида натрия, расчет вели по формуле v а • 4000000•200

Х =------77------ ’

где Х - количество спермиев в 1 мл их водной суспензии, шт.; а - количество спермиев в 80 малых квадратах, шт.; 80 - количество сосчитанных малых квадратов; 4000000 - множитель, приводящий результат к объему 1 мл, так как объем малого квадрата равен 1/4000000 мл; 200 - степень разведения суспензии спермиев.

Рассчитанное содержание спермиев в одном миллилитре их суспензии принимали за количество спермиев в 1 мм3 [8-10].

Полученные данные подвергались статистической обработке методами вариационной статистики с проверкой достоверности результатов с использованием t-критерия Стьюдента и уровня значимости [5].

Результаты и их обсуждение. В таблице 1 и на рисунке 1 представлены результаты влияния стимулирующей подкормки с гормоном-феромоном пчелиной матки и гонадотропином на показатели массы тела в процессе развития трутней.

Таблица 1

Живая масса трутней при гормональной стимуляции, мг

Группа	Возраст пчел, дни
	1	7	14	21	28
1	2	3	4	5	6
Стат. показатель	М±т, (Cv,%)	М±т, (Cv,%)	М±т, (Cv,%)	М±т, (Cv,%)	М±т, (Cv,%)
1-я группа	275,9±10,05* (15,34)	270,4±8,92** (18,79)	254,7±9,54** (18,70)	238,3±7,86** (19,56)	224,5±9,04* (20,86)
2-я группа	284,2±12,68* (22,40)	277,5±9,22** (19,33)	262,3±7,46** (8,62)	257,5±8,63** (14,59)	245,0±12,16* (14,96)
3-я группа	279,0±11,96* (21,58)	275,6±8,34** (18,56)	258,6±5,42** (23,45)	241,8±3,26** (4,84)	229,4±6,27** (9,90)
4-я группа	283,0±9,98* (18,51)	279,4±9,5* (22,15)	263,1±7,22** (4,87)	252,6±8,46* (20,21)	243,9±6,28** (13,09)

Окончание табл. 1

1	2	3	4	5	6
5-я группа	212,7±6,49 (15,56)	207,3±5,24 (12,44)	202,4±6,11 (14,89)	199,6±8,31 (20,72)	181,2±10,68 (29,56)
6-я группа	269,3±9,29** (17,34)	265,6±8,18** (18,35)	247,3±7,72* (16,66)	235,5±4,52** (7,67)	220,0±9,86* (3,63)

Здесь и далее: * - Р < 0,05; ** - Р <0,01; *** - Р < 0,001.

С возрастом, в процессе дальнейшего развития трутней, наблюдалось понижение их живой массы по сравнению с фоновыми показателями, за которые приняты данные в суточном возрасте. У пчел 2-й группы их уровень на 1-й день жизни был значительно выше других и в среднем составил 284,2 мг.

Это превышало значение показателя больных трутней 5-й группы на 71,5 мг (25 %) и на 14,9 мг (5,2 %) 6-ю здоровую группу. Пчелы 1-й группы уступали этому значению (284,2 мг) на 8,3 мг (2,9 %), 3-я группа на 5,2 мг (1,8 %) и 4-я на 1,2 мг (0,4 %).

На 7-й день высокие показатели наблюдали у трутней 4-й группы - 279,4 мг, которые превышали 5-ю группу на 72,1 мг (26 %) и на 13,8 мг (4,9 %) 6-ю группу. Живая масса пчел 4-й группы превышала 1-ю на 9 мг (3,2 %), 3-ю -на 3,8 мг (1,4 %) и на 1,9 мг (0,7%) 2-ю группу.

На 14-й день лидировала также 4-я группа, живая масса пчел составила 263,1 мг, что выше, чем в 5-й группе, на 60,7 мг (23 %) и 15,8 мг (6 %), чем в 6-й группе. Первая группа уступала этому показателю на 8,4 мг (3,2 %), третья на 4,5 мг и на 0,8 мг вторая.

1 день

7 день

14 день

21 день

28 день

Рис. 1. Живая масса трутней при гормональной стимуляции

На 21-й день высокие значения массы тела наблюдали у пчел 2-й группы. Она составила 257,5 мг и превышала показатель больных трутней 5-й группы на 57,9 мг (на 22,5 %), а здоровых пчел 6-й группы - на 22 мг (8,5 %). Этот показатель в 1-й группе уступал 2-й группе на 19,2 мг (7,5 %), 3-й - на 15,7 (6,1 %) и 4-й группе - на 4,9 мг (1,9 %).

На 28-й день также лидировала 2-я группа. Средняя масса трутней при этом составила 245 мг. Больные пчелы из 5-й группы уступали по этому показателю на 63,8 мг (26 %), здоровая 6-я группа - на 25 мг (10,2 %). По этому значению (245 мг) уступали также пчелы 1 -й группы на 20,5 мг (8,4 %), 3-я - на 15,6 мг (6,4 %), 4-я -на 1,1 мг (0,45 %).

В таблице 2 и на рисунке 2 представлены результаты влияния стимулирующей подкормки с гормоном-феромоном пчелиной матки и гонадотропином на показатели объема гемолимфы в процессе развития трутней.

Во все дни наблюдения объем гемолимфы в метное повышение объема гемолимфы у пчел организме трутней был выше во 2-й и 4-й груп- наблюдалось до 14-дневного возраста.

пах по сравнению с остальными группами. За-

Таблица 2

Объем гемолимфы трутней при гормональной стимуляции, мм3

Группа	Возраст пчел, дни
	1	7	14	21	28
	М±т, (Cv, %)	М±т, (Cv, %)	М±т, (Cv, %)	М±т, (Cv, %)	М±т, (Cv, %)
1-я группа	6,50±0,01*** (0,66)	6,6±0,01*** (0,82)	7,7±0,01*** (0,29)	7,6±0,01*** (0,40)	7,3±0,01*** (0,52)
2-я группа	6,60±0,01*** (0,84)	7,80±0,01*** (0,27)	8,9±0,02** (1,09)	9,7±0,01*** (0,21)	9,2±0,01*** (0,53)
3-я группа	6,25±0,02* (1,57)	6,90±0,01*** (0,39)	7,50±0,02*** (1,07)	7,82±0,01*** (0,35)	7,30±0,01 (0,45)
4-я группа	6,63±0,01* (0,74)	7,76±0,01*** (0,35)	8,93±0,01*** (0,51)	9,65±0,01*** (0,29)	9,11±0,01 (0,37)
5-я группа	5,70±0,01 (0,38)	4,3±0,02 (0,85)	5,5±0,02 (0,43)	5,1±0,01 (0,31)	4,0±0,03 (4,11)
6-я группа	6,31±0,02** (1,42)	6,5±0,03* (2,14)	7,3±0,02* (0,44)	9,65±0,01*** (0,29)	6,92±0,01*** (0,37)

На первый день наблюдения объем гемолимфы был значительно выше у пчел 4-й группы и в среднем составил 6,63 мм3. Это значение превышало на 0,93 мм3 (14 %) показатель больных трутней 5-й группы и на 0,32 мм3 (4,8 %) -6-й. Пчелы 3-й группы также уступали на 0,38 мм3 (5,7 %), 1-й группы - на 0,13 мм3 (2 %) и 2-й - на 0,03 мм3 (0,5 %).

На 7-й день высокие показатели объема гемолимфы наблюдали у трутней 2-й группы -7,80 мм3. Они превышали 5-ю группу на 3,5 мм3 (44,9 %) и на 1,3 мм3 (16,7 %) - 6-ю. 1-я группа этому значению уступала в среднем на 1,2 мм3 (15,4 %), 3-я - на 0,9 мм3 (11,5 %) и на 0,04 мм3 (0,5 %) - 4-я группа.

Рис. 2. Объем гемолимфы трутней при гормональной стимуляции

На 14-й день лидировала 4-я группа, объем гемолимфы у них составил 8,93 мм3. Этот показатель превышал 5-ю группу на 3,43 мм3 (38,4 %) и на 1,63 мм3 (18,3 %) – здоровых трутней 6-й группы. Третья группа также уступала этому показателю на 1,43 мм3 (16 %), первая – на 1,23 мм3 (13,8 %) и на 0,03 мм3 (0,34 %) – вторая.

На 21-й день высокие значения объема гемолимфы наблюдали уже у пчел 2-й группы, который составил 9,7 мм3. Этот показатель превышал больных трутней 5-й группы на 4,6 мм3 (47,4 %) и здоровых пчел 6-й группы – на 0,05 мм3 (0,5 %). Первая группа уступала этому значению на 2,1 мм3 (21,6 %), третья – на 1,88 мм3 (19,4 %) и четвертая группа – на 0,05 мм3 (0,5 %).

На 28-й день также лидировала 2-я группа. Средний объем гемолимфы трутней у этой группы составил 9,2 мм3. Больные пчелы из 5-й группы уступали им на 5,2 мм3 (56,5 %), а здоровые – на 2,28 мм3 (24,8 %). По этому показателю (9,2 мм3) уступали пчелы первой и третьей групп на 1,9 мм3 (20,6 %), а четвертой – на 0,09 мм3 (1 %).

У трутней в конце опытов (28-й день) в 1 мм3 эякулята количество сперматозоидов в среднем составило: в 1-й группе – 8,19 млн, во 2-й – 9,35 млн, в 3-й – 8,46 млн, в 4-й – 9,48 млн. У здоровых трутней 6-й группы в среднем было 7,82 млн, а у больных 5-й группы – с колебанием от 3,2 млн до 2,14 млн.

Заключение. Варроатозная инвазия приводит к выраженному нарушению обменных процессов трутней, которое влияет на живую массу, объем гемолимфы и концентрацию сперматозоидов. Сравнительная оценка показала, что на 28-й день наблюдений живая масса больных трутней уступала здоровым на 38,8 мг (17,6 %), объем гемолимфы – на 2,92 мм³ (42,2 %) и концентрация сперматозоидов более 4,62 млн (59 %). Таким образом, стимулирующие подкормки с гонадотропином и гормоном-феромо-ном пчелиной матки положительно повлияли на живую массу, объем гемолимфы и концентрацию сперматозоидов трутней.